简介：摘要目的建立pOct4-Neo转基因的小鼠胚胎干细胞（ESC）株，为进一步研究ESC分化提供有力的保障。方法设置G418不同浓度进行小鼠ESC培养，确定ESC致死G418浓度；电穿孔法转染小鼠ESC，通过G418筛选并挑取阳性克隆，检测所得细胞胚胎干细胞特异性标志物Oct4及SSEA-1的表达，通过拟胚体诱导体外分化。结果ESC的致死浓度为350μg/mL，在含400μg/mlG418的培养条件下，所得阳性细胞呈克隆样鸟巢状生长，Oct4、SSEA-1表达阳性，体外可以形成拟胚体和自发分化。结论成功对小鼠ESC进行了pOct4-Neo的转基因，为进一步的小鼠ESC体外分化研究奠定了基础。

简介：新霉素对热较敏感，现有提取工艺主要采用蒸发脱氨和浓缩，提取率仅达75％，残余的新霉素以废水方式排放，增加了污染物的排放。本研究通过工艺改进经732树脂动态吸附与洗脱，新霉素的交换量为142．9mg·ml^-1树脂，洗脱收率高于96％，同时减少了工艺水的用量。用LSA-700树脂脱色效果优异711树脂，新霉素回收率达92．1％，色素OD值为0．38。最后通过200Da分子量的纳滤膜组件处理可有效去除物料中的NH4OH，新霉素的收率高于99．4％，副产物氨水可回收利用。优化后的新霉素提取率达88．2％，高于工厂现有水平，说明本工艺能够很好地应用于新霉素的提取。

简介：摘要目的观察新霉素对小鼠听功能及耳蜗毛细胞形态学变化的影响。方法选取C57BL/6小鼠16只在出生后第8天开始连续10 d皮下注射硫酸新霉素，对照组（10只）皮下注射等量生理盐水。停药后1、4、8、12 w进行听性脑干反应（ABR）检测。每次ABR检测后，新霉素组随机取3只小鼠，对照组随机取2只小鼠，处死后，取耳蜗进行冰冻切片，用免疫荧光方法观察耳蜗Corti器及毛细形态学变化。结果新霉素可造成小鼠耳蜗毛细胞严重损伤，且小鼠ARB阈值显著增高，不可恢复；新霉素对耳蜗Corti器毛细胞的损伤顶圈最轻，中圈次之，底圈最重，且随着时间推移Corti器形态结构破坏逐渐加重且不可自我修复。结论硫酸新霉素造成小鼠Corit器毛细胞的损伤是不可逆的。

简介：摘要目的考察复方硫酸新霉素滴眼液的安全性。方法对比观察复方硫酸新霉素滴眼液、5%辣椒酊、生理盐水局部应用、单次给药和连续给药1周对家兔眼的刺激性。结果复方硫酸新霉素滴眼液单次及多次给药对兔眼均无明显影响，双眼角膜透明，无混浊，虹膜纹理清晰，结膜无充血、水肿、分泌物。结论复方硫酸新霉素滴眼液临床应用是安全的。

简介：摘要目的建立HPLC-ELSD法测定新霉素的有关物质的方法。方法流动相0.2mol?L-1三氟乙酸溶液-甲醇（982）；色谱柱ODS－HYPERSIL（5μ）125mm×4.6mm，Kromasil-100-5C18150mm×4.6mm；流速0.4ml?min-1；雾化管温度30℃；漂移管温度70℃；压力0.4MPa；进样量20μL。结论新霉胺在0.02～0.1mg?mL-1范围内线性良好，线性方程为y=1.513x+7.629，r=0.9996(n=6)。HPLC-ELSD法法能够快速、准确测定新霉素的有关物质。

简介：摘要目的建立硫酸新霉素注射液的含量测定方法。方法采用旋光法测定硫酸新霉素的含量，同时考察附加剂、温度、pH值、放置时间以及光线等因素对旋光度的影响。结果硫酸新霉素在1～10mg/ml浓度范围内,旋光度与浓度呈良好线性关系,相关系数γ=0.9999,平均回收率为100.2%（n=9），RSD为0.50%，日内RSD为0.33%，日间RSD为1.20%。结论采用旋光法测定硫酸新霉素注射液中硫酸新霉素的含量，该法简便快速，结果准确，适用于医院制剂的快速分析。

