简介：目的构建长链非编冯RNABRE-AS1的慢病毒表达载体。方法利用重叠延伸PCR法构建出BREAS1的全长目的片段，将全长目的片段及慢病毒载体质粒pCDHCMVMC8EF1分别双酶切后进行连接，转化到感受态大肠杆菌后，通过DNA测序鉴定筛选出阳性菌落，提取目的质粒。利用目的质粒制备包装慢病毒，并感染肾细胞癌细胞系OS-RC-2，分别利用荧光显微镜和荧光实时定量PCR检测细胞中BREAS1是否过表达。结果重叠延伸PCR得到正确的BREAS1全长序列，经过双酶切、连接、转化、筛选及I）NA测序，成功构建重组慢病毒载体质粒pCDH-BRE-AS1。通过荧光显微镜检测，几乎昕有经过嘌呤霉素筛选的OSRC2细胞均具有绿色荧光，显示其被重组慢病毒感染；荧光实时定量PCR显示，感染了RNABRE-AS1慢病毒的OSRC2细胞中，BREAS1的表达水平上升了38．5倍。EdU插入实验显示BREASl抑制肾癌细胞的增殖。结论本研究成功构建了BRE-AS1的慢病毒表达载体，并证明BREAS1能抑制肾癌细胞增殖。

简介：乙肝病毒相关性肾炎是常见的继发性肾脏疾病,现代医学对此病尚无有效治疗方案,多以对症治疗为主.中医古医藉中亦无此病名记载,据其临床表现可归属＂黄疸＂＂胁痛＂＂鼓胀＂＂积聚＂等范畴.刘玉宁教授出生于中医世家,幼从其父刘庆国先生学医,后师从肾病名家杜雨茂、叶传蕙、陈以平教授,学贯中西,尤擅创新,在乙肝病毒相关性肾炎中西医结结合冶疗方面具有自己独特的观点和方法,笔者跟随刘师侍诊,现将刘玉宁教授治疗乙肝病毒相关性肾炎的经验介绍如下,以供大家分享.

简介：目的研究国产新型血液灌流器MG150对蛋白结合类毒素晚期糖基化终产物（advancedglycationendproducts,AGEs）和硫酸吲哚酚（indoxylsulfate,IS）的清除效果。方法选择上海长征医院和佛山市第一人民医院长期血液透析（hemodialysis,HD）患者共88例,根据南方医科大学统计研究室提供随机化数据表分配,使用二阶段交叉实验对照研究方法,选用广泛使用的健帆HA130灌流器作为对照,A组患者先使用HA130血液灌流（hemoperfusion,HP）＋HD串联治疗一次,中间经过洗脱期1周,再使用MG150HP串联治疗一次;B组患者先使用MG150HP＋HD串联治疗一次,洗脱期后1周再使用HA130HP＋HD串联治疗。分别在2次治疗前后检测血清AGEs和IS浓度,并记录不良事件发生情况,观察比较新型血液灌流器对蛋白结合类毒素的清除效果及安全性。结果（1）2个医院各入组44例患者;A组（n=44）和B组（n=44）两组患者治疗前除了AGEs[（285.77±107.03）ng/L比（456.89±129.10）ng/L）]和C反应蛋白（C-reactiveprotein,CRP）[（2.67±2.58）mg/L比（6.38±8.83）mg/L）]差异有统计学意义（P均〈0.01）,其他基线资料如性别、年龄、体质量、收缩压、舒张压、尿素清除指数（Kt/V）、β_2微球蛋白（β_2-microglobulin,β_2-MG）、IS、血红蛋白（hemoglobin,Hb）、血白蛋白（albumin,Alb）和肿瘤坏死因子α（tumornecrosisfactor-α,TNF-α）的比较差异均无统计学意义。（2）MG150和HA130HP联合HD治疗2h后血AGEs下降率分别26.0%为4.7%,差异有统计学意义（F=14.323,P〈0.01）;IS的下降率分别为51.7%和9.6%,差异有统计学意义（F=117.247,P〈0.01）;β_2-MG下降率分别14.9%、2.7%,差异有统计学意义（F=45.190,P〈0.01）。（3）共7例发生轻度不良事件,在2种灌流器治疗过程中发生的概率差异无统计学意义。结论使用国产新型血液灌流器MG150HP联合HD治疗能够有效清除蛋白结合类毒素,疗效安全确切

简介：目的：探讨乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV—ON）高尿酸血症的发生情况和影响因素。方法：对227例HBV—GN临床病理资料进行回顾性病例对照研究，运用单因素及多因素方法分析其高尿酸血症发生与临床病理因素的关系。结果：227例HBV—GN患者中高尿酸血症71例，总发生率31．28％，随着eGFR的下降，高尿酸血症发生率逐渐增高。单因素分析发现Scf≥132．6μmol／L、高血压、系膜增生程度、肾小球硬化率、新月体形成者、肾小管间质病变程度等是其危险因素。多因素Logistic回归结果显示Scr水平、肾小管间质病变为HBV—GN高尿酸血症发生的独立影响因素。结论：HBV—GN是继发性高尿酸血症常见的病因之一，其高尿酸血症的发生与血肌酐水平、肾小管间质病变等有关。

