简介:摘要脓毒症的发生、发展及预后与机体免疫调控密切相关,免疫代谢是近年来脓毒症免疫干预的研究热点。AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是机体代谢调控的经典信号通路,参与中性粒细胞趋化性、巨噬细胞极化、自然杀伤性细胞和树突状细胞的发育分化、T细胞发育及功能调节,是脓毒症免疫代谢调控的重要途径。本文就AMPK-mTOR信号通路调节免疫细胞代谢重编程参与脓毒症免疫调节的研究进展做一综述。
简介:摘要脓毒症的发生、发展及预后与机体免疫调控密切相关,免疫代谢是近年来脓毒症免疫干预的研究热点。AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是机体代谢调控的经典信号通路,参与中性粒细胞趋化性、巨噬细胞极化、自然杀伤性细胞和树突状细胞的发育分化、T细胞发育及功能调节,是脓毒症免疫代谢调控的重要途径。本文就AMPK-mTOR信号通路调节免疫细胞代谢重编程参与脓毒症免疫调节的研究进展做一综述。
简介:AIM:Toinvestigatetheanti-apoptoticcapabilityofthehepatitisBvirus(HBV)intheHepG2hepatomacelllineandtheunderlyingmechanisms.METHODS:CellviabilityandapoptosisweremeasuredbyMTTassayandflowcytometry,respectively.Targetedknockdownofmanganesesuperoxidedismutase(MnSOD),AMP-activatedproteinkinase(AMPK)andhepatitisBvirusXprotein(HBx)genesaswellasAMPKagonistAICARandantagonistcompoundCwereemployedtodeterminethecorrelationsofexpressionofthesegenes.RESULTS:HBVmarkedlyprotectedthehepatomacellsfromgrowthsuppressionandcelldeathintheconditionofserumdeprivation.AdecreaseofsuperoxideanionproductionaccompaniedwithanincreaseofMnSODexpressionandactivitywasfoundinHepG2.215cells.Moreover,AMPKactivationcontributedtotheup-regulationofMnSOD.HBxproteinwasidentifiedtoinducetheexpressionofAMPKandMnSOD.CONCLUSION:OurresultssuggestthatHBVsuppressesmitochondrialsuperoxidelevelandexertsanantiapoptoticeffectbyactivatingAMPK/MnSODsignalingpathway,whichmayprovideanovelpharmacologicalstrategytopreventHCC.
简介:摘要目的探讨LKB1/AMPK/mTOR信号通路在肝细胞癌发生、发展中的作用及临床意义。方法研究分组肝癌组(67例肝细胞癌组织)、癌旁组(67例肝癌组织相应的癌旁组织,距癌组织5cm以上)及正常肝脏组(32例)。采用免疫组织化学技术检测三组标本中LKB1、AMPK、mTOR的表达水平,并分析LKB1、AMPK、mTOR蛋白的表达与肝癌常见临床病理参数的关系。结果LKB1在肝癌组中阳性表达率(31.3%)低于癌旁组(53.7%)及正常肝脏组(79.1%)中的阳性表达率,差异有统计学意义(P<0.05);AMPK在肝癌组中阳性表达率(25.0%)低于癌旁组(50.8%)及正常肝脏组织中的阳性表达率(73.1%),比较差异亦有统计学意义(P<0.05);mTOR在肝癌组中阳性表达率(75.0%)显著高于癌旁组(53.7%)及正常肝脏组(17.9%)中的阳性表达率,差异有统计学意义(P<0.05)。在以上三种肝脏组织中,LKB1与AMPK的表达呈正相关(P<0.01),LKB1、AMPK与mTOR表达呈负相关(P<0.01);临床病理因素分析提示,LKB1、AMPK表达与肝细胞癌的组织分化程度相关,与年龄、性别及病理分期等无关;而mTOR表达则与肝癌的组织分化程度及病理学分期均有关,与患者年龄及性别等无关。结论肝癌组织中存在LKB1/AMPK/mTOR信号通路的异常激活,提示LKB1/AMPK/mTOR信号通路在肝细胞癌的发生发展中发挥重要作用,为该信号通路作为临床诊疗的分子靶点提供理论依据。
