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  • 简介:目的利用海洋芽孢杆菌SCSIO06063来源的蛋白对扇贝蛋白进行解制备抗氧化肽。方法采用超滤和反复色谱分离纯化扇贝水解物。获得的肽类结构通过基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)鉴定,采用DPPH自由基清除实验评价肽类的抗氧化活性。结果分离纯化后获得3个肽类组分A、C和E,依次被鉴定为His-Ala-Ile-Ile-Met-Met-Val(A)、Leu-Asn-Pro-Lys-LeuIle-Met-Val(C)和Met-Ile-Leu-Ile-Leu-Phe-Arg(E),经NCBInr数据库中Blast检索,未发现A组分的同源序列,提示其为一个新的肽类结构。A、C和E3个组分均具有一定的抗氧化能力,在浓度为1.0mg·mL-1时,它们的清除率分别为51.6%、55.4%和53.4%。结论海洋芽孢杆菌SCSIO06063来源的蛋白可用于扇贝蛋白解制备抗氧化肽。

  • 标签: 海洋芽孢杆菌 扇贝蛋白 酶解 肽类 自由基清除
  • 简介:学者们认为隶属于半胱氨酸蛋白(cysteineprotease)的组织蛋白(cathepsins)主要作用是在溶酶体酸性条件下,降解不必要的细胞器及蛋白质,使其再被利用.然而最近研究显示,组织蛋白家族成员和其他细胞外蛋白(如基质金属蛋白和丝氨酸蛋白)一样,对细胞外基质的重塑、间质基质的降解以及细胞信号传递和细胞凋亡起重要作用.本综述重点叙述组织蛋白生物学特征(结构、合成、加工、激活、分泌、活性调控和功能),以及参与各种心血管疾病的发病机制,尤其是关于循环血中组织蛋白水平作为诊断心血管疾病、预后判定和药物靶目标的应用潜能.

  • 标签: 半胱氨酸蛋白酶 组织蛋白酶 细胞外基质 心血管疾病
  • 简介:以菠萝皮渣为原料,研究纳米TiO2吸附结合超滤、冷冻干燥技术制备菠萝蛋白粉的方法。结果表明:在温度15℃条件下,以粗液质量3.5%的纳米TiO2吸附30min,吸附率达99.1%;采用0.4mol/L、pH6.0的柠檬酸缓冲液洗脱,将洗脱液用截留分子质量50kD的超滤膜超滤,流出液用截留分子质量10kD的超滤膜超滤,浓缩液经冷冻干燥得到比活力为2.8×10^6U/g的菠萝蛋白粉。

  • 标签: 吸附 超滤 菠萝蛋白酶
  • 简介:摘要 目的:观察埃索美拉唑、阿莫西林、甲硝唑和枸橼酸铋钾的四联治疗在Hp感染中的根除率,以及观察链霉蛋白联合四联药物对Hp的根除效果。方法:选取Hp感染阳性,胃镜提示为胃炎的初诊患者120例,随机分为两组,接受14d的Hp根除治疗。治疗组:埃索美拉唑20 mg,2次/d,阿莫西林1.0g,2次/d、甲硝唑400 mg,3次/d,枸橼酸铋钾220mg,2次/d,疗程14d,同时每次在早晚餐前10分钟左右同时服用链霉蛋白颗粒及碳酸氢钠1.0g。对照组:应用同样的铋剂四联疗法。停药4周后进行14C-尿素呼吸试验,对比根除率。结果:治疗组Hp根除率为 95%,对照组根除率为 83.3%,具有显著性差异( P <0. 05) 。结论: 铋剂四联疗法是一种高效的Hp根除方案,联合链霉蛋白能够提高Hp根除率。

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  • 简介:TIMP-2主要通过与MMP酶原结合抑制MMP-2,在大多数MMP(MMP-1、MMP-3、MMP-9等)基因的调节序列中,POAG时房水中MMP表达及调节

