简介：摘要目的人类OTX2基因编码区有1个高度保守的同源结构域（38-l00aa），光间受体视黄类物质结合蛋白IRBP受OTX2调控1，拟初步探讨OTX2保守编码区的63位和72位氨基酸定点突变对下游基因IRBP启动子的影响。方法本研究在otx2的高度保守域构建突变型OTX2表达载体，根据转染质粒类型分为PGL3野生型组、PGL突变型组、PGL3-basic组，检测下游基因IRBP启动子区载体的荧光素酶活性。结果野生型OTX2可使IRBP转录活性提高，3种突变型OTX2则降低了IRBP的启动子转录活性（P<0.05）。与野生型OTX2相比，p.Pro63Gly和p.Leu72Thr均使下游基因转录活性下降，但差异无统计学意义（P>0．05）。结论文献已报道的2种OTX2突变显著降低了IRBP启动子的转录活性；63位及72位氨基酸定点突变对IRBP启动子转录活性无影响。

简介：

简介：目的探索盐酸埃克替尼单药治疗晚期EGFR突变非小细胞肺癌合并多发脑转移患者的疗效。方法选取我院门诊2013年7月至2017年6月期间收治的非小细胞肺癌脑转移患者22例,回顾性分析其接受盐酸埃克替尼单药口服的疗效。结果22例非小细胞肺癌脑转移患者接受盐酸埃克替尼单药的总体中位无进展生存期（progression-freesurvival,PFS）为13.0个月（95%CI11.87～14.13）,肿瘤缓解率（objectiveresponserate,ORR）和疾病控制率（diseasecontrolrate,DCR）分别为40.9%和100%。根据性别、吸烟史、脑转移症状、EGFR突变亚型、既往治疗情况对所有患者进行PFS和ORR的分析结果显示,以上临床特征对脑转移患者的PFS和ORR无显著影响。结论盐酸埃克替尼单药治疗晚期EGFR突变肺腺癌脑转移具有较好的疗效。

简介：目的利用根癌农杆菌介导的基因转化定点插入突变几丁质合成酶chsC基因,实现基因失活而构建几丁质合成酶chsC基因缺失烟曲霉突变体。方法构建根癌农杆菌二元载体pDHt/SK,利用根癌农杆菌介导的转化插入突变烟曲霉几丁质合成酶chsC基因,用潮霉素抗性基因筛选转化子,并进行实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）鉴定。结果潮霉素抗性基因通过同源重组成功插入烟曲霉基因组中;经RT-PCR鉴定,烟曲霉几丁质合成酶基因chsC表达失活。结论利用根癌农杆菌介导的基因转化可以定点插入突变并失活目的基因,此方法有可能成为烟曲霉基因转化和功能基因组研究的有力工具。

简介：摘要目的探讨对EGFR基因突变型非小细胞肺癌治疗时使用埃克替尼的治疗效果。方法回顾性分析2017年7月-2019年7月内，选择48例我院收治的非小细胞肺癌患者，经过验证均为EGFR基因突变型，将患者按照突变类型分为3组，每组各16例患者，外显子21L858R突变的为A组，外显子20T790M突变的为B组，外显子19缺失的为C组，3组均使用埃克替尼治疗，分析3组的治疗效果，不良反应。结果B组治疗效果比A、C两组差（P<0.05），A组和C组的治疗效果没有明显差异（P>0.05），3组不良反应没有明显差异（P>0.05）。结论非小细胞肺癌治疗时使用埃克替尼，对外显子21L858R突变和外显子19缺失两种EGFR基因突变型的效果较好，并且不良反应少，更为安全可靠，临床可应用推广。

简介：目的研究乙型肝炎病毒(HBV)基因分型与前C基因及基本核心启动子(BCP)突变,为临床优化乙型肝炎治疗方案提供决策依据。方法征集98例未接受过抗病毒治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者为研究对象。通过乙肝表面抗原(HBsAg)基因测序进行基因分型。同时对前C基因及BCP进行测序分析。结果研究对象中HBV基因分型为:A:11例(11.2%);B:20例(20.4%);C:56例(57.1%);D:8例(8.2%);B/C混合型:3例(3.1%)。与其他基因型相比较,基因B和C型的患病率较高。基因型C的前C基因突变率为46.9%(46/98),较其他基因型的高,差异具有统计学意义(χ2=47.85,P<0.01);基因型C的BCP突变率为41.8%(41/98),较其他基因型的高,差异具有统计学意义(χ2=67.14,P<0.01)。结论HBV基因分型以B、C基因为主。基因型C与BCP和前C基因突变密切相关。

