简介：摘要目的对微载体悬浮培养Vero细胞的生产工艺进行研究。方法通过调整生物反应器关键参数（转数）来研究并优化微载体悬浮培养Vero细胞工艺。结果优化工艺后可更好的应用于生产。结论优化后的工艺可以适用于生物反应器载体悬浮培养Vero细胞的生产。

简介：摘要目的本研究拟采用病毒蚀斑试验，通过不同血清浓度下的乙型脑炎病毒P3株感染Vero细胞后形成的蚀斑形成单位来分析不同血清浓度对乙脑病毒感染细胞能力的影响。方法将经过稀释的乙脑病毒P3株与不同浓度的无乙脑病毒抗体血清等量混合后接种到长满单层Vero细胞的6孔细胞板上，通过病毒蚀斑试验测定蚀斑形成单位。结果在乙脑病毒接种量不变的情况下，血清终浓度不高于30%时对乙脑病毒感染Vero细胞能力的影响相差不多，当血清终浓度达到40%～50%，乙脑病毒感染Vero细胞的能力明显增加。结论乙脑病毒P3株在不同血清浓度下对Vero细胞的感染能力的确存在差异，当血清浓度增加到30%以上时，其感染Vero细胞的能力呈指数增长。

简介：

简介：本世纪50年代苏联研制出重型直升机米-6。当时,世界上许多报刊都争相报道。有的报刊说:“苏联直升机界的这个庞然大物,能把西方任何一架满载的直升机带上天空。”美国与苏联在重型直升机方面展开竞争。若干年之后,与米-6相

简介：目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）E6/E7mRNA检测在无明确诊断意义的不典型鳞状细胞（ASC-US）患者中的临床应用价值.方法对320例ASC-US患者进行HPVE6/E7mRNA和高危型HPV（HR-HPV）DNA检测,结合病理学诊断资料进行统计学分析.结果CINⅡ＋级和CINⅢ＋级的HPVE6/E7mRNA阳性率分别高于CINⅡ-级和CINⅢ-级,差异均有统计学意义（P〈0.001）;不同等级宫颈病变的HPVE6/E7mRNA拷贝数不同,差异有统计学意义（P〈0.001）,且宫颈病变级别与mRNA拷贝数之间呈正相关.HPVE6/E7mRNA与HR-HPVDNA检测CINⅡ＋级和CINⅢ＋级的灵敏度、阳性预测值、阴性预测值差异均无统计学意义（P〉0.05）;两者特异度比较,差异有统计学意义（P〈0.001）.结论HPVE6/E7mRNA检测作为ASC-US的分流指标更确切有效,是目前ASC-US患者是否阴道镜转诊的较佳分流策略.

简介：摘要： 目的 探究国产细胞工厂（CF40）代替进口细胞40层工厂在口服三价重配轮状病毒减毒活疫苗（vero细胞）生产中的可能性。方法 用国产细胞工厂与进口细胞工厂培养vero细胞，观察细胞形态、计数、检测细胞活率并进行生化分析；对不同工厂培养的细胞感染轮状病毒，观察细胞病变，检测病毒滴度及浊度；

简介：目的构建并筛选出最有效的HPV16E6基因特异的小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)表达载体,观察其对宫颈癌细胞中HPV16E6基因表达的长期影响,探讨E6基因在宫颈癌发生过程中的分子作用机制,为临床HPV感染及宫颈癌治疗探索新方法.方法构建HairpinsiRNA质粒,稳定转染宫颈癌SiHa细胞,鉴定转染细胞中的质粒DNA,通过Real-TimeRT-PCR检测细胞中HPV16E6mRNA表达,采用Western-blot检测p53、p21等蛋白的变化.MTT法(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法)检测SiHa细胞转染siRNA后细胞增殖曲线.结果HPV16E6AhairpinsiRNA表达载体转染人宫颈癌SiHa细胞,可以在细胞内长期表达siRNA,有效抑制细胞内HPV16E6基因的表达.E6AsiRNA能抑制细胞生长,作用持续达4个月以上.结论利用siRNA表达载体抑制整合在细胞中的外源HPVE6病毒癌基因可能是治疗HPV感染和宫颈癌的一种新的理想方法.

