简介：

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简介：目的：拼接DNA片段并克隆。方法：用T4DNA连接酶将DNA片段以平末端随机连接,随后用限制性内切酶切割,琼脂糖电泳分离酶切产物,挑选特定片段纯化回收,与线性化的载体质粒连接,转化大肠杆菌感受态细胞。结果：通过以上步骤,成功拼接了不同DNA片段,构建了含有目的拼接片段的重组质粒。结论：该方法简便、易行、可靠,可作为拼接、克隆DNA的备选方案,在分子生物学研究和基因工程中应用。

简介：1题目人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图2所示。

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简介：随着生物技术的发展,DNA疫苗的研究也进展迅速.DNA疫苗就是将重组的带有外源的抗原基因的质粒或病毒DNA直接注射到动物体内,从而使外源基因在活体内表达,产生的相应的抗原激活机体的免疫系统,引起免疫反应.DNA疫苗多价疫苗相对于一二代疫苗具有更加安全、稳定、可同时诱导广泛的体液免疫和细胞免疫应答及不受母源抗体的影响等一系列优点.随着对DNA疫苗研究的不断进步,DNA疫苗在21世纪第三代疫苗免疫预防方面将会发挥越来越重要的作用.本文着重介绍DNA疫苗的进展与动态.

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简介：手印是犯罪现场上重要而又常见的痕迹物证之一，素有“证据之首”之美称。随着生物DNA技术的不断发展．从现场手印中提取到DNA已成为可能。但目前的手印DNA技术仍然面临着很多困难和挑战，在一定程度上阻碍了其发展。随着DNA的提取和分型扩增技长以及计算机信息技拳的不断发展，手印DNA技术将会给招纹学带来前所未有的飞跃。

简介：摘要目的探讨自噬介导的乙型脑炎重组DNA疫苗对BALB/c小鼠体内树突状细胞(dendritic cells，DCs)免疫相关功能的影响。方法取健康BALB/c雌性小鼠，随机分配成5组，分别用pcDNA3.1(＋)空载体、pJME质粒、pJME-LC3重组质粒肌注免疫小鼠，并使用无菌PBS肌注作为空白对照组，乙型脑炎减毒活疫苗腹腔注射作为阳性对照组，免疫注射共3次，每次间隔2周，末次免疫2周后无菌取小鼠脾脏，研磨后从单细胞悬液中分离DCs，使用免疫荧光技术观察重组质粒在DCs中的表达水平；利用流式细胞术检测DCs表面主要组织相容性复合体Ⅱ(major histocompatibility complex Ⅱ，MHCⅡ)的表达水平以及小鼠脾脏DCs摄取FITC-Dextran后的平均荧光强度；CCK8法检测分析不同免疫组DCs对同种异体小鼠脾脏淋巴细胞的刺激增殖效果。结果相对于其他免疫组，pJME-LC3实验组大量DCs胞质中可见质粒编码蛋白表达；pJME-LC3实验组免疫鼠脾脏DCs摄取FITC-Dextran的能力明显强于其他免疫组(P<0.05)；pJME-LC3组小鼠成熟DCs表面MHCⅡ分子的表达水平明显升高(P<0.05)；进一步研究发现pJME-LC3组小鼠脾脏DCs对同种异体小鼠脾脏淋巴细胞刺激增殖能力高于其他免疫组(P<0.05)。结论pJME-LC3重组质粒可以促进免疫鼠脾脏DCs抗原提呈以及刺激淋巴细胞增殖的能力，提示自噬介导的乙型脑炎重组DNA疫苗可能通过影响BALB/c小鼠DCs功能促进免疫效应。

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简介：目的：探讨PEI作为免疫佐剂对G250抗原肽基因PVAX1/C-G250肽-C免疫保护效果的增强作用及联合应用CAIX蛋白疫苗进行PRIME—BOOST免疫程序免疫增强效果。方法：用EcoRI、XhoI和EcoRI、SalI分别双酶切PVAX1及既往构建的pET28a（＋）/C-G250肽-C质粒。利用DNA重组技术构建重组质粒PVAX1/C-G250肽-C,酶切分析鉴定。大量提取质粒并分光光度计测质粒含量。将32只雌性昆明小鼠随机分为（A）裸DNA组,（B）DNA-PEI复合物组,（C）DNA-PEI＋蛋白疫苗组,（D）空白对照组。按0,10,20,30天程序经股四头肌注射免疫。C组在第20天及第30天进行蛋白冲击。初次免疫前和第40天鼠尾取血,ELISA法检测抗体滴度。流式细胞术测淋巴细胞亚群CD4＋和CD8＋。结果：酶切及基因测序鉴定证实G250抗原肽cDNA正确插入PVAX1/C-G250肽-C真核表达的重组质粒中。昆明小鼠经4次免疫后,3个实验组都产生了特异性的体液和细胞免疫反应,B组的抗体滴度1：1.28×104及CD4＋、CD8＋达26.12%和12.60%,明显高于A组的1：3.2×103和CD4＋,CD8＋占到19.32%和10.74%。而蛋白冲击组的1：5.12×104和CD4＋,CD8＋占到41.96%和15.14%,明显高于B组（P〉0.05）。结论：成功构建重组质粒PVAX1/C-G250肽-C。该DNA疫苗与PEI和G250蛋白疫苗联合使用后产生极强的免疫原性,诱导产生了高滴度、高特异性抗体及细胞免疫反应。证实G250DNA疫苗联合PEI使用并进行蛋白疫苗冲击的免疫策略可产生强大的免疫保护作用。为恶性肿瘤的术后辅助治疗提供新的思路和方法。

