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  • 简介:背景:以往研究证实,CREG是一种与M6P/IGFⅡR直接结合的溶酶体蛋白,并依赖于与M6P受体的相互作用有效转运至溶酶体。目的:分析外源性CREG蛋白与溶酶体组织蛋白和M6P/IGFⅡR的相互作用关系及其对M6P/IGFⅡR表达变化及细胞内定位的影响。方法:应用细胞免疫荧光双染和免疫共沉淀方法,观察外源性CREG蛋白与溶酶体组织蛋白和M6P/IGFⅡR的相互作用关系,并应用gain-of-function和loss-of-function模型,通过Westernblot和细胞免疫荧光双染方法,观察CREG对M6P/IGFⅡR表达变化及细胞内定位的影响。结果与结论:细胞免疫荧光双染和免疫共沉淀方法证实外源性CREG蛋白与溶酶体组织蛋白和M6P/IGFⅡR有直接相互作用关系;应用gain-of-function和loss-of-function模型进一步证实,CREG对M6P/IGFⅡR表达变化无影响,而影响其在细胞内的定位。提示外源性CREG蛋白定位于溶酶体,且与溶酶体组织蛋白和M6P/IGFⅡR有相互作用关系,并影响M6P/IGFⅡR的细胞内定位。

  • 标签: 组织构建 组织工程 E1A激活基因阻遏子 国家自然科学基金
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  • 简介:目的研究低氧状态下乙酰肝素(heparanase,Hpa)反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynu—cleotide,AS—ODN)对胰腺癌高转移细胞株MIAPaCa-2细胞基质金属蛋白.2(matrixmetalloproteinase.2,MMP-2)和MMP-9的影响。方法以HpaAS—ODN预先阻断MIAPaCa-2细胞Hpa表达并低氧培养,观察MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表达的变化,明胶法检测MMP-2和MMP-9活性的变化,观察阻断Hpa对MMP-2和MMP-9表达及活性的影响。结果低氧培养条件下,MIAPaCa-2细胞MMP-2mRNA及蛋白表达略有上调,但是与常氧条件下培养对比,在6、12和24h差异均无统计学意义(P值均〉0.05)。以ASODN阻断Hpa后,MMP-2mRNA及蛋白表达均无明显变化。低氧后6hMMP-9mRNA及蛋白表达开始升高,12h(P〈0.05)和24h(P〈0.01)更加明显。阻断Hpa表达后,MMP-9mRNA及蛋白表达在各时间段均有下降,而在24h下降明显,差异具有统计学意义(P〈0.01)。低氧后12h和24h,活化型的MMP-2和MMP-9均显著增强,当Hpa表达被抑制后,于12h(P〈0.01)和24h(P〈0.01)活化型的MMP-9活性受到明显抑制,而各时间内,活化型的MMP-2活性均不受HpaAS—ODN的影响(P〉0.05)。结论低氧可刺激MIAPaCa-2细胞MMP-9mRNA及蛋白的表达,增强活性。预先阻断Hpa表达在12h和24h可抑制MMP-9mRNA和蛋白的表达,降低MMP-9的活性,而对MMP-2则无明显影响。

  • 标签: 胰腺癌 乙酰肝素酶 基质金属蛋白酶 寡核苷酸类 反义
  • 简介:目的探讨洛伐他汀在大鼠脑缺血再灌注损伤过程中对钙凋磷酸和钙蛋白活性的影响。方法采用大鼠局灶脑缺血模型,观察脑缺血再灌注后皮层钙凋磷酸和钙蛋白活性的变化。结果脑缺血再灌注可以导致皮层钙凋磷酸和钙蛋白活性增加,洛伐他汀可降低皮层钙凋磷酸和钙蛋白活性。结论洛伐他汀抗大鼠脑缺血再灌注损伤作用可能与其降低这两种的活性有关。

  • 标签: 洛伐他汀 大鼠 脑缺血 再灌注损伤 钙凋磷酸酶 钙蛋白酶
  • 简介:摘要泛素-蛋白体系统(ubiquitin-proteasome system, UPS)是真核细胞内除自噬-溶酶体外的另一种蛋白质降解系统。UPS可以清除错误折叠的蛋白,减少因错误折叠蛋白堆积而导致的衰老疾病发生。UPS选择性的蛋白质降解和调节功能作用于精原细胞的有丝分裂、减数分裂和精子细胞的变形过程,在精子发生中扮演重要角色。另外,精子的获能、顶体反应、透明带穿透、受精后精子线粒体的消除等重要生殖过程也与UPS紧密相关。本文就近年来UPS在精子发生和受精过程中的作用及其与不孕症关系研究进行文献综述。