简介：摘要目的通过突变整合于宿主细胞中的人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16型的E6、E7致癌基因，探索预防和治疗宫颈癌的新方法。方法以SiHa细胞系为研究对象，设计靶向其内整合的HPV16 E6和E7基因的小引导RNA(small guide RNA，sgRNA)，将其克隆入CRISPR/Cas9质粒，并应用其将E6、E7基因敲除，随后应用错位酶切法和克隆测序检测突变效果，并用细胞迁移与侵袭实验检测细胞的侵袭力。结果设计的sgRNA被克隆入CRISPR/Cas9质粒，经测序克隆正确。该质粒转染SiHa细胞后，可以引发靶点DNA的突变，致使E6和E7基因密码子改变，无法正确表达。E6、E7突变后SiHa细胞侵袭及增殖能力下降(t检验，pCas9组与psgE6-1-1-Cas9组相比，P＝0.0006; pCas9组与psgE7-1-2-Cas9组相比，P＝0.0007)，促进肿瘤抑制因子P53的表达恢复，细胞的恶性度降低。

简介：肾癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤，发病率较高，约占全身恶性肿瘤的4．2％。50％以上的肾癌患者早期并无特异性症状，发现时多已进入中晚期，而且约1／3的患者已有转移。转移后肾癌患者预后尤其不佳，5年生存率仅有10％。为了明确肾癌侵袭转移的相关分子机制，我们对转移性。肾透明细胞癌（clearcellrenalcaicinoma,ccRCC）患者样本进行了基因芯片筛选，发现一种在人类很多肿瘤的发生和转移过程中都发挥着重要作用的肿瘤抑制因子——KLF6，其在原发性转移性CCRCC中表达下调。

简介：摘要目的探讨hnRNP E1对HPV16早期基因E2、E6表达的调控及宫颈癌细胞生物学功能的影响。方法采用体外细胞实验方法，对HPV16阳性人宫颈鳞癌SiHa细胞株采用hnRNP E1cDNA质粒上调hnRNP E1表达，于上调前、后采用Real-time PCR和Western blot分别检测各组细胞HPV16 E2、E6 mRNA和蛋白表达水平，同时，应用CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖、周期及凋亡。采用SPSS 22.0和Graphpad Prism 7.0软件进行相关资料分析。结果随着转染时间的增加（24、48、72 h），hnRNP E1过表达组的SiHa细胞活性及处于增殖状态的细胞数逐渐减少（P<0.05），而G0/G1期细胞比例增高，S、G2/M期细胞比例及增殖指数降低（P<0.05），晚期凋亡率和细胞总凋亡率逐渐增加（P<0.05）。hnRNP E1过表达组HPV16 E6 mRNA和蛋白表达水平低于空白组和空质粒组，差异有统计学意义（P<0.05），且随着HPV16 E6 mRNA和蛋白表达水平的降低，SiHa细胞增殖指数下降，而总凋亡率有增加趋势。3组间HPV16 E2 mRNA表达量差异无统计学意义（P=0.427），HPV16 E2蛋白未被检测到。结论hnRNP E1可抑制HPV16 E6的转录和翻译，进而抑制宫颈癌细胞增殖，促使凋亡，hnRNP E1可作为抑制宫颈癌变的潜在靶标。但本研究未发现hnRNP E1与HPV16 E2在SiHa细胞中的关系。

简介：摘要：文章主要是分析了Vero 细胞无血清培养基的组成，在此基础上讲解了Vero细胞无血清细胞培养基的发展，望可以为有关人员提供到一定的参考和帮助。

简介：【摘要】目的：探究新型冠状病毒灭活疫苗（Vero细胞）导致的不良反应及应对处理。方法：选取我院从2021年2月8日-2021年12月31日52142例新冠疫苗接种者为研究对象，观察所有接种新型冠状病毒灭活疫苗（Vero细胞）接种者接种后24小时内的不良反应。结果：患者接种后24小时内有患者出现恶心、发热、注射部位肿痛、头晕等，其中恶心患者601例，占比为1.15%；恶心伴呕吐7例，占比0.01%；发热患者630例，占比为1.21%；注射部位肿痛178例，占比为0.34%；头晕212例，占比为0.41%；口唇发麻30例，占比为0.06%；胸闷、心悸26例，占比0.05%；腹泻7例，占比0.01%；注射侧上肢皮疹5例，占比0.01%；无过敏性休克等严重不良事件发生。结论：接种新型冠状病毒灭活疫苗（Vero细胞）后，未见严重不良反应，疫苗具有良好的安全性,出现的不良反应以轻症较多，如恶心、发热、注射部位肿痛、头晕等，多数接种者以发热、恶心为主，但如不及时处理，有可能导致严重不良事件的发生，对此应根据不同不良反应采用针对性的护理及治疗方案，以此消除不良反应。