简介：摘要目的以拥有不同抗菌药物耐药性的幽门螺杆菌(H.pylori)临床菌株为研究对象，基于全基因组测序探索H.pylori对克拉霉素和左氧氟沙星(LVX)耐药相关新基因。方法纳入2016年9月1日至2019年8月31日在香港大学深圳医院消化及肝脏科因上消化道相关症状就诊且13C尿素呼气试验阳性的1 749例患者，在行胃黏膜活体组织检查后进行胃黏膜组织H.pylori分离培养，成功保存H.pylori菌株90株。依据体外药敏试验结果，分别筛选克拉霉素单耐药(克拉霉素组)10株，LVX单耐药(LVX组)10株，克拉霉素和LVX双重耐药(双重耐药组)10株，克拉霉素、LVX、阿莫西林、呋喃唑酮、四环素、甲硝唑全敏感(全敏感组)10株，总计40株H.pylori菌株。通过全基因组测序，与综合抗性基因数据库(CARD)进行比对，分析单核苷酸变异(SNV)和插入缺失突变情况，筛选H.pylori对克拉霉素和LVX耐药相关基因并分析耐药相关新基因在4组间的表达差异。统计学方法采用独立样本t检验、单因素方差分析、最小显著差数法和卡方检验。结果克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组SNV位点数[(74 952.00±8 755.21)、(77 128.10±3 191.35)、(78 639.90±601.23)、(77 474.60±2 421.05)个]和插入缺失突变数[(2 582.20±265.45)、(2 653.60±108.37)、(2 667.10±43.82)、(2 641.10±80.25)个]比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。与CARD进行比对，共检出223个耐药相关基因，其中克拉霉素组克拉霉素单耐药相关基因19个，LVX组LVX单耐药相关基因24个，双重耐药组中有克拉霉素单耐药相关基因16个，LVX单耐药相关基因14个，双重耐药相关基因12个；全敏感组中有克拉霉素单耐药相关基因11个，LVX单耐药相关基因17个，双重耐药相关基因13个。克拉霉素单耐药相关基因中，红霉素酯酶基因(ere)B在克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组的检出率(0/10、0/10、3/10、0/10)比较差异有统计学意义(χ2＝5.79，P＝0.049)；红霉素核糖体甲基化酶基因(erm)家族在克拉霉素组和双重耐药组中的检出率高于LVX组和全敏感组[45.0%(9/20)比10.0%(2/20)]，差异有统计学意义(χ2＝6.14，P＝0.013)，游离甲硫氨酸-(R)-亚砜还原酶基因(msrC)在克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组检出率(10/10、7/10、6/10、4/10)比较差异有统计学意义(χ2＝8.97，P＝0.030)。LVX单耐药相关基因中，喹诺酮抗性五肽重复蛋白基因(qnr)家族在LVX组和双重耐药组的检出率高于克拉霉素组和全敏感组[60.0%(12/20)比25.0%(5/20)]，差异有统计学意义(χ2＝5.01，P＝0.025)；qnrB4在克拉霉素组、LVX组、双重耐药组、全敏感组检出率(1/10、3/10、7/10、1/10)比较差异有统计学意义(χ2＝10.17，P＝0.010)。4组中克拉霉素单耐药相关外排转运的基因个数少于LVX单耐药和双重耐药相关基因个数(11个比29个，11个比23个)，差异有统计学意义(χ2＝11.87、5.80，P＝0.001、0.016)。LVX相关外排转运基因在克拉霉素、LVX组、双重耐药组、全敏感组检出个数(28、40、24、27个)比较差异有统计学意义(χ2＝10.26，P＝0.016)。结论erm家族和msrC可能是介导H.pylori对克拉霉素耐药的重要基因，qnr家族与介导H.pylori对LVX耐药相关。外排转运基因可能在药物外排过程中有协同作用，其更倾向介导H.pylori对LVX耐药。

简介：摘要：抗生素滥用导致抗生素抗性基因大量出现，是人类健康和环境安全的潜在威胁，是亟待处理的一类新兴环境污染物。抗生素抗性细菌和抗性基因存在于整个污水处理流程中，尤其是生物处理单元会产生数量庞大的生物污泥，是抗性基因的重要存储库，也是向环境中传播抗生素耐药性的热点。本章通过讨论预处理-厌氧消化对污泥中抗生素抗性细菌（ARB）及抗性基因（ARGs）的影响，为剩余活性处理的安全处理和处置提供一个新思路，也为降低污水处理厂抗生素抗性传播提供一定的理论指导。

