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  • 简介:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是一个多种疾病发病的危险因子,其涉及的疾病谱较广,与心脑血管疾病、糖尿病、肾脏病、出生缺陷、老年病和一些精神疾病发病相关。醛糖还原(Aldosereductase,AR)是多元醇代谢途径(Polyolpathway)的反应限速,在高糖情况下,多元醇通路被激活,它是糖尿病慢性并发症发生、发展的重要原因之一。关于醛糖还原在糖尿病中的病理生理意义已有很多报道,但还未见高同型半胱氨酸和醛糖还原关系的报道。因此,本文初步探讨了高同型半胱氨酸上调醛糖还原表达的病理生理意义,可能对理解糖尿病并发症乃至临床诊断及治疗有潜在的指导意义。

  • 标签: 高同型半胱氨酸 上调作用 醛糖还原酶 基因表达 病理生理意义 糖尿病慢性并发症
  • 简介:目的探索BALB/cC57BL/6两个品系在有关实验中的不同作用。方法选取了结合随机测序与生物信息学分析设计合成的神经系统表达的一些基因的反义核酸(antisense)中的2个,用Hamilton微量注射器将其分别定量注射到BALB/cC57BL/6小鼠的侧脑室,并分别设注射生理盐水和随机序列核酸(Scramble)的对照组。每一反义核酸实验组和对照组各注射10只小鼠,之后观察实验组与对照组在不同行为学实验中的差异。小鼠的行为学检测模型为:考察日常代谢能力的摄食量,考察Locomotionactivity(移动)的旷场行为,考察疼痛阈值的甩尾试验和考察记忆能力的步下法实验。结果注射No.1基因的反义核酸后,两品系的实验组均在测试记忆力的步下法(Step-downTest)试验中表现出记忆力减弱,且与对照组差异明显,说明No.1基因的功能确与记忆相关。注射No.2基因的反义核酸后,在测试移动能力的旷场行为(OpenFieldBehavior)试验中,BALB/c实验组跨格、直立行为均比对照组明显减少,说明受此反义核酸影响显著,而C57BL/6实验组则与对照组无大的差异。此外,在生理盐水对照组和随机序列核酸对照组的实验中以及其他行为学模型的实验中,两品系也存在着一定的差异。结论用遗传背景不同的多品系进行相关实验,可进一步建立新基因功能初筛中有显著结果的基因的复筛平台;同时,实验结果对于进一步研究什么样的品系适用于什么样的实验将具有较大的意义。

  • 标签: 对照组 反义核酸 注射 行为学 实验 C57BL/6小鼠
  • 简介:根据已发表的植酸基因phyA序列(GI:4815609和GI:22901877)设计引物,以米曲霉(AsperillusoryaeCohn,编号:ACCC30155)的总DNA为模板,利用PCR扩增得到目的片段.将此片段克隆到表达载体pPIC9K的EcoRⅠ酶切位点构建重组质粒,通过电转化方式将重组质粒转化毕赤酵母(Pichiapastoris).检测结果表明,植酸基因在毕赤酵母中得到了表达.

  • 标签: 米曲霉 植酸酶基因 PCR 毕赤酵母 基因表达 饲料添加剂
  • 简介:小道,肿瘤坏死因素相关的导致apoptosisligand,是一个新奇有势力通过房间表面死亡受体Trail-R1和Trail-R2的激活的房间死亡小径的内长的使活跃之物。它的角色象在导致激活的房间死亡(AICD)的FasL一样,在免疫系统被表明了。然而,小道的机制导致了apoptosis遗体不清楚。在这份报告,重组体小道蛋白质被表示并且净化。导致apoptosis活动和JurkatT房间上的重组体小道的规定机制是探索试管内。Trypan蓝排除试金证明重组体小道蛋白质活跃地以一种剂量依赖者方式杀死了JurkatT房间。在JurkatT房间的导致小道的apoptosis被Bcl-2显著地在Bcl-2基因transfected房间在表示上减少。有PMA(phorbol12十四酸盐13醋酸盐)的处理,PKC使活跃之物,在JurkatT房间的压制的导致小道的apoptosis。由PMA的apoptosis的抑制被预告的处理与二度废除,一个PKC禁止者。总起来说,Bcl-2在表示上和PMA激活PKC,这被建议活跃地下面调整在JurkatT的调停小道的apoptosis房间。