  • 标签: 中的作用 原发性开 型青光眼
  • 简介:摘要目的寻找脓毒症相关性急性肾损伤(AKI)的关键基因,为脓毒症相关性AKI的治疗提供理论和实验依据。方法①生物信息学分析:对基因表达数据库(GEO)中GSE30718和GSE53773数据集进行生物信息学分析,这两个数据集记录了肾移植手术前后对移植肾进行规律性肾活检的基因芯片数据,一部分患者在肾移植后发生了AKI。对两个数据集中AKI相关基因表达差异进行分析,找到在两个数据集中差异一致且受试者工作特征曲线下面积(AUC)较高的基因作为目的基因,进行后续细胞验证实验。②细胞验证实验:体外培养人近端肾小管上皮细胞株HK2,使用10 mg/L脂多糖(LPS)孵育6 h制备LPS-HK2细胞模型(LPS模型组),并设空白对照组;使用小干扰RNA(siRNA)技术对LPS-HK2细胞中通过生物信息学分析得出的目的基因进行敲减(基因敲减组),并设置基因阴性对照组。采用实时荧光定量反转录-聚合链反应(RT-qPCR)检测HK2细胞中目的基因的表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中炎症因子水平;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测细胞中凋亡关键蛋白的表达。结果①生物信息学分析结果:两个数据集间有325个基因呈现相同的表达趋势,其中144个显著下调,181个显著上调,而分泌性白细胞蛋白抑制因子(SLPI)在两个数据集中表达差异的统计学意义均较大;进一步受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析证实,GSE30718和GSE53773数据集中SLPI表达量对AKI的诊断效能均较大,AUC分别为0.83和0.92。故选择SLPI作为目的基因进行后续细胞验证实验。②细胞验证实验结果:RT-qPCR结果显示,LPS模型组细胞中SLPI表达较空白对照组显著升高(2-ΔΔCT:1.80±0.14比1.00±0.11,P<0.01),变化趋势与生物信息学分析结果相符。进一步敲减SLPI基因分析显示,基因敲减组LPS-HK2细胞培养液中炎症因子水平较阴性对照组显著上调〔白细胞介素-6(IL-6,ng/L):509.58±27.08比253.87±75.83,IL-1β(ng/L):490.99±49.52比239.67±26.97,肿瘤坏死因子-α(TNF-α,ng/L):755.22±48.66比502.06±10.92,均P<0.01〕,说明SLPI可抑制LPS诱导的HK2细胞炎症反应;基因敲减组LPS-HK2细胞凋亡关键蛋白Bax、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白3(caspase-3)表达均较阴性对照组显著升高〔Bax蛋白(Bax/GAPDH):1.38±0.12比1.00±0.10,caspase-3蛋白(caspase-3/GAPDH):1.44±0.15比1.00±0.11,均P<0.05〕,而Bcl-2表达显著降低(Bcl-2/GAPDH:0.83±0.08比1.00±0.05,P<0.05),说明SLPI可抑制细胞在炎症反应中的凋亡。结论SLPI能抑制LPS诱导的HK2细胞炎症反应和凋亡,可能参与肾小管细胞在脓毒症反应中的保护机制,成为脓毒症相关性AKI治疗的潜在靶点。

  • 标签: 急性肾损伤 脓毒症 分泌性白细胞蛋白酶抑制因子
  • 简介:摘要本文报道1例双重抗体阳性自身免疫性脑炎患者,临床表现主要为面-臂肌张力障碍发作、低钠血症及意识障碍,血清抗LGI1抗体阳性,抗NMDAR抗体阳性,诊断为自身免疫性脑炎,给予糖皮质激素、丙种球蛋白联用治疗后症状好转,复查抗体转为阴性。