简介：摘要目的探讨一个中国视网膜色素变性-感音神经性耳聋综合征家系的致病基因及其突变位点。方法在签署知情同意书后，对该家系先证者及父母进行病史收集、常规查体、视野检查及视网膜电图检查。采集家系成员静脉血，提取基因组DNA、全外显子组测序、生物信息数据分析和Sanger测序验证突变位点。结果该家系有1例患者，表现为青少年时期发病，视野渐进性变窄，周边视力受损，听力受损，耳聋，视网膜现色素沉着，mfERG显示a波、b波振幅下降。患者父母均正常，为杂合突变携带者，符合常染色体隐性遗传模式特征。外显子组测序、数据过滤和Sanger测序验证发现在MYO7A基因上存在两个突变位点NM_001127180，c.3695_3705del，p.R1232fs和NM_001127180，c.6234＋5G>A。在1000例健康人对照中没有发现该两个突变。结论本研究发现MYO7A致病基因上两个新的突变位点，扩大了MYO7A致病突变谱，为临床诊治提供了新靶点。

简介：摘要目的探讨锌指蛋白Rnf44上Ring-锌指结构突变297Gln>Arg与小鼠行为能力的关系。方法在小鼠Rnf44基因中Ring-锌指结构编码区寻找突变；在21种品系共398只小鼠中采用旷场实验、高架十字迷宫实验检测小鼠活性、焦虑状态、探索功能及运动功能等行为能力；并分析该基因突变与小鼠行为能力间的关联。结果在小鼠Rnf44基因中Ring-锌指结构编码区寻找到突变297gln>Arg，携带297Arg突变的小鼠活性及运动功能下降（旷场实验及高架十字迷宫实验的1-5min运动距离减少），而更易产生焦虑状态（高架十字迷宫试验的粪便颗粒数增加）（以上P值均<0.05）。但297Arg突变不影响小鼠探索功能（停留在高架十字迷宫中央区时间无改变，P>0.05）。结论Rnf44蛋白上关键活性基团Ring-锌指结构的突变297Gln>Arg与小鼠活性、焦虑状态及运动功能等行为能力改变有关，与小鼠探索功能无关。

简介：摘要目的通过对山东省威海地区一个遗传性截瘫家系进行了定位和基因突变的临床特点及遗传方式分析，确定该病的遗传类型及其发生机制。方法经家系调查及临床检查确定疾病类型；通过致病基因微卫星多态位点进行连锁分析。结果该家系的遗传性痉挛性截瘫常染色体显性遗传发现该家系中患者在SPAST基因第15外显子存在一个14bp的缺失突变。结论遗传性痉挛性截瘫家系致病的突变为位于SPG4基因第15外显子的一个14bp的缺失突变所致。

简介：摘要目的探讨缺氧环境下川芎嗪对体外培养的人肝癌HepG2细胞突变型p53蛋白表达的影响。方法用氯化钴(CoCl2)创造缺氧微环境，设常氧组、缺氧组及缺氧加药物组，用免疫细胞化学法观察川芎嗪作用HepG2细胞48h后突变型p53蛋白表达的影响。结果常氧环境下突变型p53蛋白呈弱阳性表达，缺氧诱导48小时后突变型p53蛋白表达显著升高（t=283.42，P<0.05），缺氧环境下川芎嗪能抑制突变型p53蛋白的表达（t=407.63，P<0.05）。结论缺氧环境下川芎嗪能抑制突变型p53蛋白的表达。