简介：摘要目的构建人乳头状瘤病毒（HPV）16 E6/E7基因稳定表达的人永生化角质形成细胞（KC），为研究HPV16 E6/E7诱导的细胞永生化及恶性转化机制提供细胞模型。方法两步消化法分离培养原代人包皮角质形成细胞（HFK），利用慢病毒感染技术对细胞稳定转染HPV16 E6/E7基因，连续培养30代以上，筛选出永生化KC，分为3组：①空白对照组：传代2次的原代HFK；②实验组：传代2次的原代HFK感染LV5-HPV16 E6/E7，感染细胞记录为A0代，感染后以传代次数记录（A1、A2……）；③阳性对照组：HPV16阳性宫颈癌细胞SiHa。应用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、Western印迹实验分别检测空白对照组、实验组、阳性对照组HPV16 E6/E7 mRNA、蛋白及CK14蛋白的表达，CCK-8及Transwell Insert方法检测细胞的增殖及侵袭能力。裸鼠致瘤实验检测实验组A30、阳性对照组SiHa细胞的致瘤能力。结果成功分离原代HFK。LV5-HPV16 E6/E7重组质粒感染原代HFK后，空白对照组细胞无荧光表达，连续传代后出现衰老表现，实验组A30细胞体积、形态较原代HFK无明显变化，且荧光表达率为100%。与空白对照组相比，实验组A1、A10、A20、A30细胞HPV16 E6 mRNA表达水平显著升高（t值分别为7.12、8.07、6.53、5.66；P值分别< 0.001、< 0.001、= 0.001、= 0.005）；与空白对照组相比，实验组A1、A10、A20、A30细胞HPV16 E7 mRNA表达水平也显著升高（t值分别为3.20、4.29、3.75、4.22；P值分别为0.024、0.008、0.013、0.014）。空白对照组未见HPV16 E6/E7蛋白的表达，而A30及SiHa细胞可见HPV16 E6/E7蛋白的表达。CCK-8实验显示，实验组A10、A20、A30细胞增殖水平显著高于空白对照组（t值分别为6.49、7.55、9.43；P值分别为0.003、0.002、0.001），而A1的增殖水平与空白对照组比较，差异无统计学意义（t = 2.40，P = 0.074）。Transwell Insert侵袭实验显示，A30不能穿过基底膜，SiHa细胞可穿过基底膜被染成蓝色。裸鼠接种A30细胞2个月后无肉眼可见肿瘤，组织学亦显示无肿瘤形成，裸鼠接种SiHa细胞后可于皮下形成肿瘤。结论通过采用慢病毒技术转染HPV16 E6/E7基因成功建立人永生化角质形成细胞，可作为HPV相关研究中的理想细胞模型。

简介：目的：探讨鬼臼毒素纳米脂质载体（POD-NLC）诱导人永生化阴道上皮细胞（VK2/E6E7）凋亡的作用及机制.方法：取对数期生长VK2/E6E7细胞,分别加入POD-NLC和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养24小时.实验分为4组：A组：空白对照组;B组：0.25μg/mLPOD-NLC＋Caspase抑制剂组;C组：1μg/mLPOD-NLC＋Caspase抑制剂组;D组：空白NLC＋Caspase抑制剂组.采用流式细胞仪检测ROS水平,qPCR检测AIFmRNA表达,蛋白印迹检测各组细胞AIF、cyt-C蛋白表达.结果：B组、C组均可以上调ROS、AIF、cyt-C水平,与A组及D组相比均有统计学差异（P值均〈0.05）;B组与C组AIFmRNA及AIF蛋白表达无统计学差异（P值均〉0.05）;ROS、cyt-C各组间比较均有统计学意义（P值均〈0.05）.结论：鬼臼毒素纳米脂质载体可以通过非Caspase依赖途径诱导永生化阴道上皮细胞凋亡.