简介：摘要：目的：建立大肠杆菌表达的重组蛋白外源性E.coli宿主残留DNA的检测方法用于生产过程以及最终产品的质量控制。方法：参考试剂盒相关说明书，样品加标回收了率无法达到2020版中国药典（Ch.P）第四部3407章节和美国药典(USP)1130章节的要求，通过对药物浓度、处理温度、糖原的蛋白酶K的使用量以及不同的加标量的优化，即将样品稀释10倍后，加30pg的E.coli标准品，20μl的蛋白酶K消化1h,选择15μl PCR反应体系。结果：回收率满足在50%~150%之间。结论：借助商品化的试剂盒，优化的外源性DNA提取条件满足法规要求、操作简便，非常适用于大肠杆菌表达的重组蛋白生产过程以及最终产品的外源性残留DNA的检测。

简介：自从诺贝尔奖得主Sanger1977年发明双脱氧DNA测序方法后，该测序法已独占商业性的DNA测序技术20年，虽然其不断改善的自动化操作已经大大加速了测序的速度，使科学家们能提前几年完成人类基因组草图测序，并测出了另外几百种生物的基因组，但当前普遍使用的测序仪，一次只能读取1,000个左右的碱基，且DNA样品需要长时间的制备和分析，因而科学家们一直在寻求革命性的技术革新：高速测序技术。本文综述了DNA高速测序技术及DNA高速测序仪器的进展情况，并对其应用前景进行了展望。

简介：[摘要] 目的 探讨肿瘤DNA重组修复功能评估系统（RDS）预测非小细胞肺癌（NSCLC）患者放化疗疗效的价值。方法 选取2019年1月-2022年1月医院收治的100例非小细胞肺癌患者，所有患者均接受放化疗治疗，于于放疗2个月、化疗2个周期后对患者随访1个月评估两组治疗效果，根据结果分为有效组与无效组，设计基线资料调查表，详细统计两组患者的基线资料及RDS值并比较，重点分析RDS值预测NSCLC患者放化疗疗效的价值。结果 治疗后，100例NSCLC患者中CR 0例，PR 42例，SD 30例，PD 28例，治疗有效72例，占比72.00%，治疗无效28例，占比28.00%；无效组RDS值比有效组低，有统计学差异（P＜0.05），组间其他资料比较，无统计学差异（P＞0.05）；绘制ROC曲线结果显示，RDS值预测NSCLC患者放化疗治疗无效风险的AUC=0.813，预测价值理想，对应灵敏度为0.759、特异度为0.810、约登指数为0.569、cut-off值为1.242。结论 RDS值预测NSCLC患者放化疗治疗无效风险价值较高，RDS值过表达提示NSCLC患者放化疗治疗无效高风险。

简介：指纹技术与DNA技术同属个人识别技术,两者相比各有优势.DNA技术有着明确的误差估计,结论较为客观,准确率较有保障,而且所需检材来源广泛、量微,易于获得.指纹技术有着更强的个体识别能力,对个体不具有侵害性,更易于接受,是目前最便捷且应用最广泛的个人识别技术.因此,这两种识别技术都是当今司法办案不可缺少的,都应得到高度重视.

简介：无论是高贵优雅的气质淑女，还是青春逼人的靓丽少女，皮草衣都能轻松满足你的需求，打造属于你的个人风格。皮草衣奢华、高贵的属性，致使根根皮草就像分子般进行着扩散运动，时时飘散出独特出众的女性魅力。

简介：<正>陈老师是女老师,有点胖,戴副眼镜,唐山人。初二时,新开历史课,她教我们历史。中国历史开课不久,讲到类人猿,给我印象最深。不是我尤其喜欢类人猿,而是因为陈老师的口音。

简介：AventadorLP700-4还是延续了Lamborghini的一贯设计风格，显得粗犷而霸气，浑身充满了如蛮牛般的力量。而从整体感觉上，我们也能从其身上看到Murcielago、Renventon以及SestoElementoConcept的影子。

简介：真的假不了,假的真不了,真真假假错不了。几次DNA测试,不但测出了骨肉亲情,也测出了人心善恶。

简介：乔皮奇体质不好,老是感冒发烧。“太影响学习了,”乔皮奇生自己的气,“如果我能不生病就好了!”