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  • 简介:人都到齐了,家人们聊了一会儿后,小姨说:“我们开个联欢会吧?”大家都同意了,妈妈和姥姥去准备午饭,我们其他人就开始联欢了。首先是唱

  • 标签: 中秋 联欢 同意 准备 开始 跳舞
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  • 简介:榴树花开映颊红,村姑早起割菖蓬。一挑艾草长如竹,分与邻居插绮栊。山山岭岭栗花香,飘入农家拌菜汤。粽子麻花刚上席,小猫追逐欲先尝。

  • 标签: 诗词 文学 文学作品 诗集
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  • 简介:新年呀咚咚咚咚呛,喜洋洋呀咚咚咚咚呛,鞭炮声声噼里啪啦响,长的唢呐呜爨哇啦吹,短的喇叭嘀哩嘀哩唱,红火火的新年来到了。

  • 标签: 中小学 音乐教育 歌词 艺术作品
  • 简介:<正>五月初五端午节,有挂艾叶、赛龙舟、吃粽子、砸鸡蛋……其中,我印象最深的是包粽子。端午节的前两天,妈妈就开始包粽子了。她准备了新鲜的粽叶,一大盆调好酱油的糯米,还有香喷喷的肉馅。妈妈首先要把粽叶洗干净,在热水中泡软。再准备好枣子、鸡蛋、肉等做馅,将自己喜欢的馅煮得香喷喷的,就可以开工了。先把长长的粽叶折成漏斗形,抓一些糯米,均匀地铺在底下。然后夹一块肉馅,放在中间,接着又铺上一层糯米,叠上粽叶的尾巴,最后把粽叶包着的粽子做成四角的形

  • 标签: 吃粽子 漏斗形 张丽华 点金
  • 简介:鼹鼠皮皮、豆豆跟着妈妈去超市。“超市就在对面,我们从这里过去吧。”皮皮拉着妈妈的手就想跑。刚说完,一辆车“嗖”地一下冲过来,吓得皮皮半天没敢说话。

  • 标签: 幼儿 教材 交通安全教育 教育方法
  • 简介:过年啦,过年啦,小朋友们都换上了漂亮的衣服,放起了美丽的烟花,他们的脸上挂满了新年的笑容。瞧,月亮和星星在看着他们笑呢!

  • 标签: 小学 作文 《过新年》 刘丽敏
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  • 简介:风,猛烈地拍打着路旁的树,雨覆上了脚踝。两旁的路灯伴着街上的一个孤独人影。大雨肆虐,而那个影子却无动于衷。我不知道人的一生会遇见多少人,也不知道我们会与多少人成为知己,但我知道,在我的金钗之年,我只有她,那个已经被我亲手推开了的朋友……她不善言辞,喜欢低着头,坐在角落里像一个小学生。

  • 标签: 小学生 影子
  • 简介:<正>一年中,我最喜欢的节日就是端午节了。端午节又叫'端阳节''重五节'等,是农历的五月初五。'端'是'开端''初'的意思。说是五月初五,其实从五月初一开始便拉开了端午节的序幕。从初一开始,家家户户都开始忙碌起来,准备端午节的用品,其中最让人眼馋的自然要属端午节的美食了。我最感兴趣的还是那玲珑可爱的粽子。我家的粽子有两种口味,咸味的和甜味的。我对肉粽子不感兴趣,对里面有枣子的糯米粽特别喜爱。虽然我妈妈包粽子的原料极其简单,就是糯米和红枣,但是包出来的粽子却是

  • 标签: 重五节 这一天 开开心心 张丽华 吃粽子
  • 简介:【摘要】:

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  • 简介:目的:构建汉滩病毒包膜糖蛋白基因的真核表达载体,并加入可增强免疫应答效应的细胞因子CD40L基因,检测其可否在真核细胞中表达。方法与结果:参照GenBank中汉滩病毒M基因和小鼠CD40L的全基因序列设计引物,通过聚合酶链反应(PCR)获得M和CD40L基因片段,将其与pCI—neo载体相连,测序证实该载体构建成功后,将此真核表达载体以脂质体转染法转染至哺乳动物细胞CHO—K1中,利用间接免疫荧光法(IFA)检测发现M基因和CD40L基因可以同时表达于CHO-K1细胞中。结论:构建了带有CD40L基因的汉滩病毒包膜糖蛋白重组质粒并获得表达,为深入研究汉滩病毒感染后包膜糖蛋白引起的特异性免疫应答规律奠定了实验基础。