简介:目的:探讨AMPK(腺苷酸活化蛋白激酶)系统在姜黄素诱导CaOV3人卵巢癌细胞凋亡中的作用及姜黄素对AMPK磷酸化水平及其信号通路的影响。方法:实验分为对照组、姜黄素单独作用组、compoundC(AMPK抑制剂)预给药组,SB203580(p38抑制剂)预给药组,AMPK抑制剂单独作用组以及p38抑制荆单独作用组。Westernblotting法检测AMPK、p38和p53的磷酸化水平,MTT法检测细胞活力。结果:与对照组相比,姜黄素作用组的AMPK和p38磷酸化水平增加(P〈0.05),与姜黄素单独作用组相比,SB203580预处理组的AMPK磷酸化水平下降(P〈0.05)。姜黄素作用组的细胞活力低于对照组(P〈0.05),compoundC和SB203580预处理组的细胞活力高于姜黄素单独作用组(P〈0.05)。与对照组相比,姜黄素作用组的p53磷酸化水平(Ser15)增加(P〈0.05),与姜黄素单独作用组相比,compoundC(AMPK抑制剂)和SB203580预处理组的p53磷酸化水平(Ser15)下降(P〈0.05)。结论:姜黄素能激活CaOV3细胞的AMPK,而AMPK的激活依赖于p38。AMPK和p38调节p53的磷酸化,并介导姜黄素诱导的细胞凋亡。
简介:摘要认知功能障碍与神经细胞凋亡、自噬、氧化应激及神经炎症等多方面有着密切的联系。在许多临床疾病或刺激因素的作用下,患者会出现认知功能的改变,包括记忆、语言、执行和计算等方面能力下降,这给患者生活和家庭都带来很多不便,因此研究各种方法改善患者认知功能障碍十分重要。文章回顾了腺嘌呤核糖核苷酸(adenosine monophosphate, AMP)活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)和沉默信息调节因子1 (sirtuin 1, SIRT1)这两种细胞代谢关键分子,并概括总结了AMPK/SIRT1信号转导通路主要通过拮抗氧化应激、激活细胞自噬和抑制神经炎症三个方面来降低认知功能损害。AMPK/SIRT1信号通路的神经保护作用将为更多认知功能障碍相关疾病的治疗提供可能。
简介:摘要目的观察抗性糊精对高脂饮食诱导的小鼠肝脏脂肪沉积及肝脏AMPK通路的影响。方法取4周龄雄性C57BL/6小鼠36只,随机分为3组,即正常对照组,高脂饮食组和高脂饮食+抗性糊精组(10 g·kg-1·d-1)。第12周末处死小鼠,留取血清测定三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平;留取肝脏组织,测定TG含量,并予HE和油红O染色,观察肝细胞脂肪变性和肝脏脂肪沉积;实时荧光定量PCR检测肝脏组织脂肪酸合成相关基因SREBP1、ACC、SCD1 mRNA的表达水平,Western印迹检测肝脏pAMPK、SREBP1、Fasn、ACC蛋白的表达。结果与正常对照组相比,高脂饮食组小鼠体重增加更显著,空腹血糖(FBG)、血清TC、LDL-C、HDL-C、ALT水平均升高(P<0.01),血清AST也升高(P<0.05);肝脏油红O染色可见肝脏组织脂肪沉积明显,肝脏TG含量增加(P<0.01);SREBP1、ACC mRNA水平升高;pAMPK蛋白水平表达下降(P<0.05)。与高脂饮食组相比,抗性糊精组小鼠体重增加较少,血清TG、TC、LDL-C、HDL-C、ALT水平较低(P<0.01),FBG降低(P<0.05);肝脏油红O染色可见肝脏脂肪沉积减少,肝脏TG含量降低(P<0.01);SREBP1、ACC、SCD1 mRNA水平下降;pAMPK水平增加,Fasn蛋白水平下降(P<0.01)。结论抗性糊精可以改善高脂饮食诱导的小鼠肝脏脂肪沉积,这一作用可能与激活AMPK通路有关。
简介:LKB1是直接激活精力传感器的serine/threoninekinase响应bioenergetic应力的激活安培的蛋白质kinase(AMPK),并且主要充当控制房间极性和增长的肿瘤suppressor。尽管LKB1包括胸腺和怒气在多重纸巾被表示,它在T房间开发和功能的角色仍然保持未知。这里,我们证明LKB1的那T-cell-specific删除导致了双positive(DP)的减少的幸存thymocytes和CD4和CD8的损害产生单人赛积极的thymocytes。LKB1的混乱不仅阻止了AMPK的激活而且损害了anti-apoptotic蛋白质Bcl-XL的表示。重要地,任何一个Bcl-XL的宫外的表示或组成地活跃的AMPK异种显著地救了DPthymocytes免于LKB1导致缺乏的房间死亡。而且,组成地活跃的AMPK异种的宫外的表示被发现在LKB1缺乏的DPthymocytes恢复Bcl-XL的表示。这些调查结果通过AMPK激活和Bcl-XL表示的规定为DPthymocytes的幸存作为一个关键因素识别LKB1。
简介:AbstractBackground:Subarachnoid hemorrhage (SAH), an acute cerebrovascular accident, features with its high death and disability rate. Sirtuin3 (SIRT3) is a NAD+ dependent deacetylase which mainly located in mitochondria. Reduced SIRT3 function was indicated to involve in many disorders of central nervous system. Herein, we aimed to explore the neuroprotective effects of SIRT3 on SAH and to furtherly explore the underlying mechanisms.Methods:Adult C57BL/6 J male mice (8-10 weeks) were used to establish SAH models. The pharmacological agonist of