  • 标签: 泛素-蛋白酶体系统 泛素化 精子发生 受精 不孕症
  • 简介:摘要蛋白激活受体2(protease activated receptor 2,PAR2)是G蛋白耦联受体超家族的成员,广泛表达于肠上皮细胞中。在结直肠癌的肿瘤微环境中,存在着多种蛋白,可以激活肿瘤细胞或间质细胞中的PAR2,从而调控肿瘤细胞的行为。在本综述中,作者关注于PAR2在结直肠癌发生发展过程中调控的信号通路,对PAR2的作用机制展开阐述。

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  • 简介:摘要蛋白泛素化是生理条件下调控蛋白质稳定性和活性的重要机制之一,其中E1/E2/E3连接和去泛素化蛋白泛素化过程中发挥着重要调节作用,而去泛素化则可能会诱导肿瘤、哮喘等疾病的发生。泛素特异性蛋白作为去泛素化家族中的主要成员被证实与肿瘤的发生、发展密切相关,其中部分泛素特异性蛋白已经被用于抗肿瘤治疗的潜在靶点进行研究。因此,本研究旨在通过对泛素特异性蛋白在肿瘤演进过程中的调控机制作一简要综述,期望为肿瘤治疗提供更多的研究参考。

  • 标签: 肿瘤 泛素化 综述 泛素特异性蛋白酶
  • 简介:摘要目的探讨唾液胃蛋白及胆汁酸检测在胃食管反流病(GERD)中的诊断价值。方法选取2018年1月至2019年6月就诊于广东省人民医院的104例GERD患者为GERD组,再将其分为食管表现组、食管外表现组、焦虑抑郁组、非焦虑抑郁组4个亚组,同时设立健康对照组43名,收集两组晨起及午餐后2 h唾液,用ELISA方法检测唾液中总胃蛋白(TPP)及总胆汁酸(TBA)浓度,比较其差异,通过受试者工作曲线评估唾液TPP、TBA检测的诊断效能及其敏感性和特异性。结果GERD组晨起唾液TPP,午餐后2 h唾液TPP、TBA浓度分别为27.1(9.7,50.3)μg/L、32.4(14.0,58.7)μg/L、(18.4±2.3)μmol/L,均高于健康对照组[7.0(5.1,9.1)μg/L、7.4(5.2,9.4)μg/L、(12.6±5.0)μmol/L](P<0.01)。两组晨起唾液TBA浓度差异无统计学意义(P>0.05),GERD各亚组间的TPP、TBA浓度间的差异均无统计学意义(均P>0.05)。午餐后唾液TPP检测的诊断效能中等,当午餐后唾液TPP>41.33 μg/L时,其诊断GERD的敏感性和特异性分别为82.8%、73.3%,而唾液TBA检测无明显诊断效能。结论唾液胃蛋白检测对诊断GERD具有较高的敏感性和特异性,而唾液胆汁酸检测对GERD无明显诊断价值。

  • 标签: 胃食管反流病 唾液 胃蛋白酶 胆汁酸
  • 简介:摘要肝纤维化是慢性肝病向肝硬化进展的一个重要病理过程,也是肝脏对自身损害的一种自我修复反应。肝脏细胞外基质(ECM)的合成与降解之间的动态平衡是维持肝脏不向肝纤维化甚至肝硬化进展的关键,减少ECM的合成或促进其降解是治疗肝纤维化的两个重要环节。因此参与ECM降解的基质金属蛋白-2(MMP-2)在肝纤维化的发生发展及其逆转过程中起着重要作用。

  • 标签: 肝纤维化 基质金属蛋白酶-2 逆转
  • 简介:目的:旨在观察离心运动致骨骼肌损伤后丝氨酸蛋白(Omi)在骨骼肌组织中的表达变化。方法:8周龄雄性SD大鼠36只,随机分为安静对照(n=6)、离心运动2大组(n=30),离心运动组大鼠在跑台上进行一次性离心运动,分别于运动后即刻(E0组,n=6)、运动后12h(E12组,n=6)、运动后24h(E24组,n=6)、运动后48h(E48组,n=6)和运动后72h(E72组,n=6)麻醉大鼠,腹主动脉取血,取比目鱼肌待测;使用荧光酶联免疫吸附法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白-3(Caspase-3)的活性;WesternBlot和Realtime-PCR法分别检测Omi、凋亡抑制蛋白(XIAP)的蛋白表达和基因水平;Co-IP法检测XIAP和Omi的相互结合作用。结果:与对照组相比,离心运动后Caspase-3、Caspase-9活性均明显升高;离心运动后Omi、XIAP的蛋白表达和mRNA水平均明显升高;离心运动能明显增加XIAP和Omi的结合量。结论:离心运动能够激活骨骼肌组织Caspase-9和Caspase-3的活性,诱导Omi和XIAP的表达上调,促进XIAP与Omi相互结合,Omi可能在促使凋亡过程中发挥重要介导作用。