  • 标签: TRAIL T细胞 PMA PKC BIS 细胞凋亡
  • 简介:根据GenBank报道的基质金属蛋白组织抑制剂-2(TIMP-2)氨基酸序列和毕赤酵母偏爱密码子设计,通过化学方法合成得到适合在毕赤酵母中表达的目的TIMP-2基因序列,并将其克隆到质粒pPIC9中,构建了pPIC9-T2表达载体,PCR鉴定及测序结果表明得到了正确的TIMP-2基因序列.

  • 标签: 基质金属蛋白酶 组织抑制剂 人工合成 克隆 GENBANK 毕赤酵母
  • 简介:根据Genbank中大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化(PNP)基因的核苷酸序列,设计并合成了一对引物,以大肠杆菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增,并将扩增产物定向连接到克隆、测序及真核表达载体PCDNA3中,进行切鉴定、测序及序列分析。结果表明PCR扩增出741bp大小的片段,通过切和序列分析证明含完整的PNP基因序列且基因插入方向正确,此序列与文献报道的PNP基因的同源性为99.7%。说明克隆的PNP基因与文献报道的基本一致,pcDNA3-PNP的构建成功为今后用其进行基因转染来研究PNP/Mep-dR自杀基因系统在肿瘤基因治疗中的应用打下了基础。

  • 标签: 大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶 自杀基因 分子克隆
  • 简介:目的探讨人地中海贫血β654基因为外源基因用于转基因小鼠制作时,外源基因的制备方法,为进一步制作转基因小鼠打下基础.方法采用反向点杂交法确诊人地中海贫血β654纯合子DNA,以PCR法扩增获得人地中海贫血β654基因,分离纯化后,通过连接反应将其克隆入含βLCR调控序列的基础载体pBGT51质粒中,经PCR扩增、切、反向点杂交及DNA测序鉴定重组质粒,用EcoRV切获得转基因所用的外源基因.结果将人地中海贫血β654基因作为外源基因克隆入基础载体pBGT51质粒中构建了重组质粒βBGT51,用EcoRV切获得含人β654基因及βLCR调控序列的6.5kb的DNA片段,制备了可用于显微注射转基因的外源基因.结论采用该方法构建的含人地中海贫血β654基因的重组质粒,可获得用于显微注射转基因的外源基因.

  • 标签: 地中海贫血 外源基因 制备方法 转基因小鼠 重组质粒 调控序列
  • 简介:目的观察α-半乳糖苷对猕猴类人B抗原的解效果,探讨α-半乳糖苷解对猕猴红细胞结构、功能的影响.方法采用热吸收放散试验从30只华南猕猴中选取类人ABO血型抗原较强的2只A型、3只B型猕猴做为实验对象,以基因重组的α-半乳糖苷体外解猕猴类人B型血抗原,并回输到A型猕猴体内,测定红细胞脆性、自身溶血率、胆固醇、高铁血红蛋白、乙酰胆碱脂、ATP等红细胞的结构功能指标.结果经α-半乳糖苷解后,猕猴红细胞胞膜完整、携氧能力正常,解后的"通用"型血回输给受体猕猴无任何输血反应发生.结论α-半乳糖苷解对于猕猴红细胞的形态、结构、功能无不良影响,且在实验动物体内是安全的.

  • 标签: Α-半乳糖苷酶 猕猴 红细胞 形态 结构
  • 简介:在真核生物细胞中,许多具有生物活性的多肽和蛋白是在其分泌过程中由前体蛋白经内切蛋白切割后激活形成的.弗林蛋白(Furin)就是这个内切蛋白家族重要成员之一,它可以识别剪切多种蛋白质,如生长医子、血清蛋白、基质金属蛋白、受体、病毒囊膜蛋白和细菌外毒素等.近年来Furin得到了迅速而广泛的研究,本文简介了它的表达与加工运输、生物学功能、与病毒侵染的关系,以及它的抑制剂.