简介：对于北美及欧洲的男性，除了非黑色素瘤的皮肤癌外，前列腺癌已经成为了最常见的恶性肿瘤，并且其死亡率也仅次于肺癌^[1-2]。在中国，前列腺癌的发病率也在逐年增高^[3]。对于前列腺癌患者，无论其病灶是局限型或是已出现转移病灶，抑制体内雄激素的水平长期以来一直是主要的治疗方法。

简介：目的:探讨新光量子疗法在干预血透患者慢性炎症反应状态中的效果.方法:随机选择20例终末期肾病(ESRD)维持性血透患者,应用自行设计光量子导管与血透管路连接,在透析过程中对其血液直接进行紫外线的照射治疗,检测治疗前、治疗后1月、治疗后2月C反应蛋白及白介素-6水平.结果:治疗1月后C反应蛋白水平为(4.00±1.73)mg/L明显低于治疗前(6.12±2.76)mg/L,有统计学差异(P<0.01);白介素-6水平治疗后(0.22±0.03)ng/ml,与治疗前(0.22±0.06)ng/ml比较,无统计学差异(P>0.05).治疗2月后白介素-6水平(0.14±0.02)ng/ml也已明显低于治疗前,有统计学差异(P<0.05).结论:新光量子疗法是安全、方便、有效的,联合血透治疗可改善血透患者慢性炎症反应状态,有利于降低终末期肾病患者透析并发症和提高其生活质量,值得在临床推广应用.

简介：目的探讨持续性腹膜透析患者血清铁调素25（hepcidin-25）水平和冠状动脉钙化（coronaryarterycalcification,CAC）及心血管事件的关系.方法选择210例持续性非卧床腹膜透析（continuousambulatoryperitonealdialysis,CAPD）患者血清hepcidin-25的平均值为界,分为CAPD高hepcidin-25组107例、CAPD低hepcidin-25组103例;另选择在本院进行健康体检者90名作为健康对照组.通过酶联免疫法（enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）测定所有CAPD患者和健康对照组血清hepcidin-25水平.对所有入选者进行冠状动脉多层螺旋电子计算机断层扫描成像（multi-slicecomputedtomography,MSCT）钙化评价研究.结果CAPD高hepcidin-25组在随访12个月内发生心血管事件71例次,因心血管事件死亡21例（占19.6%）;而CAPD低hepcidin-25组发生心血管事件27例次,因心血管事件死亡仅10例（占9.7%）.CAPD高hepcidin-25组和CAPD低hepcidin-25组心血管事件发生率比较,差异有统计学意义（P＜0.01）,以上2组无心血管事件生存率无统计学差异（P=0.055）.CAPD患者心血管事件发病率[46.7%（98/210）]与健康对照组心血管事件发病率[5.6%（5/90）]比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.CAPD高hepcidin-25组CAC发病率均明显高于CAPD低hepcidin-25组（P＜0.01）;而且相关性分析显示,hepcidin-25水平与CAC积分呈正相关（r=0.980,P＜0.01）.多元逐步回归分析显示血清hepcidin-25水平[偏回归系数（B）=0.402,P＜0.01]和CAC（B=-0.015,P＜0.01）是CAPD患者心血管事件发生的重要危险因素.结论血清hepcidin-25水平升高及CAC是CAPD患者发生心血管事件的重要原因,提示铁代谢紊乱可能参与,且促进了CAC的发生、发展,并最终导致心血管事件的发生.

简介：目的：探讨改良免疫组化染色法在诊断乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）的应用前景。方法：改良免疫组化染色法采用高温高压＋XXIV型蛋白酶消化的抗原修复法，行一抗和二抗两步孵育法，其中二抗与酶标多聚体相连。病人肾组织标本同时行免疫荧光染色法检测作对照。结果：（1）40例血清学HBsAg阳性患者的肾穿组织标本中，改良免疫组化染色法HBsAg阳性27例，阳性率为67．5％；HBcAg阳性7例（其中HbsAg同时阳性6例，HbsAg阴性1例），阳性率为17．5％；HbsAg、HBcAg同时阴性12例。免疫荧光染色法HBsAg阳性29例（72．5％）；HBcAg阳性10例（25．0％，均同时呈HbsAg阳性）；HbsAg、HBcAg同时阴性11例。（2）两种染色比较，HbsAg阳性率相近（改良组化67．5％VS荧光72．5％），其中同时阳性的有22例，同时阴性的5例，总一致率为67．5％（27／40），阳性一致率在改良免疫组化染色中为81．5％（22／27），在免疫荧光染色中为75．9％（22／29）。（3）10例血清丙氨酸转氨酶升高的患者中，改良免疫组化HbsAg染色阳性9例，免疫荧光染色阳性7例；血白蛋白〈30g／L而尿Pro定量未达到〉3．5g／24h的患者7例；6例病理呈膜性或／和膜增殖性肾炎（其中改良组化染色阳性5例，荧光染色阳性3例）。有2例行肝组织穿刺活检，病理显示肝脏病变。结论：改良免疫组化染色可提高HBV-GN的乙肝抗原检测率，有临床应用推广价值。

