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  • 简介:以绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因,通过对比小鼠白蛋白启动在不同来源细胞系中启动_GFP基因的转录活性,对小鼠白蛋白启动的组织特异进行了研究.结果发现,小鼠白蛋白启动在小鼠肝癌细胞系Hepa1-6和人肝癌细胞系HepG2均有很强的转录起始功能,荧光显微镜下可以观察到GFP表达.Hepa1-6细胞在转染早期的48h内,CMV的启动和增强序列是小鼠白蛋白启动转录活性的4倍.G418加压筛选2周后,CMV的启动的转录活性下降到只有小鼠白蛋白启动活性的1/2.转染入肝癌细胞系HepG22周后,荧光显微镜下可以观察到GFP表达.其他的细胞如中华仓鼠卵巢细胞系CHO和人肺癌细胞系PLA801中转染的小鼠白蛋白启动不能启动GFP的表达,而对照CMV启动控制下的GFP基因可在CHO和PLA801中表达.以上结果说明,小鼠白蛋白启动仅在肝脏来源的细胞中可以起始下游基因的转录,在其他组织来源的细胞中不能起始转录,这表明小鼠白蛋白启动具有肝脏组织特异的转录活性,但没有种属特异.

  • 标签: 小鼠 白蛋白 启动子 组织特异性 功能 绿色荧光蛋白
  • 简介:摘要溶瘤腺病毒(OA),也称为条件增殖型腺病毒,是经基因改造,只在肿瘤细胞中特异增殖的新一代腺病毒载体,此载体对正常细胞无影响。其能感染特定类型肿瘤细胞,通过复制、增殖、裂解并杀伤肿瘤细胞,同时利用其高效的转染效率携带治疗基因,以此提高抗肿瘤效果,利用肿瘤特异启动是构建OA的主要方法。本文概述了肿瘤特异启动在OA治疗泌尿系肿瘤中的研究进展。

  • 标签: 泌尿系肿瘤 溶瘤腺病毒 转录启动子
  • 简介:摘要目的观察低氧条件下缺氧反应元件(HRE)与肿瘤特异细胞增殖相关核抗原Ki-67(MKI67)启动构成的嵌合型启动调控的溶瘤腺病毒在肾癌细胞中的增殖能力和杀伤作用。方法将HRE序列作为增强嵌合至肿瘤特异强的Ki-67启动上游,同时携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP),构建溶瘤腺病毒Ad-HRE-Ki-67-EGFP,组织半数感染剂量法(TCID50)测定滴度;两种病毒分别在常氧(21%O2)和低氧(1%O2)条件下感染正常肾上皮细胞人肾小管上皮细胞(HK-2)和肾癌细胞人肾细胞腺癌细胞(OSRC-2)、人肾腺癌细胞(ACHN),24 h后荧光显微镜及流式细胞仪检测病毒的靶向性;蛋白质印迹法(Western blot)检测低氧条件下细胞中低氧相关蛋白缺氧诱导因子(HIF)-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测病毒对细胞的杀伤能力。应用SPSS 19.0统计软件分析,组间均数比较采用t检验。结果成功构建重组溶瘤腺病毒Ad-HRE-Ki-67-EGFP;Ad-HRE-Ki-67-EGFP感染肾癌细胞ACHN和OSRC-2,常氧条件下Ad-HRE-Ki-67-EGFP的感染效率分别为(47.5±2.6)%和(35.2±3.4)%,低氧条件下分别为(86.4±3.4)%和(73.5?±2.3)%,即低氧条件下感染效率更高(ACHN:t=15.760;OSRC-2:t=16.190;P<0.01);正常肾小管上皮细胞HK-2在常氧条件下Ad-Ki-67-EGFP、Ad-HRE-Ki-67-EGFP两种病毒的感染效率为(22.4±3.1)%和(22.9±2.2)%,与肾癌细胞ACHN、OSRC-2比较(ACHN:(68.4±3.3)%和(72.1±2.9)%;OSRC-2:(56.1±3.1)%和(61.4±2.3)%),差异有统计学意义(Ad-Ki-67-EGFP:t=17.650、13.390;Ad-HRE-Ki-67-EGFP:t=23.680、21.430,P<0.01),说明2种腺病毒对肾癌细胞具有靶向性;Western blot结果显示低氧条件下缺氧诱导因子HIF-1α、血管内皮生长因子VEGF、p53蛋白的表达增多且表现为时间依赖性,说明低氧可以调节HIF-1α、VEGF、p53蛋白的转录及翻译水平;在低氧条件下,感染Ad-HRE-Ki-67-EGFP的两种肿瘤细胞的早期区域1A(E1A)蛋白表达水平明显高于Ad-Ki-67-EGFP感染后的水平;CCK-8结果显示在感染复数(MOI)值为MOI=20、100时,ACHN和OSRC-2细胞中Ad-HRE-Ki-67-EGFP-normoxia病毒组细胞的存活率为(73.4±2.0)%、(56.4±1.5)%和(79.9±1.8)%、(61.3±2.7)%,Ad-HRE-Ki-67-EGFP-hypoxia病毒组为(63.1±2.0)%、(31.6±2.1)%和(68.1±2.6)%、(35.8±3.1)%,Ad-HRE-Ki-67-EGFP-hypoxia病毒组表现出更强的增殖抑制作用[MOI(20):t=6.328、6.441;MOI(100):t=16.410、10.790,P<0.01]。结论在低氧条件下,嵌合HRE序列的重组溶瘤腺病毒在肾癌细胞中具有更强的复制能力和细胞杀伤作用。

