简介:目的构建arhgap39基因真核过表达载体并初步研究arhgap39蛋白表达的相关问题。方法提取小鼠海马组织总RNA,逆转录合成cDNA,根据GeneBank中基因信息设计引物,高保真PCR扩增arhgap39基因的编码区,随后将其转移到真核载体上,转染NG-108细胞并观察其在细胞内的表达情况。结果经酶切和测序鉴定表明成功构建arhgap39基因的相关真核过表达载体;将其转染NG-108细胞,免疫印迹试验证实arhgap39成功过表达,arhgap39的分子量约为140kD。结论我们的实验结果确认了arhgap39蛋白的分子量,并对其可能存在的存在形式做了验证性研究,可以为进一步的研究提供理论基础和研究工具。
简介:在不断要求生活质量的今天,什么才是生活的质量?实现自我的追求?还是跟随社会潮流而沉浮?当互联网从最初的IPV4过渡到今天的已经在北京、成都、上海开始城市区域试点的IPV6,风格的速度将提高1000至10000倍!下载一部DVD的时间将变成只有内个“滴答”的秒钟就可以计算。这一切,是生活的质量吗?
简介:摘要目的了解广州市育龄期夫妇α、β地中海贫血基因的携带情况,为遗传咨询和产前基因诊断提供临床参考。方法选取2020年参加广州市免费产前筛查和诊断项目的夫妇39 928对,采用平均红细胞体积、平均血红蛋白浓度指标作为初筛,高效液相色谱法测定血红蛋白电泳进行复筛,Gap-PCR检测与PCR-反向斑点杂交(PCR reverse dot blot,PCR-RDB)用于确诊α、β地中海贫血。结果在筛查的39 928对夫妇中,共检出地中海贫血阳性8459例,发生率为10.59%。其中缺失型α地中海贫血5671例,发生率为7.10%;非缺失型α地中海贫血253例,发生率为0.32%;β地中海贫血2535例,发生率为3.17%。结论广州市育龄期夫妇地中海贫血的发病率较高,其中缺失型α地中海贫血最常见,其次是β地中海贫血和非缺失型α地中海贫血,符合广东地区地中海贫血的基因型分布特点。对于地中海贫血预防和控制,应建立网络和广泛实施婚前和产前筛查,以增加地中海贫血干预的可行性。
简介:摘要目的研究突变型RAB39B基因的表达水平及RAB39B对细胞自噬水平和α-突触核蛋白的影响,并初步探索RAB39B基因c.536dupA突变在帕金森病发病机制中的作用。方法基于前期发现由RAB39B基因新的突变c.536dupA导致青少年型帕金森综合征家系的工作背景,构建含有RAB39B基因c.536dupA突变型的重组表达质粒(pcDNA3.1-HA-RAB39B-536),与RAB39B野生型重组表达质粒(pcDNA3.1-HA-RAB39B),利用脂质体法将重组表达质粒转染至N2a细胞培养作为实验组。对照组为接受pcDNA3.1-HA转染的N2a细胞。利用实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹、免疫荧光及免疫共沉淀等技术来明确突变型RAB39B的表达水平及RAB39B对自噬功能和α-突触核蛋白的影响。结果在N2a细胞模型中,突变型RAB39B的转录水平约为野生型RAB39B的2倍,而突变型RAB39B的蛋白水平(0.30±0.00)明显低于野生型(1.50±0.25,t=8.313,P<0.05),加入蛋白酶体抑制剂MG132后突变型RAB39B蛋白水平有所升高(0.70±0.10,t=6.925,P<0.05);RAB39B基因突变组的微管相关蛋白1轻链3BⅡ/Ⅰ值(3.11±0.30)显著低于野生组(7.03±0.20,t=18.831,P<0.05);过表达野生型和突变型的RAB39B不影响内源性α-突触核蛋白水平,而过表达野生型的RAB39B会导致外源性的野生型和突变型(p.A53T)α-突触核蛋白水平升高[野生型:由0.60±0.11上升至1.25±0.08,t=8.254,P<0.05;突变型:由0.55±0.08上升至1.15±0.08,t=9.293,P<0.05]。结论RAB39B基因c.536dupA突变型蛋白稳定性下降,突变型蛋白可能通过泛素-蛋白酶体通路降解,且该突变可能影响细胞的自噬水平;RAB39B蛋白可能与α-突触核蛋白存在体内相互作用关系,可能参与α-突触核蛋白的稳态水平的维持。
简介:摘要目的结合临床实践经验,探乳腺叶状肿瘤的手术治疗。方法选取2003年1月-2009年12月期间我院收治的乳腺叶状肿瘤39例为研究对象,采用回顾性分析法,将乳腺叶状肿瘤患者资料进行系统的总结分析,探讨手术方式以及手术治疗的有效性。采用MicrosoftExcel建立数据库,运用SPSS13.0统计软件进行统计分析。结果本组39例患者中,21例(53.84%)行局部切除术,其中10例良性,4例交界性,7例恶性;15例(38.46%)行乳腺单纯切除术,其中7例良性,3例交界性,5例恶性;3例(7.69%)行乳腺癌改良根治术手术,其中1例交界性,2例恶性。1例患者局部切除术后复发为恶性,再次按乳腺癌改良根治术手术。3例按乳腺癌改良根治术的患者,术后病理检查均未发现有腋窝淋巴结转移。1例患者因多次复发,行术后辅助异环磷酰胺+盐酸阿霉素化疗。结论无论乳腺叶状肿瘤组织学上是良性或恶性,都有可能出现复发和转移,在患者出院时应告知患者定期复查,并按照要求对患者进行定期随访。