  • 标签: 离心运动 骨骼肌 细胞凋亡 OMI XIAP
  • 简介:摘要目的观察盐酸氨溴羧联合地塞米松、糜蛋白雾化吸入辅助治疗小儿肺炎的疗效。方法将91例肺炎患儿随机分为治疗组与对照组,二组患儿均常规予抗感染、止咳、镇静等综合治疗,治疗组在抗感染等综合的基础上加用盐酸氨溴羧联合地塞米松、糜蛋白雾化吸入,比较二组患儿治疗后临床表现和治愈率。结果治疗组咳嗽、气促、肺部湿罗音消失、平均住院天数与对照组比较均有显著性差异(Pa<0.01)。治疗组痊愈43例(93.4%),对照组痊愈33例(73.3%),二组痊愈率比较有显著性差异,(χ2=6.7056,P=0.0096<0.01)。二组均未见不良反应。结论盐酸氨溴羧联合地塞米松、糜蛋白雾化吸入辅助治疗小儿肺炎安全有效。

  • 标签: 盐酸氨溴羧 地塞米松 糜蛋白酶 肺炎 儿童
  • 简介:目的探讨鼓膜切开灌洗地塞米松及α-糜蛋白治疗分泌性中耳炎(SOM)的临床效果.方法SOM患者120例140病耳,依据随机分组原则将分为治疗组和对照组各70耳,对照组患耳局麻,耳内镜直视下鼓膜在鼓膜紧张部前下或后下象限弧形切开鼓膜2~3mm,抽吸出积液;0.9%氯化钠溶液注入冲洗;观察组切开鼓膜后注入地塞米松针5mg和α-糜蛋白针30mg混合液进行冲洗.结果对两组患者进行随访,时间9个月至3年,平均(13.34±4.56)个月.观察组有效率(92.86%)高于对照组(78.57%)(P<0.05),观察组无明显药物不良反应.结论耳内镜直视下行鼓室镜鼓膜切开术,注入地塞米松针和α-糜蛋白针混合液进行冲洗,是治疗分泌性中耳炎是行之有效的方法.

  • 标签: 分泌性中耳炎 内镜 鼓膜切开 地塞米松 Α-糜蛋白酶
  • 简介:目的比较血清CysC与其他早期肾损害指标,进而评价其在高血压病肾损害的早期预测作用。方法选取34例在我院健康体检正常者和74例高血压病初诊患者。采用免疫放射比浊法测定血清CysC、尿微量白蛋白、尿α1微球蛋白法测定SCr;分别用单因数方差分析比较正常者与原发性高血压组及不同高血压水平亚组各参数指标的差别;并对各参数指标进行pearson相关性分析。结果各参数指标在高血压组均大于正常组;亚组与正常组比较,血压2级以上,血清CvsC(各组数据对数转换后分别为正常对照组:2.923=0.07、高血压病组:2.983=0.14、高血压病1级:2.923=0.07、高血压病2级:2.99±0.10、高血压病3级:3.123=0.17)、尿微量白蛋白、尿α1微球蛋白其值均高于正常对照组;但SCr只有3级高血压才明显高于正常组。相关性分析提示血清CysC与SCr最相关(仁0.8,P〈0.001)。结论血清CysC可作为高血压病早期肾损害的评价指标。