  • 标签: 肾细胞癌 溶瘤腺病毒 缺氧反应元件 低氧
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  • 简介:声音作为电影理论研究对象,一直依附于画面和图像存在,很大程度上是因为缺少专属自己的系列语汇。声音作为研究对象,要求形成新的术语和分析模型,电影声音也需要适合自身特质的专有词汇,这是声音研究的迫切需求。

  • 标签: 电影录音 声音理论 特异性
  • 简介:【摘要】目的:探讨观察联合检测梅毒特异和非特异抗体的临床应用价值。方法:2020.8-2021.10,选取疑似梅毒血样117份进行研究,分别应用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、酶联免疫吸附试验(TP-Ab)进行检测,以临床综合诊断结果为金标准,比较两种检测方法与联合检测方法的结果。结果:临床综合诊断显示,有42例梅毒患者。TP-Ab联合TRUST检测的准确性、敏感性、特异均大于TP-Ab单一检测、TRUST单一检测(P<0.05)。结论:联合检测梅毒血样的特异抗体及非特异抗体,可提升疾病诊断准确性,值得推广。

  • 标签: 梅毒 甲苯胺红不加热血清试验 特异性抗体 酶联免疫吸附试验 非特异性抗体
  • 简介:根据病理学分析,特异皮疹的发生,有动物抗原或半抗原进入皮肤,形成大于抗体数量的抗原,体内可溶性混合物增多,导致血管中活性物质的释放,增加血管的通透性,有着很大的关系。文章分析致病因,阐述发生及流行。而诊断,结合典型症状~一在病猪的腹部、胸部、大腿部、耳廓部等处皮肤,出现明显的芝麻大、黄豆大的红色圆环形丘疹,确诊不是难事。文章重点阐述治疗措施,以供参考和借鉴。

  • 标签: 皮疹 诊断 治疗
  • 简介:在科学迅速发展的今天,现代医学的诊疗方法不断提高,诊断结果直观明了。足以让世人所信任;而中医一直建立于几千年的诊断医理不变,道理深奥,又不能拿出实际的东西给人看。不能让世人所信服,这也是中医发展较慢的原因之一。

  • 标签: 特异性脉诊 中医诊断 半币脉 双刃脉 断弦脉
  • 简介:摘要法布雷病是一种多系统受累的罕见遗传溶酶体贮积症,及时进行特异治疗可改善患者的临床症状,延缓疾病进展,从而延长患者预期寿命。目前,特异治疗方法中酶替代治疗(ERT)和分子伴侣疗法已获得批准上市,底物减少疗法、新型ERT以及基因治疗等新型治疗方案正在临床研究中。本文基于《中国法布雷病诊疗专家共识(2021年版)》的治疗指导建议,并结合本科的治疗经验,总结了近年来关于法布雷病特异治疗领域的新进展,重点阐述了特异药物尤其是ERT的作用机制、临床获益、启动时机、疗效监测以及用药注意事项等。

  • 标签: 法布里病 特异性治疗 酶替代治疗
  • 简介:摘 要:建筑空间异化主要是指基于建筑设计中的某部分矛盾,根据使用者体验,利用建筑师的设计针对空间原型创造完成独特变异体,进而对使用者功能需求更好地回应或使新的行为模式得到激发。建筑空间创作手法有机结合了建筑师个人表演情结与体验建成环境的行为,同时利用合理发挥。本研究基于建筑空间异化内涵,结合世界知名建筑设计师的经典案例初步探讨了现代建筑特异空间设计。