  • 标签: 自身免疫性脑炎 多重抗体
  • 简介:目的研究血清半胱氨酸蛋白抑制剂C(CysC)同血清肌酐(Scr)相比,在肾移植术后肾功能稳定期以及出现术后感染时,监测肾功能变化时的应用比较。方法50例肾移植患者,记录患者术前、术后1个月内、感染发生时及第2天血清中CysC和Scr的浓度,同时选取20名健康人和20例非肾移植感染者,检测血清中CysC和Scr的浓度作为对照。采用相关软件进行统计学分析。结果健康人和非肾移植感染患者的CysC浓度差异无统计学意义(P〉0.05);移植后肾功能稳定组术后前3天内CysC和Scr都下降(P〈0.05),随后各监测点之间的差异均无统计学意义;自身比较,术后感染组患者出现肾功能异常时,CysC比Scr早升高;术后感染组CysC和Scr较肾稳定组都升高(P〈0.01);根据ROC曲线,感染组CysC的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率及曲线下面积均优于Scr(P〈0.05)。结论肾移植后,CysC能早期、灵敏、准确的判断肾功能变化,是优于Scr的一种血清标志物。

  • 标签: 肾移植 血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C(Cys C) 肌酐(Cr) 感染
  • 简介:摘要急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)是一种临床常见的呼吸系统疾病,主要以肺水肿、肺顺应性降低、肺上皮/内皮细胞损伤为病理学特征。目前认为各种病因引发的全身炎症反应综合征(SIRS)是ALI/ARDS发生发展的核心。SIRS状态下广泛激活的中性粒细胞可以迁移至肺组织中,并释放大量蛋白,包括:中性粒细胞丝氨酸蛋白(NSPs)、溶菌酶、髓过氧化物酶以及胶原蛋白等,进而诱发严重的肺组织损伤。其中,NSPs如中性粒细胞弹性蛋白(NE)、组织蛋白G(CG)、蛋白3(PR3)以及中性粒细胞丝氨酸蛋白4(NSP4)等在ALI/ARDS的发病过程中发挥了重要作用。丝氨酸蛋白抑制剂(Serpins)可能通过作用于这些活性起到保护肺组织的作用,但具体机制目前尚未完全阐明。现从NSPs在ALI/ARDS炎症反应中的作用机制、Serpins的结构概述、Serpins在ALI/ARDS中的首要作用(如抑制NSPs活性)、Serpins在ALI/ARDS中的其他作用〔如抑制炎性因子的释放、调控细胞凋亡、对血管内皮细胞及肺表面活性蛋白-D(SP-D)的保护作用〕以及外源性Serpins在治疗ALI/ARDS的临床应用方面,探讨Serpins在ALI/ARDS病理机制中的作用,从而为ALI/ARDS的临床治疗提供新的思路和策略。

  • 标签: 急性肺损伤 急性呼吸窘迫综合征 中性粒细胞丝氨酸蛋白酶 丝氨酸蛋白酶抑制剂
  • 简介:脑创伤是目前严重危害人类健康的主要疾病之一,具有较高的致残率和死亡率。而继发性脑损伤是影响脑创伤发展和预后的重要因素之一,适当的治疗可以减轻或避免某些继发性损伤的病理变化,提高患者的疗效,改善预后。近年来,随着对基质金属蛋白基质系(matrixmetalloproteinases,MMPs)的不断深入研究,金属蛋白系在继发性脑损伤中的作用日益受到人们的重视。本文就基质金属蛋白系在脑创伤方面的研究概述如下。

  • 标签: 基质金属蛋白酶类 脑创伤
  • 简介:摘要蛋白激活受体2(PAR2)是G蛋白耦联受体的家族成员,作为一种细胞表面受体,PAR2可被丝氨酸蛋白及药理学上的合成配体激活,其在机体内分布广泛并在心血管病理生理机制中发挥着重要作用。近年来大量研究显示PAR2在动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤及心肌纤维化中具有重要作用,且抗凝剂利伐沙班可通过作用于PAR2对心脏产生保护作用。因此,PAR2或可成为冠心病的治疗靶标,同时相关抗凝剂或可老药新用,挖掘其抗凝以外治疗冠心病的潜能。