简介：经皮肾镜碎石术（percutaneousnephrolithotomy,PCNL）最大的技术挑战在于精确穿刺,需要将穿刺针精确置入肾脏集合系统,并建立理想的工作通道。目前主流的穿刺引导方式包括：射线引导、超声引导。该两种方式均有各自弊端,临床上需要一种更加安全、易掌握的穿刺辅助技术。

简介：目的探讨腺病毒介导的白介素-24（IL-24）基因转移对脂多糖（LPS）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（GMC）增生的抑制作用。方法构建携带IL-24基因的复制缺陷型腺病毒载体（Ad．IL-24）和携带绿色荧光蛋白的对照载体（Ad．GFP），在293细胞中扩增，5％FCS／DMEM中分组培养GMC，转染Ad．IL-24或Ad．GFP，加或不加LPS（10mg／L），分别用RT-PCR和ELISA检测IL-24mRNA和蛋白的表达；MTT（四甲基偶氮唑蓝法）和流式细胞术检测系膜细胞增生活性。结果培养GMC及LPS激活的GMC均未见IL-24表达。AdIL-24感染GMC后4～48hIL-24mRNA有稳定表达，培养上清IL-24含量在24和48h分别为（79．00±3．61）μg／L和（98．00±2．00）μg／L。感染AdIL-24对系膜细胞增生无影响，但可显著抑制LPS诱导的GMC增生。结论外源性IL-24基因转移可有效抑制LPS诱导的系膜细胞增生，Ad．IL-24有可能成为一种针对GMC增生的基因治疗方法。

简介：目的探讨腺病毒介导的野生型p53在前列腺癌基因治疗中的可能性及其机制.方法培养前列腺癌细胞系PC3M,转染腺病毒介导的野生型p53,检测其增殖和凋亡水平变化,并检测其bax蛋白及mRNA水平.结果腺病毒介导的野生型p53可高水平地转染入PC3M细胞,转染后的PC3M细胞增殖受到抑制、凋亡水平增高,细胞中bax蛋白及mRNA水平皆增高.结论腺病毒介导的野生型p53可抑制PC3M细胞增殖并促进其细胞凋亡.其促进凋亡的机制可能是通过促进bax表达而实现的.

简介：肾病综合征并发肺结核、乙型病毒性肝炎,三者在发病机制、病情发展上错综复杂,可相互影响致病情加重危及患者生命。但在治疗上有矛盾之处,处理棘手,值得临床进一步探讨。现报告我院收治1例肾病综合征并发急性粟粒型肺结核及慢性乙型病毒性肝炎,给以中西医结合治疗及观察其疗效和安全性,为临床治疗此类复杂病例提供更多的论据。病例患者,55岁,女性,因＂双下肢水6月,伴多汗、咳嗽、乏力2周＂入院。

简介：高磷血症是慢性肾脏病（CKD）透析患者最常见的并发症之一,与患者心血管疾病和临床不良预后密切相关,使用磷结合剂是治疗高磷血症的一项重要措施。目前临床常用磷结合剂包括传统含铝、含钙磷结合剂和新型非钙非铝磷结合剂。近年来多项证据显示,含钙磷结合剂的使用与CKD患者不良临床预后相关。

简介：目的以Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌细胞系T24细胞，观察其对T24细胞侵袭能力的影响。方法Ad-Surp-LRIG1转染T24细胞，用RT-PCR和Westernblot检测细胞中LRIG1的表达水平，并采用Transwel!小室测定转染后细胞侵袭能力的变化。结果Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌T24细胞后，与对照组和空白对照组相比，体外侵袭实验显示实验组细胞的侵袭能力明显下降。LRIG1的mRNA和蛋白表达水平明显升高，而EGFR的mRNA和蛋白表达水平则显著降低（P〈0．01）。结论Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1能够在T24细胞中有效表达，并显著抑制T24细胞的侵袭能力。

简介：目的构建并鉴定逆转录病毒介导的Ku80基因RNA干扰表达体系,并建立稳定、高效、长久低表达Ku80的人肾癌786-O细胞株.方法针对Ku80基因,设计并合成3对特异性RNA干扰靶序列,退火形成双链DNA,与BglⅡ和HindⅢ双酶切后的pSUPERretro-puro载体连接,构建pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,并对重组载体进行测序鉴定.筛选出基因沉默效应最强的干扰序列后使用磷酸钙法共转染293FT细胞,产生的病毒颗粒随后感染786-O细胞,经嘌呤霉素筛选得到阳性克隆.用RT-PCR检测Ku80基因mRNA表达,Westernblot测定转染后786-O细胞中Ku80蛋白的表达量,以鉴定稳定细胞株.结果测序结果证实目的片断正确插入pSUPERretro-puro表达载体中,成功构建了pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,稳定转染干扰表达载体的786-O细胞Ku80基因的表达显著降低.结论成功构建了抑制Ku80基因表达的逆转录病毒载体,并获得Ku基因稳定干扰的人肾癌786-O细胞株,为下一步利用小干扰RNA技术研究肾癌的基因治疗奠定了基础.