  • 标签: 特异性空间 建筑设计 现代建筑
  • 简介:副词“时而”原本是“副词+连词”的非句法结构,先秦即已出现连用,因句法、语义等的变化跨界融合成词,清代突然成词并出现迭用格式“时而……时而”。这反映了词汇化的一般规律;但“时而”的成词同时还受到“有时而……有时而”格式的影响,而与“时……时”“有时……有时”格式没有直接关系,这是“时而”成词过程中的特异。词汇化不都是单个、孤立、规则的现象,有的可能是一批、一类、甚至整个词汇系统间的相互系联、调整、互动和影响。

  • 标签: “时而” 词汇化 特异性 “有时而……有时而” 词汇系统
  • 简介:摘要目的讨论特异心肌病临床诊疗。方法根据患者临床表现结合病史、辅助检查结果进行诊断并治疗。结论酒精性心肌病的治疗关键在于尽可能早的时候立即彻底戒酒,可有效改善心衰症状和体征,逆转心室重塑。控制血糖是糖尿病性心肌病防治的一项基础治疗措施。节制饮食,并加强体育锻炼,不仅可提高胰岛素敏感性,而且是一种有效预防因肥胖加重心肌功能异常的辅助措施。

  • 标签: 特异性心肌病 诊断 治疗
  • 简介:特异阴囊坏疽起病急骤,多伴全身中毒症状,病死率高。因此正确认识该疾病,治疗及时得当,可降低病死率。我院2006年5月收治1例特异阴囊坏疽患者,报道如下。

  • 标签: 阴囊坏疽 特异性 患者 临床治疗
  • 简介:摘要:生猪特异皮疹病是一种常见的猪只传染病,目前尚无特效药物治疗。本文主要介绍了生猪特异皮疹病的治疗原则和策略,包括提供良好的饲养环境和营养保障、加强病情观察和监测、严格隔离和生物安全措施,以及加强免疫管理。此外,针对并发感染和症状缓解,可以考虑使用抗生素和支持性治疗药物。然而,药物治疗只是治疗策略的一部分,预防措施和养殖管理是更为重要的控制手段。

  • 标签: 生猪特异性皮疹病,治疗原则,疫情控制,抗生素,支持性治疗,预防措施
  • 简介:植物启动是基因表达不可缺少的重要顺式作用元件,对其结构与功能深入研究不仅对于了解植物生长发育机制与防御机制具有重要意义,且可为利用转基因植物工程实现基因的高效特异表达提供有效途径,以期为启动的研究提供参考。本评述综述了真核生物启动构成,包括核心启动区的TATA-box、CAAT-box、起始元件和下游启动元件;远端区的增强、沉默、绝缘元件;以及非翻译区调控元件,并对启动分类及研究方法进行简要介绍。

  • 标签: 核心启动子 远端启动子 非翻译区作用元件 启动子分类 研究方法
  • 简介:卡介苗(BacilledeCalmette-Guerin,BCG)是世界上应用最广泛的菌苗,而且也是最安全,最稳定的疫苗,还是目前所知最强的免疫佐剂之一。由于在免疫学上具有许多独特优点,如:可研制成活菌苗、提高免疫力、延长保护期、适合表达免疫原性弱的抗原基因、方便、成本低等,使卡介苗在90年代迅速成为基因工程疫苗研究中的热点。要将BCG改造成为活的重组多价疫苗载体,集佐剂与抗原于一身,就需要在分枝杆菌中建立与E.coil类似的基因转化系统,使重组

  • 标签: 启动子 穿梭载体 分枝杆菌 卡介苗 肠杆菌 重组质粒
  • 简介:摘要从建筑设计中突出的矛盾出发,在建筑师鬼斧神工的创造下,让使用者拥有身临其境般的体验,这就是现代建筑所展现出来的特异空间。空间的特异是在空间原型的基础上进行变异而衍生出来的,因此在功能需求和行为模式方面更加贴近使用者的需要。笔者主要对此展开进一步论述,探讨建筑特异空间的设计手法,希望能够加深对这一概念的理解。

  • 标签: 现代建筑 特异性 空间设计
  • 简介:摘要目的比较两种血清梅毒抗体检测方法的性能。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和梅毒螺旋体特异抗体明胶凝集试验(TPPA)对110份梅毒患者血清和890份健康人血清进行检测比较。结果TP-ELISA共检出梅毒螺旋体抗体阳性109份、TPPA共检出108份阳性,两法的阳性检出率分别为99.1%和98.2%。TP-ELISA从890份健康体检者中检出2份阳性,TPPA未检出阳性,后经确认2例为假阳性,TP-ELISA的假阳性率为0.22%。结论ELISA和TPPA都具有较高的敏感性和特异,两法结果差异无统计学方法(P>0.05)。

  • 标签: ELISA TPPA 梅毒抗体