简介：摘要目的分析门诊乙肝患者和经拉米夫定治疗后乙肝患者在基因分型、HBVP区耐药突变方面的区别。方法选取120例乙肝患者作为研究对象，其中60例有过拉米夫定治疗史，纳入A组，60例未接受过拉米夫定治疗，纳入B组，对两组患者的HBVP区耐药突点、HBV分型进行检测、比较。结果两组患者的HBV基因分型（B型、C型、D型、其他型）比较，差异均不具有统计学意义，P>0.05；A组中，有26例的突变株存在于拉米夫定位点，占43.3%，B组有6例的突变株存在于拉米夫定位点，占10.0%，组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论接受过拉米夫定治疗的乙肝患者，多存在拉米夫定耐药株，未接受过治疗的乙肝患者也需实施耐药检测，以便为临床诊断、治疗提供指导依据。

简介：目的建立PCR-RFLP方法对三带喙库蚊钠通道基因L1014F(TTA-TTT)突变进行快速检测与分型。方法根据三带喙库蚊钠通道基因DNA序列,合成PCR引物,在上游引物3’端第二个碱基引入突变位点'C',构建酶切位点,扩增后对PCR产物酶切,在电泳结果读取分型结果并统计基因频率与基因型频率。结果建立的PCR-RFLP方法能够对三带喙库蚊钠通道基因L1014F突变进行快速检测与分型,灵敏度和特异度均达到98%以上。结论本研究建立的PCR-RFLP方法灵敏度和特异度较高,实现了对三带喙库蚊钠通道L1014F(TTA-TTT)突变的快速分型,可以推广使用。

简介：目的基于焦磷酸测序技术建立甲型H1N1流感病毒血凝素（HA）基因裂解位点突变的快速检测方法．探讨其临床应用价值。方法采用RT-PCR扩增甲型H1N1病毒血凝素基因中的HA片段．在生物信息学分析的基础上，针对甲型H1N1病毒血凝素基因含有裂解位点序列片段．分别设计一套生物素标记的PCR引物和测序引物．运用焦磷酸测序技术对含甲型H1N1病毒裂解位点基因片段进行序列测定，同时分析青岛地区甲型H1N1流感病毒流行株的裂解位点基因特征。结果建立了基于焦磷酸测序技术检测甲型H1N1流感病毒裂解位点突变方法．实现甲型H1N1流感病毒HA基因裂解位点的高通量检测，青岛地区甲型H1N1流感病毒裂解位点344氨基酸序列没有发生变异。结论本研究所建立的方法具有自动化程度高和结果准确等特点，适用于甲型H1N1流感病毒裂解位点进行快速高通量检测。

简介：目的了解云南省德宏州艾滋病患者抗病毒治疗后艾滋病病毒（humanimmunodeficiencyvirus,HIV）耐药发生率及其影响因素。方法根据WHO推荐的HIV耐药警戒线调查方法,于2009年、2010年对德宏州陇川县参加抗病毒治疗的250例艾滋病患者进行HIV耐药基因突变检测研究。结果250例患者在2009年的监测中有11名患者出现耐药,人群总耐药率为4.4%。2009年检测没有发生耐药而2010年参加随访调查的221名患者中新发生了7例耐药,新发HIV耐药率3.2%。所有发生耐药的患者均对非核苷类逆转录酶抑制剂（non-nucleotidereversetranscriptaseinhibitors,NNRTI）耐药,但没有患者对蛋白酶抑制剂（proteaseinhibitors,PI）耐药。2009年和2010年两年监测血浆HIV病毒载量（viralload,VL）≥1000拷贝/ml的患者中发生耐药的比例分别为55.0%（11/20）和84.6%（11/13）。单因素COX回归分析显示,最近1个月有饮酒史的患者HIV耐药发生率高于无饮酒史者,但多因素COX回归分析未显示两者间存在关联。此外,对两次调查中VL≥1000拷贝/ml的全部28名患者进行HIV病毒亚型测定,共发现5个HIV病毒亚型,其中C亚型10例（35.7%）、B亚型10例（35.7%）、CRF08_BC4例（14.3%）、CRF01_AE3例（10.7%）、CRF29_BF1例（3.6%）。结论德宏州接受抗病毒治疗、血浆HIV病毒载量在1000拷贝/ml以上的艾滋病患者中HIV耐药率高,HIV耐药发生可能与患者饮酒习惯有关。