SIRT3, Honokiol (HKL), was injected in an intraperitoneal manner (10 mg/kg) immediately after the operation. Brain edema and neurobehavioral score were assessed. Nissl staining and FJC staining were used to evaluate the extent of neuronal damage. The changes of mitochondria morphology were observed with transmission electron microscopy. Western blot was used for analyzing the protein level of SIRT3 and the downstream signaling molecules.Result:SIRT3 was downregulated after SAH, and additional treatment of SIRT3 agonist HKL alleviated brain edema and neurobehavioral deficits after SAH. Additionally, electron microscopy showed that HKL significantly alleviated the morphological damage of mitochondria induced by SAH. Further studies showed that HKL could increase the level of mitochondrial fusion protein Mfn1 and Mfn2, thus maintaining (mitochondrial morphology), protecting mitochondrial function and promoting neural survival. While, additional Compound C (CC) treatment, a selective AMPK inhibitor, abolished these protective effects.Conclusions:Activation of SIRT3 protects against SAH injury through improving mitochondrial fusion in an AMPK dependent manner.
简介:目的:探讨黄芪汤改善糖尿病肾病的作用及可能的机制。方法:40只6周龄db/db小鼠随机分为模型组及黄芪汤高、中、低剂量组,每组10只,10只6周龄db/m小鼠作为正常对照组。模型组、正常组均予0.5%羧甲基纤维素钠灌胃;各药物组分别予黄芪汤1.08g/kg、0.36g/kg、0.12g/kg灌胃。1次/d,灌胃14周后进行生化指标、肾组织病理学检测,Westernblot检测各组肾皮质中AMPK-Camkkβ(LKB1)信号通路相关蛋白的表达量。结果:与模型组比较,黄芪汤能降低db/db小鼠的体质量、肾质量、血清三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)浓度,降低血清谷氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)浓度,升高肾质量/体质量指数(P〈0.05),改善肾脏病理情况;上调肾皮质中p-AMPK、p-Camkkβ、p-LKB1、p-ACC蛋白表达量(P〈0.05)。结论:黄芪汤通过有效活化AMPK-Camkkβ(LKB1)信号通路改善糖尿病肾病。
简介:目的:研究力竭运动对大鼠骨骼肌肌纤维类型及AMPK、TSC2、mTOR的影响。方法:选取SD雄性大鼠24只,随机分为4组,每组6只。对照组(C)不运动,其余3组均进行一次性跑台力竭运动,并于力竭后分别于即刻、24小时、48小时后宰杀(即E0、E24、E48);各组分离血清,并取下右侧股四头肌,一分为二,一份保存待测AMPK、TSC2、mTOR的含量及变化,另一份立即用于冰冻切片,观察肌纤维类型。结果:(1)肌纤维类型ATP酶染色结果显示:骨骼肌Ⅱ型肌纤维呈黑褐色,I型肌纤维呈灰白色;相同视野下,I型肌纤维的横切面积明显小于Ⅱ型肌纤维横切面积,且力竭运动各组I型肌纤维百分比明显低于对照组(P<0.01),而Ⅱ型肌纤维百分比明显高于对照组(P<0.01);但力竭运动各组(E0、E24、E48)之间差异不显著。(2)ELISA结果显示:力竭运动即刻组骨骼肌、血清中AMPK、TSC2含量明显高于对照组(P<0.01),而力竭后24h、48h组骨骼肌、血清中AMPK、TSC2含量较对照组无明显变化。另一方面,力竭运动即刻组骨骼肌、血清中mTOR含量则明显低于对照组(P<0.01),而力竭后24h、48h组骨骼肌、血清中mTOR含量较对照组无明显变化。且E24组与E48组间均无显著性差异。结论:(1)力竭运动后及恢复期间,骨骼肌I型肌纤维百分比降低,Ⅱ型肌纤维百分比增加。(2)力竭运动即刻组的AMPK、TSC2含量明显高于其余各组,而mTOR含量则低于其余各组,提示力竭运动中AMPK可能被激活,同时磷酸化TSC2进而抑制mTOR的合成。其与肌纤维类型变化的关系有待进一步研究。