简介：目的:评价经膝下(BelowtheKnee,BTK)途径导管直接溶栓(Catheter-DirectedThrombolysis,CDT)治疗混合型下肢深静脉血栓形成(DeepVeinThrombosis,DVT)的安全性和有效性。方法:回顾性分析2013年1月至2017年10月于徐州市肿瘤医院介入科接受经BTK途径CDT治疗的38例急性混合型DVT患者临床资料,其中男性患者26例,女性患者12例,年龄54±11岁。结果:技术成功率为100%。经小隐静脉穿刺途径28例,小隐静脉切开途径4例,胫后静脉切开途径4例,胫后静脉穿刺途径2例。行CDT前,所有患者均接受临时可回收滤器置入,并于术后2周内取出。36名患者DVT血栓溶解成功(Ⅱ和Ⅲ级)。2名未获得血栓溶解成功的患者,从症状发生到CDT时间均大于10天。对13例患者(左侧10例,右侧3例)进行髂静脉球囊扩张和支架植入。围手术期出现切口渗血4例,切开部位麻木5例,没有新发肺栓塞和大出血发等主要并发症。平均随访时间为2年(1个月-4年),28例患者超过1.5年。2例患者由于未服用华法林而出现反复髂股DVT。随访期间通畅率和PTS率分别为81.6%(31/38)和31.6%(12/38)。结论:采用经BTK途径行CDT治疗混合型DVT是安全有效的,围手术期及随访期间结果满意,是一种值得推广的方法。

简介：目的:研究血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平与急性脑梗死(ACI)溶栓后出血转化(HT)的相关性及其预测意义。方法:选择2014年2月到2017年6月在承德医学院附属医院神经内科诊治的ACI患者130例作为研究对象。根据患者是否存在溶栓后HT将其分成HT组(65例)和NHT组(65例),两组均根据患者的实际病情给予个性化的治疗,对比两组患者实验室指标、血清MMP-9水平、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,随访6个月后,记录死亡人数及Barthel指数,并分析患者血清MMP-9水平与其NIHSS评分、Barthel指数、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及总胆固醇(TC)水平的相关性。结果:HT组LDL-C及TC水平均低于NHT组(P<0.05)。HT组患者在溶栓前、溶栓后3d、溶栓后7d的血清MMP-9水平、NIHSS评分均高于NHT组(P<0.05)。随访6个月后,HT组的死亡率高于NHT组,而Barthel指数低于NHT组(P<0.05)。根据Spearman法分析相关性发现,患者血清MMP-9水平与其NIHSS评分呈正相关,而与Barthel指数、LDL-C及TC水平呈负相关(P<0.05)。结论:血清MMP-9水平与ACI溶栓后HT具有紧密的关联,有助于更好地预测患者的病情及预后,临床上可考虑在治疗ACI溶栓后HT时监测MMP-9水平,从而获得更加精准的辅助性数据参考。

简介：目的：在FUS-50L生物反应器中利用补料分批培养技术培养表达含重组质粒pET28a（＋）-GNLY的大肠杆菌BL21（DE3）pLysS株，生产重组颗粒溶素（GNLY）。方法：选取含pET28a（＋）-GNLY的BL21（DE3）pLysS菌株单个克隆分级培养，将制备的二级种子液接种于发酵罐中。在发酵过程中，控制溶氧为30%～50%，温度为37℃；在基础培养基内生长4h后，补加以甘油为碳源的补料，继续生长到11h；加入葡萄糖至终浓度为1%，30℃诱导表达6h；收集菌体，纯化制备目的蛋白。利用Western印迹检测重组蛋白的抗原性，用CFU方法检测其生物学活性。结果：发酵液中最终菌体密度达80g/L；纯化所得重组蛋白约占菌体总蛋白的5%，含量为60mg/L；经鉴定所获重组颗粒溶素有较好的免疫学活性和生物学活性。结论：用含重组质粒pET28a（＋）-GNLY的大肠杆菌BL21（DE3）pLysS表达系统，可得到具有生物活性的重组颗粒溶素，为大批量生产提供了条件。

简介：重组组织型纤溶酶原激活剂(rtPA)经肝素处理后与未经处理的rtPA比较,结果显示,rtPA在体外的溶纤活性提高50%～90%,在兔体内的半衰期延长1min,同时也提高了rtPA对热的稳定性

简介：利用A-PAGE（acid-polyacrylamidegelelectrophoresis）法对来自中国青藏高原地区67份青稞品种进行了醇溶蛋白位点的遗传多样性研究。共分离出29条相对迁移率不同的条带，多态性为100％。所有材料在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ醇溶蛋白位点分别发现了36、46和7种等位变异类型，总变异数以四川材料为最高，甘肃材料为最少，等位变异类型频率在地区间的分布存在显著或极显著差异。4个青稞群体醇溶蛋白Ⅰ、Ⅱ位点的遗传多样性均略大于Ⅲ位点的遗传多样性，4个地区材料的平均遗传多样性无显著性差异。聚类分析结果表明，67份材料可分成A、B、C、D、E、F、G和H8类，材料聚类与其生长的地区有明显的相关性。