简介： 【摘要】目的：探究慢性淋巴细胞白血病患者CD49d表达模式与分子遗传学和热点基因突变的相关性。方法：借助流式细胞检测技术检测慢性淋巴细胞白血病患者（n=100）的CD49d表达模式，将单双峰、阴性与阳性家出结果作为分组依据，经荧光杂交技术行分子遗传学分析，对其基因突变情况进行检测。结果：慢性淋巴细胞白血病患者中，阳性检出构成比为23.00%（23/100），阴性检出构成比为76.00（76/100），单峰检出患者构成比为53.00%（53/100），双峰检出患者构成比为46.00%（46/100）。与阴性检出患者相较，阳性检出患者的Rai分期更高（P<0.05），脾脏增高比例更大（P<0.05）。双峰、阴性检出患者得11q22-发生构成比与单峰、阴性检出患者相较更高（P<0.05）。单峰检出+12的构成比与双峰组相较更高（P<0.05），单峰、阳性检出+12的构成比与双峰、阴性检出结果的患者相较构成比更高（P<0.05）。阳性检出组BIRC3的突变构成比与阴性检出组相较更高（P<0.05）。结论：CD49d与11q22、+12以及BIRC3的基因突变率之间的相关性较显著且与患者预后关系密切。

简介：摘要目的探讨HM7和HT29两种细胞间存在放射敏感性差别的机制。方法应用RT-PCR方法获得HM7、HT29中毛细血管扩张性共济失调症突变基因（Ataxiatelangiectasia-mutatedgene，ATMgene）编码序列主要功能区PI3K区（8577nt-9122nt）546bp片段，经荧光标记ddNTPs循环测序法进行突变检测。结果在HM7和HT29的细胞株中，均未发现ATM/PI3K区域的序列突变。结论在HM7和HT29两种大肠癌细胞株间的放射敏感性的差别是由我们所测的ATM/PI3K区域序列突变之外的因素引起。

简介：目的:探讨JAK2V617F、DNMT3A、NPM1和FLT3-ITD基因突变与骨髓增殖性肿瘤(MPN)预后的相关性。方法:收集80例MPN患者外周血及骨髓标本,根据核型分析结果将其分为预后良好组(36例)、中度风险组(22例)及不良风险组(22例)。所有患者行细胞遗传学及染色体核型分析,使用下一代测序(NGS)技术检测与MPN发病相关的JAK2V617F、DNMT3A、NPM1及FLT3-ITD等基因。对患者均随访3年,统计其生存期,分析JAK2V617F、DNMT3A、NPM1和FLT3-ITD基因突变与MPN预后的相关性。结果:80例MPN患者中有73例(占91%)至少发生1个基因突变,多基因(≥2)突变占61%。JAK2V617F在MPN亚型PV、ET及PMF中阳性突变率分别为89.47%、74.19%和50%;DNMT3A、NPM1和FLT3-ITD存在很低突变率,但在慢性髓细胞白血病(CML)中存在较高阳性突变率。CML中仅检测到1例JAK2V617F基因突变。JAK2V617F、DNMT3A、NPM1和FLT3-ITD基因突变阳性与阴性患者总体生存期比较均无差异,与MPN患者预后无明显相关性。MPN亚型病例中,JAK2V617F阳性PMF患者同时伴NPM1基因突变的患者与其他突变类型比较,中位生存期明显短于其他突变类型患者,差异均有统计学意义(t=11.086,P<0.05);CML中度风险组中,FLT3-ITD同时伴NPM1或DNMT3A突变,与其他组比较,差异均有统计学意义(t=9.637,P<0.05)。结论:JAK2V617F突变在MPN患者中存在较高突变率,但与预后无关;在JAK2V617F阳性同时伴NPM1基因突变的PMF患者中,转为白血病存在较高概率,且预后不良。DNMT3A、NPM1和FLT3-ITD在MPN患者PV、ET及PMF亚型中突变率低,但在CML患者中NPM1和FLT3-ITD存在较高突变率;FLT3-ITD同时伴NPM1或DNMT3A突变,且预后不良。在中度风险组患者中可产生预后效应。