简介：6月26日20:00,江淮新能源采用了全新的网络线上发布与全国线下专卖店百城联动展开的模式,将iEV6E两款新品正式发布上市,全国各地的主流媒体、意向客户在参与线上发布会的同时,在江淮新能源专卖店进行着互动交流,赏新车、观世界杯,一时热闹非凡,这开创了全新的新车上市发布模式,在行业内尚属首次。本次发布会上,江淮新能源共有两款新品四个车型同步首发:iEV6E运动版不

简介：摘要目的评价新型冠状病毒灭活疫苗大规模紧急使用的安全性。方法通过“疫苗接种信息采集系统”，收集在紧急使用中新型冠状病毒灭活疫苗（北京生物制品研究所、武汉生物制品研究所）接种人群的不良反应发生情况，采用流行病学与统计学方法分析相关信息。结果截至2020年12月1日，共采集519 543人次接种信息，总不良反应发生率为1.06%，全身不良反应发生率为0.69%，局部不良反应发生率为0.37%。全身不良反应以疲劳（0.21%）、头痛（0.14%）、发热（0.06%）、咳嗽（0.05%）、食欲不振（0.05%）为主要表现；局部不良反应以接种部位疼痛（0.24%）、接种部位肿胀（0.05%）为主要表现。结论大规模新型冠状病毒灭活疫苗（Vero细胞）（北京生物制品研究所、武汉生物制品研究所）进行紧急使用后，一般反应的发生率较低，未见严重不良反应，疫苗具有良好的安全性。

简介：摘要：目的：探究口服五价重配轮状病毒减毒活疫苗(Vero细胞)接种后的不良反应情况。方法：选取2020年7月1日～2021年7月1日在门诊接种口服五价重配轮状病毒减毒活疫苗(Vero细胞)的4658例接种者为研究对象，采用问卷调查、电话访谈、查询疫苗出入库系统等方式监测接种后的不良反应。结果：接种1剂次接种者1740例，报告一般不良反应1例，发生率为0.057%，经查为服用后正常排毒。接种2剂次1530例接种者与完成3剂次全程接种者1388例接种者未报告不良反应。结论：口服五价重配轮状病毒减毒活疫苗(Vero细胞)接种后安全性高，接种过程不良反应发生率较低，适用于低年龄段的人群接种，婴幼儿接种无轮状感染的症状。

简介：摘要目的探讨在宫颈细胞学ASC-US分流管理中高危型人乳头瘤病毒E6/E7的临床检测价值。方法选择在2016年4月-2017年4月期间来本院妇科门诊进行宫颈TCT检查结果为ASC-US的50例患者作为研究对象，对所有患者采取HR-HPVDNA分型检测与E6/E7mRNA检测，同时进行宫颈活检与阴道镜检查。对HR-HPVDNA与E6/E7mRNA检测结果的特异性与敏感度进行比较与分析。结果对于CIN2+，E6/E7阳性率为52.5%，HPV阳性率为86.9%；对于CIN2-，HPVDNA检测CIN2+敏感度为87.0%，低于HPVDNA敏感度（91.3%），差异无统计学意义（P＞0.05）；前者特异性为67.5%，高于HPVDNA特异性（25.0%），差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论E6/E7表达与宫颈病变关系密切，HPVE6/E7mRNA检测可反映病毒的致癌能力，对细胞学检查为ASC－US患者有一定的分流价值。

简介：摘要目的观察肠道病毒71型(enterovirus 71，EV71)疫苗接种后5年的免疫持久性。方法在Ⅲ期临床试验免疫原性亚组中，对完成全程两针次免疫的、免前抗EV71中和抗体阴性人群进行免疫后5年采血，并检测抗EV71中和抗体评价免疫持久性。完整检测时间点包括0、56 d和8、14、26、64个月。采用t检验和卡方检验分析数据。结果疫苗组和安慰剂对照组分别有235和255名受试者具有全部检测点的中和抗体数据。接种后64个月，疫苗组抗EV71中和抗体几何平均滴度(369.57)高于对照组(55.58)，且差异有统计学意义(t＝14.28，P<0.01)；分别以抗体滴度8、16、32为阳性判定标准，疫苗组抗体阳性率(100%、99.57%、97.87%)均高于对照组(69.02%、61.96%、59.61%)且差异有统计学意义(χ2分别为107.93、133.14、130.69，P值均<0.01)。疫苗接种后其他检测时间点的结果与64个月类似。结论该EV71疫苗两针基础免疫后能够诱导较高的中和抗体水平和阳性率，在免疫后5年依然保持较好的免疫持久性。

简介：文章通过阐述针对自闭症特教老师、大学心理学教师和企业员工实施的应用戏剧工作坊的调研、设计和实施过程,总结出应用戏剧工作坊6E模型：Education教育、Enabling使能、Empowering授权、Entertaining娱乐、Engineering工程和Expertise专业性。在分别说明6E的基础上,文章进而指明6E之间相辅相成的关系,并反思如何可以评估应用戏剧工作坊的有效性。