简介：摘要：水厂处理工艺在维护饮用水安全和生态环境健康中发挥着至关重要的作用。然而，随着抗性细菌和抗性基因问题的日益突出，传统的水处理工艺面临着挑战。本文旨在探讨水厂处理工艺对典型抗性细菌和抗性基因的去除效能及其影响因素，并提出相应的技术和管理建议，以应对这一挑战，保障饮用水安全和环境健康。

简介：摘要：ermG基因首次在土壤细菌球形芽孢杆菌中发现。为深入研究，我们通过NCBI网站分析获得ermG基因的蛋白质序列244aa和核苷酸序列735bp。运用ExPAsy程序对ermG基因分析ermG基因为稳定蛋白属于亲水性蛋白质。对ermG同源基因的分析获得8个不同物种的相似度较高的ermG同源基因并进行进化分析，进化分析显示ermG基因与WP063844787.1、WP 118308821.1、RHK62200.1种间的亲缘关系较近，在受到环境进化压力的情况下ermG基因的保守性较好。本研究对ermG基因的生物信息学分析将对以后相关的抗性基因以及抗性基因网络协同调节生态系统微环境调节提供重要的信息来源和理论基础。

简介：目的采用高效液相色谱法测定地塞米松磷酸钠的含量。方法以EclipseXDB-C18为色谱柱；以甲醇-0．34％磷酸二氢钾溶液（60：40）为流动相，以240m为检测波长，流速为1．0mi／min，柱温为20℃。结果地塞米松磷酸钠在0．4-1．6μg范围内线性关系良好，r=0．9996，平均回收率为99．2％，RSD为0．5％。结论该质量标准的研究有效控制了硫酸新霉素滴眼液的质量，方法简单、结果准确、灵敏度高。

简介：采用菌丝生长速率法，测定了4个麦区的5个禾谷丝核菌Rhizoctoniacerealis菌株对井冈霉素的抗药性；在含井冈霉素的PDA平板培养基上对禾谷丝核菌进行继代培养，以诱导抗药性菌系；测定了抗性菌系对其他杀菌剂的交互抗性。并比较了抗性和敏感菌系对渗透压的敏感性及药剂处理后两种菌系培养液内还原糖和可溶性蛋白的含量差异。结果表明，田间禾谷丝核菌菌株对井冈霉素分别产生了7．26、7．75、10．46、14．92和23．31倍的抗性。室内继代培养36代，禾谷丝核菌对井冈霉素的抗性达49．24倍，形成了抗井冈霉素菌系。抗井冈霉素菌系对嗯醚唑、福美双、三唑酮、丙环唑、戊唑醇和咯菌腈分别产生了48．58、21．78、17．62、10．95、2．55和1．78倍的交互抗性。抗性菌系在较低和较高渗透压下其生长抑制率均大于敏感菌系，用井冈霉素处理抗性和敏感菌系后。其体内的电解质都严重外渗，且抗性菌系在10h内的外渗量明显大于敏感菌系。

简介：摘要：抗生素被认为是一类新兴的环境污染物，其过度使用已导致环境中抗生素抗性细菌（ARB）和抗生素抗性基因（ARGs）的大量出现和广泛传播。城市污水处理厂出水是释放到环境中ARGs的主要来源。ARGs的存在不但会破坏水体生态环境，同时还会通过多种途径进入人体，威胁人体健康、食品和饮用水安全。本文综述了多种深度处理工艺对ARB和ARGs的去除研究进展，比较分析了去除效果差异及存在问题。在此基础上对今后深度处理工艺去除ARB和ARGs的重点关注方向提出了建议，以期为深度处理工艺控制ARB和ARGs提供参考。

简介：对转Bt-C肽+蜘蛛杀虫肽基因小黑杨的抗虫性做了系统的测定,取食转基因杨树舞毒蛾幼虫与对照相比,其发育速率为54.6%～72.8%、校正死亡率为72.8%～96.9%、体重降低率为11.2%～62.4%.证明抗虫基因已成功转入杨树中,并且表现出显著的抗虫性.