  • 标签: 冠状动脉疾病 再灌注损伤 蛋白酶激活受体2
  • 简介:摘要目的考察不同胰蛋白及消化后是否弃去胰蛋白对Madin-Darby犬肾(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞消化效果的影响,并评价培养基中添加胎牛血清对减轻胰蛋白细胞毒性的作用。方法选用5种胰蛋白分别消化MDCK细胞,消化5 min后弃去胰蛋白为弃去组,不弃去为保留组。观察消化过程,记录细胞达到不同状态所需的时间。完全消化后,检测细胞的活率、结团率、直径。以不同浓度的胰蛋白消化MDCK细胞,按培养基是否添加胎牛血清分为含血清和无血清组,检测细胞活性。结果重组胰蛋白消化时间长于动物源胰蛋白。保留和弃去组细胞活率均值都大于94.77%,结团率均值均大于34.56%,直径均值分别为17.33和16.97 μm且差异有统计学意义(t=4.632, P<0.001)。细胞活性随胰蛋白添加量呈现梯度变化。含血清和无血清组的细胞活性差异有统计学意义(t=12.545, P<0.001)。结论5种胰蛋白均可完全解离贴壁MDCK细胞,其中重组胰蛋白消化时间较长,作用温和,比较适合生产。弃去胰蛋白再继续消化的做法可行且有益,胰蛋白浓度对细胞活性有影响,胎牛血清可以减轻胰蛋白的潜在毒性。

  • 标签: Madin-Darby犬肾细胞 传代培养 细胞消化 胰蛋白酶
  • 简介:目的:研究胃蛋白活力对软胶囊剂崩解时限的影响。方法:采用3批不同活力的胃蛋白分别配制人工胃液。测定3批样品各6粒胶囊的崩解时限。结果:胃蛋白的活力直接影响软胶囊的崩解时限。结论:国家药品质量标准应规定配制人工胃液的胃蛋白的活力。

  • 标签: 胃蛋白酶 软胶囊剂 人工胃液 崩解时限
  • 简介:解聚素-金属蛋白(adisintegrinandmetalloprotease,ADAM)又名MDC(MetalloproteaseDisintegrinCysteine-rich),是近年来发现的一类具有多个功能区的细胞膜表面糖蛋白家族,大约由800多个氨基酸残基组成。典型的ADAM蛋白蛋白序列含保守的具有多个特征性的功能域,从N肽基端到C肽基端依次为信号肽区域、前调控区域、金属蛋白区域、解聚素区域、富半胱氨酸区域、上皮生长因子区域、跨膜区域和胞内区的细胞表面糖蛋白区域。

  • 标签: 金属蛋白酶 解聚素 活化作用 家族 细胞膜表面糖蛋白 细胞表面糖蛋白
  • 简介:摘要基质金属蛋白(matrix metalloproteinase,MMP)9是MMP家族中的一种明胶。其作用底物广泛,参与各种生理和病理过程,是降解细胞外基质的主力,研究其特异性抑制剂对慢性炎症性疾病和肿瘤具有重要意义。此文介绍了MMP-9的结构和功能,并总结了近年来研发的MMP-9特异性抑制剂及其特征,为进一步研究和应用提供参考。

  • 标签: 基质金属蛋白酶9 炎症 肿瘤
  • 简介:为了及时对糖尿病肾病进行早期诊断,建立了一种敏感、简便、可靠的尿微量转铁蛋白(TRF)免疫测定法。工怍范围0.5~12μg/L,检出限0.28μg/L.批内变异系数(CV)66%,批间CV8.6%,50例正常健康的入尿TRF值以μg/mmcr表示,100列疾病组中尿TRF值均较正常对照组明显增高(P<0.01)。因此尿TRF是一种肾小球滤过功能不全的敏感指标。尿Cr测定采用jaffe’s法。

  • 标签: 尿液 微量转铁蛋白 测定 酶联免疫法
  • 简介:目的考察铝镁硅油片对大鼠胃酸和胃蛋白活性的影响。方法以胃酸和胃蛋白活性测定作为药效学指标。结果和结论与对照组相比,本品不影响大鼠正常胃液分泌,但能显著升高胃液pH和降低总酸排出量,高剂量组(600mg·kg^-1)尚能显著降低胃液总酸度;能抑制大鼠胃蛋白活性,180mg·kg^-1,600mg·kg^-1的作用更为显著(P<0.05,P<0.01),其剂量和活性抑制作用间呈良好的线性关系。

  • 标签: 铝镁硅油片 胃酸分泌 胃蛋白酶