  • 标签: 弗林蛋白酶 前体蛋白 内切蛋白酶
  • 简介:ApoptosisplaysanessentialroleinTcellbiology.ThymocytesexpressingnonfunctionalorautoreactiveTCRsareeliminatedbyapoptosisduringdevelopment.ApoptosisalsoleadstothedeletionofexpandedeffectorTcellsduringimmuneresponses.Thedysregulationofapoptosisintheimmunesystemresultsinautoimmunity,tumorogenesisandimmunodeficiency.Twomajorpathwaysleadtoapoptosis:theintrinsiccelldeathpathwaycontrolledbyBcl-2familymembersandtheextrinsiccelldeathpathwaycontrolledbydeathreceptorsignaling.Thesetwopathwaysworktogethertoregu

  • 标签:
  • 简介:基因克隆一般分为定位克隆和表型克隆。表型克隆进展较快,主要有消减杂交、代表性差异分析法、mRNA差异显示、DNA转染法及抑制消减杂交法。抑制消减杂交法是1996年报道的一种表型克隆的新方法,是目前寻找差异表达基因的较有效方法,较过去的方法有许多先进之外。本文对此方法的原理及应用作一详细介绍,并与其他方法作简单比较。

  • 标签: 抑制消减杂交 表型克隆 定位克隆
  • 简介:RNAi是指通过双链RNA介导特异性降解靶mRNA,导致转录后水平基因沉默的现象。其作用途径有RdRP依赖的RNAi的途径与非RdRP依赖的RNAi途径2种。利用RNAi的基因敲除技术在dsRNA序列选择、质粒或病毒为载体的dsRNA体内合成、发夹样siRNA的转录、dsRNA的导入方法等方面取得了很大进展,在研究人类或其他生物基因组中未知基因及蛋白质的功能等领域具有诱人的应用前景。

  • 标签: RNA干扰 基因敲除 转录后基因沉默 小干扰RNA MRNA
  • 简介:Immunotherapythatspecificallytargetstumorcellsisthepreferredapproachtoinducetumorregression.Overthepastdecade,significantprogresshasbeenmadeindevisingvariousmethodstodirecttheimmunesystemtorespondtotumorcells.Themajorhurdleforsuccessfulimmunotherapyistoovercomeimmunetoleranceinthetumormicroenvironment.Recentclinicaltrialswithdendriticcell-basedvaccination[1,2]andCTLA4blockingantibodies[3]haveshowngreatpromise,thoughcompletecancerregressionisnotalwaysachieved[4].Currently,alternativestrategiespotentiallyleadingtocancereradicationorregressioninanimalorclinicalmodelsarebeingenthusiasticallypursued.InthisissueofCellResearch,Wangetal.reportanovelwaytoinducetumorimmunitybytheuseofirradiatedautologousTcells[5].

  • 标签: T细胞 肿瘤细胞 治疗 免疫疗法
  • 简介:基因芯片又称DNA微阵列,分为cDNA微阵列和寡聚核苷酸微阵列.DNA微阵列技术是探索基两组功能的一种强有力工具.扼要介绍基因芯片、表达谱芯片技术和原理,以及基因芯片技术在肿瘤基因组学中的应用。

  • 标签: 基因芯片 DNA微阵列 表达谱芯片 肿瘤基因组学
  • 简介:微生物几丁质不仅在生物降解几丁质方面起着重要作用,而且可通过水解病原真菌的细胞壁而有效地抑制其生长.到目前为止,人们已经分离和克隆出了大量的微生物几丁质及其基因.尽管这些几丁质各不相同,但它们却具有类同的蛋白质结构域:信号肽、催化结构域和几丁质结合结构域等.本文着重介绍几丁质的结构和分子特征、表达和调控机理,并且分析了该的应用前景.