简介：分子标记辅助选择育种已成为水稻分子育种的主要策略。明确目标基因在染色体上的物理图谱定位与功能标记的开发应用是开展分子标记辅助选择育种的前提条件。本研究对已报道的40个抗白叶枯病基因在染色体上的定位、分子标记详情进行了整理总结,并将31个水稻白叶枯病抗病基因在水稻基因组物理图谱上进行定位标注;此外,本研究还归纳xa5、xa13、Xa21、Xa27四个抗病基因的功能标记,新开发了抗性基因Xa10、Xa23的功能标记。本研究将给育种工作者更好地利用水稻抗白叶枯病基因与鉴定抗性材料提供便利。

简介：摘 要：本研获得LsaE基因核苷酸序列1485bp，蛋白质序列494aa。通过Expasy程序分析LsaE基因为稳定性疏水性蛋白质。LsaE同源基因分析获得4个LsaE同源基因，这些同源基因的物种是S. suis、E. faecium。运用MAGA程序对LsaE基因构建进化树，进化分析显示LsaE基因AHC08069.1与 WP216806933.1亲缘关系最靠近。在微环境系统的调节中，LsaE同源基因在E. faecium、S. suis物种中较为保守以及功能相似。本研究对抗性基因LsaE基因的生物信息学分析以及深入的进化分析将对相关的抗性基因以及抗性基因网络协同调节生态系统微环境调节提供重要的信息来源和理论基础。

简介：目的建立了高效液相色谱法（HPLC)测定新霉素地塞米松滴眼液中苯扎氯铵含量的方法。方法采用C18色谱柱(250mmX4.6mm,5|jun),以0.02mol.L—1庚烷磺酸钠溶液[含0.1%三乙胺，用磷酸调节PH(3.45±0.1)]-乙腈（20:80)为流动相，检测波长210mn,流速1.0mL?mm-1，柱温40T：，进样体积20|xL。结果苯扎氯铵三种同系物在其各自的线性范围内（0.98~126.08、0.85~109.17、0.77~98.25mg.L—1)内呈良好的线性关系。苯扎氯铵的平均加样回收率为96.53%，RSD为1.75%。结论该方法准确可靠，操作简单快速，重复性好，灵敏度高，可用于同时测定新霉素地塞米松滴眼液中苯扎氯铵三种同系物的含量，为其安全性考察提供参考。

简介：目的建立具有潮霉素(hygromycin)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE-Ins-human)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层.方法通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因的质粒pHyg导入3T3细胞中,利用潮霉素的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR鉴定.结果经500μg/ml的潮霉素压力筛选后,获得了抗性细胞克隆.抗性3T3细胞的形态和生长速度与正常3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段.结论成功地培育了潮霉素抗性的3T3细胞,为进行目的基因(pTRE-Ins-human)转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选奠定了基础.

简介：目的：建立HPLC法、抗生素微生物检定法测定复方酮康唑乳膏中酮康唑、丙酸氯倍他索和硫酸新霉素的含量。方法：用HPLC法测定酮康唑和丙酸氯倍他索含量,色谱条件如下：Kromasil100-5C18柱（150mm×4.6mm,5μm）;流动相为甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钠溶液（内含0.15%三乙胺）=68∶32;流速1.0ml/min;柱温为室温;检测波长为239nm;进样量20μl。以金黄色葡萄球菌作为实验菌株,采用抗生素微生物检定法中管碟法中的二剂量法测定硫酸新霉素的效价。结果：酮康唑在25~800μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为98.52%,RSD为1.33%（n=6）。丙酸氯倍他索在0.625~20μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为97.60%,RSD为1.44%（n=6）。硫酸新霉素的回归非常显著（P〈0.01）,偏离平行不显著（P〉0.05）,可靠性测验结果成立,可信限率（FL%）良好,效价符合要求。结论：两种测定方法准确、灵敏,专属性强,重现性好,对复方酮康唑乳膏质量控制标准的提高具有参考意义。

简介：摘要三叉神经心脏反射（trigemino-cardiac reflex, TCR）是指在涉及第五对脑神经三叉神经的手术操作中，当心率和血压突然低于基线值20%的临床现象。听神经瘤切除术中常会因为三叉神经附近的手术操作和其他机械刺激而导致TCR，表现为突然心率减慢、血压下降甚至心脏停搏。此例患者为一名52岁女性，在全身麻醉下行右侧听神经瘤切除术。肿瘤切除后，关颅前使用硫酸新霉素溶液冲洗时患者突然出现心动过缓，继而出现心脏停搏，术者停止操作后患者恢复心脏搏动，整个过程为15 s左右。通过此病例讨论术中TCR的相关因素，加深对TCR的进一步认识与思考。