简介：组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是人体内重要的丝氨酸蛋白酶,它能特异地激活血栓中的纤溶酶原,使之成为具有溶解纤维蛋白能力的纤溶酶,临床上将提纯的t-PA作为心血管栓塞性疾病急救和康复治疗的首选药物。由于t-PA在天然材料中含量甚微,难以大量制备,基因工程产品产量有限,临床应用货源紧缺且价格昂贵。为探索心血管疾病的基因治疗和预

简介：在研究t-PA过程中,区分t-PA与其它纤溶药物的较特异方法是采用抗体中和抑制试验。本文用200μgt-PA经背部皮下多点免疫家兔,待产生的抗体效价经ELISA测定达1∶1000后,经兔动脉放血收集抗血清。该血清有DE-32直接过滤法纯化,检定其纯度及特异性后,用于中和抑制试验检定t-PA的基因工程产品。结果表明本组构建表达的野生型t-PA和突变体t-PA的活性均能被兔抗t-PA抗体抑制,为特异产品。

简介：在30L搅拌式反应器中用多孔微载体培养分泌尿激酶原的DNA重组中国仓鼠卵巢细胞(rCHO),研究了血清浓度及溶氧对细胞生长和表达的影响.结果表明,在2×105/ml低密度接种条件下,使用低(无)血清培养基会延长细胞生长延滞期并降低比生长速率,而细胞密度大于106/ml时,血清浓度对细胞生长和产物表达的影响没有显著差别.溶氧(DO)维持在20%～45%时,对细胞表达产物和葡萄糖代谢无明显影响,但溶氧降至7%～9%时,细胞表达水平明显降低,葡萄糖代谢转化为乳酸的比例上升.

简介：目的：本实验室通过转座突变技术获得了一株高产表面活性物质的芽孢杆菌dhs-330-021，研究其对链状亚历山大藻的抑制效果，及其溶藻作用方式。方法：在链状亚历山大藻的培养液中添加dhs-330-021的发酵液等，间隔一定时间计数获得藻细胞的数量。结果：菌株dhs-330—021培养后期的发酵液溶藻效果好于培养前期和中期；在一定浓度范围内，dhs-330-021的发酵液对不同生长期的链状亚历山大藻均有溶藻效果，其中对延滞期和稳定期效果最好；菌株的发酵液和无菌上清液的溶藻效果明显，而菌悬液溶藻效果较差。结论：菌株dhs-330-021能显著抑制链状亚历山大藻的生长，其溶藻方式属于间接溶藻。

简介：收集产重组组织型纤溶酶原激活剂（ｒｔ－ＰＡ）的ＣＨＯ工程细胞灌流培养上清，经过Ｓｔｒｅａｍｌｉｎｅ扩张柱床和赖氨酸－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱亲和吸附色谱纯化后，最后产品的比性达到６０００００ＩＵ／ｍｇ蛋白，ｒｔ－ＰＡ总活性回收率在９８％左右，经还原ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析主要为高相对分了质量ｒｔ－ＰＡ蛋白，ＨＰＬＣ分析达到色谱纯，Ｎ端１５个氨基酸序列和ｐＩ与文献报道的一致。蛋白质印迹实验证实具有ｔ－Ｐ

简介：构建了二氢叶酸还原酶（dhfr）选择基因启动子上游无增强子（cnhancer）的组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）组合突变体FrGGI真核表达质粒pZLFrGGI。将pZLFrGGI酶切线性化,采用大剂量DNA电击介导法,转染dhfr基因缺陷型中国仓鼠卵巢细胞系（CHO-dhfr-）。用氨甲喋呤（MTX）筛选转染细胞。混合加压后,挑选克隆,在1×10-7mol/LMTX压力下,得到了表达水平达1500～2500IU/106细胞·24小时的细胞株。此细胞株表达水平稳定,形态良好,倍增时间为36小时,且有进一步提高表达水平的潜能,有望发展为工程细胞株。

简介：目的：构建一个牛dSl酪蛋白调控序列指导人溶菌酶（hLYZ）基因组序列的杂合基因座。方法：采用本实验室发明的连续3步缺口修复技术。将6个无痕连接的同源臂插入以pBR322为载体的骨架中，构成能进行3次连续基因抓捕的载体，利用Red同源重组系统介导的缺口修复技术，分别抓捕牛aSl酪蛋白3’端调控序列（9kb）、hLYZ基因座序列（5kb）、牛axSl酪蛋白5’端调控序列（20kb），使这3个基因片段自动无痕地连接在基因抓捕载体上，形成牛oLSl酪蛋白一hLYZ杂合基因座。结果：实验经过PCR扩增、限制性内切酶酶切验证和序列测定，验证了hLYZ的基因组序列对牛仪S1酪蛋白编码基因组序列的精确置换。结论：这种修复技术为乳腺生物反应器高效表达大载体的制备提供了可行的思路及方法。