  • 标签: 几丁质酶 结构域 降解
  • 简介:本文评述了工程抗体的研究现状和抗体在防化医学研究中的应用。抗体库技术的出现使抗体的研究呈现了新的生机。不仅使不具备细胞工程实验条件的实验室能够制备抗体,而且实验周期大大缩短,比杂交瘤技术提供多20倍的结合性抗体作为潜在的抗体,使抗体更易获得。抗体库技术能够容易地评价编码抗体基因,因而可以在分子水平上认识和改造抗体。噬菌体抗体库可以不经免疫即可制备抗体的特点,使通过人源性噬菌体抗体库生产的抗体能够直接用于临床治疗。随着工程抗体研究的不断深入,新颖实用的抗体将会被应用于包括军事医学在内的多种领域中。

  • 标签: 工程抗体酶 噬菌体抗体库 催化活性
  • 简介:ThekinematicsofturningmaneuversofstartledCrucianCarp(Carassiusauratus)arepresented.AllescaperesponsesobservedareC-typefast-starts.Thepositionofthecenterofmassandthemomentofinertiaofthefisharecalculated.Theresultsshowthatthepositionofthecenterofmassisalwaysat35%ofthelengthofthefishfromtheheadandthepositionofthecenterofmassandmomentofinertiacanbeconsideredunchangedduringC-startofCrucianCarp.HydrodynamicanalysisoftheC-startisgivenbasedonthekinematicsdatafromourexperiments.TheC-startconsistsofthreestages.Instage1,thetailfinoffishrapidlyflapsinonedirection,andalargemomentactsonthefish'sbody,whichrotatesaroundthecenterofmasswithanangularacceleration.Instage2,thetailfinflapsmoreslowlyintheoppositedirectionatslowerspeed,thefish'sbodyrotatesaroundthecenterofmasswithangulardecelerationandthecenterofmassofthefishmovesalonganarc.Instage3,themomentapproximatelyequalszero,thefish'sbodystopsrotatingandthecenterofmassthemovesalongastraightline.

  • 标签: 欧洲鲫鱼 回转动力学 力矩 质量中心 惯性矩
  • 简介:非受体酪氨酸激酶c-Abl广泛表达于人和哺乳动物等的细胞中并受到严格调控,通过蛋白之间相互作用、与DNA相互作用及其酪氨酸激酶活性在一系列的重要生命活动中发挥调节作用。在应激损伤反应如DNA损伤反应中.c-Abl的Ser^465被ATM和DNA-PK磷酸化而激活,通过与Rad51、p53和p73等分子的相互作用参与DNA重组修复、细胞周期和细胞凋亡等的调控,不同信号途径之间的平衡决定细胞的生存和死亡。

  • 标签: C-ABL 应激反应 细胞 非受体酪氨酸激酶 生命活动 DNA损伤
  • 简介:Granulocyte巨噬细胞刺激殖民地的因素(GM-CSF)是一个重要造血的生长因素和有免疫力的调节的人。GM-CSF也在各种各样的传播白血球的功能的活动有深刻效果。它被许多房间类型在收到有免疫力的刺激之上包括T房间,巨噬细胞,endothelial房间和成纤维细胞生产。尽管GM-CSF局部地被生产,它能以一种paracrine方式行动到在主人防卫提高他们的功能的成员传播neutrophils,单核白血球和淋巴细胞。最近的集中的调查为它增加树枝状的房间(DC)成熟和功能以及巨噬细胞活动的能力作为一个有免疫力的助手在GM-CSF的应用程序上被集中。在经历化疗的癌症病人对待嗜中性白血球减少症临床上被使用,在在治疗期间的爱滋病病人,并且在在骨髓移植以后的病人。有趣地,GM-CSF-deficient老鼠的造血的系统看起来正常;最重要的变化在一些特定的T房间回答。尽管GM-CSF的分子的克隆用T房间的cDNA图书馆被执行,T房间在激活以后生产GM-CSF,是众所周知的,在T房间功能上有在由T房间和它的效果的生产的这cytokine的系统的调查的缺乏。在这篇文章,我们将在T房间主要集中于GM-CSF的免疫生物学。

  • 标签: 巨噬细胞 粒细胞 菌落刺激因子 T细胞
  • 简介:真核基因的转录和转译调控是哺乳类细胞基因表达系统建立和发展的基础,外源基因的表达水平不仅决定于启动子/增强子的强弱,还与剪接信号、终止信号和poly(A)信号以及质粒的拷贝数等因素有关。另外,在基因治疗的研究中,也已寻找到多种具有组织或肿瘤特异性的启动子,来达到特异性肿瘤基因治疗的目的。

  • 标签: 哺乳类细胞基因表达 启动子/增强子 剪接信号 质粒拷贝数