  • 标签: 原发性高血压 肾损害 肮蛋白酶抑制剂C
  • 简介:目的:探查疮灵液对慢性创面肉芽金属蛋白表达的影响及促进创面愈合的部分作用机制。方法:采用大鼠背部创面金黄色葡萄球菌液注射模型,实验分为疮灵液组与对照组,疮灵液组以疮灵液覆盖创面,对照组以生理盐水纱布覆盖创面,隔日换药,术时、术后3d、术后7d、术后14d创面照相测面积,取分泌物测TNF-α、IL-6含量及粒细胞总数,取肉芽测金属蛋白(MMP1、MMP2、MMP9)及其抑制剂(TIMP1)与羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)含量。结果:术后3~14d,疮灵液组创面面积显著小于对照组,具有极显著统计学差异(P〈0.01);疮灵液组创面分泌物中白细胞总数均显著少于对照组,14d时,疮灵液组白细胞总数接近正常;疮灵液组创面分泌物中TNF-α、IL-6含量于术后7d恢复正常,均显著低于对照组;术后3d起,创面肉芽内MMP1、MMP2及MMP9均显著低于对照组(P〈0.01),其中以MMP9表达影响疗效最显著,疮灵液对TIMP1未见明显影响;创灵液组在术后7、14d肉芽中羟脯氨酸含量升高较明显,与对照组相比,有显著性差异。结论:疮灵液能够下调肉芽中金属蛋白含量,抑制慢性创面分泌物炎症因子分泌,并能够调节创面羟脯氨酸含量,从而促进慢性创面愈合。

  • 标签: 疮灵液 慢性创面 炎症因子 金属蛋白酶 胶原
  • 简介:本实验研究制半夏体外抑制基质金属蛋白-16活性的作用及抗肿瘤机理,抑制活性的测定是在反应体系中加入半夏提取物,方法根据抑制MMPs活性后底物降解速率降低的原理

  • 标签: 制夏 基质金属 夏抑制
  • 简介:基质金属蛋白-9(MMP-9,)是MMP家族中的一员,因其能降解细胞外基质和上皮细胞基底膜而广泛参与机体的生理和病理过程。血脑屏障是中枢神经系统(CNS)与外周血液之间的重要屏障。在生理情况下,它能阻止血液中的病原微生物和其他大分子物质进入脑组织,从而保持了脑组织内环境的相对稳定。

  • 标签: 基质金属蛋白酶-9 血脑屏障 结核性脑膜炎 单核-星形胶质细胞网络
  • 简介:背景:目前关于联合应用Caspase抑制剂及Cocktail蛋白抑制剂在胰岛细胞分离纯化过程中对胰岛细胞的影响的研究还较少有报道。目的:比较Caspase抑制剂及Cocktail蛋白抑制剂对胰岛细胞在分离纯化及培养过程中的保护作用。方法:取新生猪,体外分离、纯化和培养猪胰岛,培养24h后分为3组:①空白对照组。②消化时加抑制剂组仅在消化过程中加入Caspase抑制剂及Cocktail蛋白抑制剂。③消化及培养时加抑制剂组在消化及培养的过程中均加入Caspase抑制剂及Cocktail蛋白抑制剂。AO-EB染色定性观察细胞形态及凋亡情况,流式细胞术定量检测细胞活力及凋亡。结果与结论:空白对照组β细胞所占百分比为66.91%,消化时加抑制剂组为84.58%,消化及培养时加抑制剂组为87.15%;空白对照组活细胞、凋亡细胞及死亡细胞的比例分别为56.52%、16.15%、21.25%,消化时加抑制剂组分别为62.27%、14.66%、14.47%,消化及培养时加抑制剂组分比为73.09%、6.83%、10.28%。结果表明,在消化以及体外培养的过程中均加入Caspase抑制剂及Cocktail蛋白抑制剂可明显减少细胞的损失,并且可以增加胰岛β细胞的百分比。

  • 标签: 组织构建 组织工程 胰岛细胞 CASPASE抑制剂 Cocktail蛋白酶抑制剂
  • 简介:[摘要]目的研究胃癌中基质金属蛋白-9和CD105表达的关系。方法选择49例经病理确诊的胃癌患者和20例正常胃组织为研究对象,采用免疫组织化学法检测MMP-9阳性表达率和CD105标记的微血管密度(MVD)。结果胃癌组织MMP-9阳性表达率、血管密度(MVD)明显高于正常胃组织(67.35%vs25.00%,37.69±9.27vs16.22±5.92)(P<0.05);低度分化、浆膜层以外、有淋巴转移胃癌MMP-9、MVD明显高于高+中度分析、未及浆膜层、无淋巴转移胃癌(P<0.05)。结论MMP-9和CD105表达与胃癌的发生、进展密切相关,能预测胃癌的病理分化程度、浸润深度及淋巴结转移情况。

  • 标签: []胃癌 基质金属蛋白酶-9 血管密度