简介：人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是一种用于治疗血栓性心血管疾病的特效药物,它能激活血纤维蛋白酶原,后者使血块溶解,所以这种药物的开发为社会普遍重视。t-PA在人体血液中的含量极低,很难从天然材料中提取。如果应用转基因技术,将人t-PA基因转入动物体内,使其在乳腺中高效表达,从乳汁中提取大量的t-PA,将具有可观的经济效益和社会效益。转基因动物建立的前提条件是构建乳腺定位高效表达载体。为此,我们先将本所保存的t-

简介：目的：探讨脐血干细胞静脉输注对失代偿期肝硬化的临床治疗效果。方法：患者为慢性重症肝炎、肝硬化失代偿期,采用脐血干细胞静脉输注治疗共2次,治疗后半年观察血清转氨酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、r-谷氨酰转肽酶（GGT）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）、结合胆红素（DBIL）、非结合胆红素（IBIL）、凝血酶原时间（PT）水平变化,同时观察临床症状、体征改善情况。结果：各项实验室指标逐渐正常,腹水消退,临床症状明显改善。结论：脐血干细胞静脉输注治疗失代偿期肝硬化安全、简便、有效。

简介：目的：探讨彩超定位下的腔镜深筋膜下交通支离断术（SEPS）联合湿性换药技术治疗下肢静脉性溃疡（VU）的方法及效果。方法：回顾性分析了8例VU患者共8条C6级下肢SEPS手术联合湿性换药技术的方法和效果。术前用彩色多普勒超声对功能不全交通支（ICPV）行体表定位，进行SEPS＋大隐静脉高位结扎剥脱术＋硬化剂注射术，术后湿性换药技术溃疡换药。结果：超声准确定位下SEPS联合湿性换药术后所有C6级患肢VU均在短期内愈合，随访期间无溃疡复发。结论：SEPS联合湿性换药技术治疗VU术后安全，疗效确切，并发症少。

简介：目的：比较连续股神经阻滞（CFNB）与静脉自控镇痛（PCIA）在全膝关节置换术中的应用效果及对患者凝血功能的影响。方法：选取2014年1月至2015年12月间我院行单侧全膝关节置换术的患者80例,按照随机数字表法分为CFNB组和PCIA组,每组各40例,两组患者分别接受CFNB和PCIA治疗。观察两组患者术后6h、12h、24h、48h视觉模拟疼痛评分（VAS）,两组患者分别于麻醉前（T1）、术毕（T2）、术后1d（T3）、术后2d（T4）进行血栓弹力图检查,观察两组凝血功能变化。并于术后随访1年,比较两组患者膝关节功能。结果：术后6h、12h、24h、48hCFNB组患者VAS评分显著低于PCIA组患者（P〈0.05）。T2、T3、T4时点CFNB组患者凝血反应时间（R）、血凝块形成时间（K）较T1升高,血凝块聚合形成速率（α角）、血凝块最大振幅（MA）较T1降低,PCIA组患者R、K较T1降低,α角、MA较T1升高,T2、T3、T4时点CFNB组患者R、K高于PCIA组患者,α角、MA低于PCIA组患者,差异均有统计学意义（P〈0.05）。两组患者术后均完成1年的随访,两组患者KSS评分、膝关节最大屈曲度、膝关节最大伸直度比较无统计学差异（P〉0.05）。结论：CFNB对于全膝关节置换术术后患者镇痛效果优于PCIA,有利于改善患者凝血功能,不影响术后患者膝关节功能的恢复。

简介：目的：初步探究十五肽BPC-157调节人脐静脉内皮细胞（HUVEC）功能的信号通路作用机制。方法：首先利用生物芯片筛选BPC-157参与激活的细胞信号转导通路途径，进而通过real—timePCR证实BPC-157对候选信号通路中相关基因的mRNA表达水平的影响，最后采用Western印迹观察BPC-157对候选信号通路中相关蛋白的磷酸化水平影响。结果：10μg／mLBPC-157作用于HUVEC24h后，信号转导通路发现者芯片结果显示，与18条信号转导通路相关的96个关键基因中分别有4个基因的mRNA表达水平上调和下调，其中与MAPK信号通路相关的3个关键基因c—ns、c—Jun和Egr-1的mRNA表达水平显著性上调；低剂量BPC-157（1Ixg／mL）作用于HUVEC12h后，能够促进早期即刻基因c—ns、c—Jun和酝卜1的mRNA表达水平；10μg／mLBPC-157作用于HUVEC30min后，可明显促进ERKl／2、p38蛋白磷酸化。结论：BPC-157可能通过活化MAPK信号转导通路途径后，激活下游早期即刻基因转录，启动靶基因的表达，从而发挥促进HUVEC增殖、迁移等功能。