  • 标签: 汉滩病毒 包膜糖蛋白 CD40L
  • 简介:鉴定合成的或通过高通量随机组合方法获得的潜在功能片段的生物学功能需要一套高效便捷的酵母表达专用载体。酵母表达载体pYES2多克隆位点处不含起始密码子,通过设计含有ATG和EcoRⅠ酶切位点的特异性引物扩增一段Intron,利用In-Fusion重组技术(Clontech)将该片段构建至酵母表达载体pYES2,得到一个含有ATG的重组酵母表达载体pYES2-ATG。为了检测该载体的功能,扩增不含起始密码子的DNA序列nlea,该序列由本实验室设计合成,具有潜在的耐盐功能。构建重组表达载体pYES2-ATG-nlea在酵母中进行功能鉴定。研究结果表明,半乳糖诱导后,含pYES2-ATG-nlea的重组酵母菌株耐盐能力明显高于含pYES2-ATG空质粒的菌株,表明在该载体系统上的添加了起始密码子的nlea成功表达,具有一定的耐盐性,同时也证明改造的载体系统可用于没有起始密码子的编码区序列的功能筛选和鉴定。pYES2-ATG酵母载体系统不影响原始载体基本功能元件的表达,同时能使不含起始密码子编码区序列在酵母中正常表达,在大规模进行多个基因的功能鉴定中具有重要的应用价值。

  • 标签: 起始密码子 酿酒酵母 pYES2 In-Fusion重组技术
  • 简介:目的构建超抗原SEA和喉癌来源的MAGE-A3基因共表达的真核表达载体,检测、鉴定其在293T细胞中的表达.方法分别用RT-PCR方法及人工化学合成法获得MAGE-A3和SEA基因片段,然后依次将MAGE-A3和SEA基因克隆至含内部核糖体进入位点的真核表达载体IRES序列的上、下游,构建成重组质粒pMAGEA3-IRES-SEA.经脂质体转染至293T细胞以后,用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别鉴定SEA、MAGE-A3基因的表达.结果限制性内切酶酶切分析证实MAGE-A3基因和SEA基因均正确地克隆在pMAGEA3-IRES-SEA中,基因测序结果与GenBank公布的MAGE-A3、SEA序列完全一致,实现了双基因的正确重组.重组质粒转染293T细胞后能检测到MAGE-A3、SEA基因的高水平表达.结论成功地构建了pMAGEA3-IRES-SEA真核表达质粒,并能在293T细胞中有效表达MAGE-A3和SEA蛋白,由此奠定了其作为抗喉癌DNA疫苗应用的基础.

  • 标签: 葡萄球菌类毒素 超抗原 喉肿瘤 真核载体 基因克隆 MAGE-A3
  • 简介:目的构建人源性Notch1胞内段(NICD)真核表达载体pIRES2-EGFP—NICD,并观察其在真核细胞中的表达。方法通过反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)从人脑胶质母细胞瘤细胞系U251细胞中获得编码NICD的cDNA,定向克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP;经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内NICD的表达。结果构建了真核表达载体pIRES2-EGFP—NICD,将其转染HeLa细胞72h后,蛋白免疫印迹法检测到细胞内NICD的表达显著增高。结论成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP—NICD,为研究Notch信号通路在人脑胶质细胞瘤发生发展中的作用机制奠定了基础。

  • 标签: NOTCH信号 胶质细胞瘤 真核表达
  • 简介:摘要昆虫杆状病毒表达载体系统是基于昆虫杆状病毒及其宿主细胞建立的真核表达体系,具有安全性高、重组蛋白表达水平高、能同时表达多个基因,可对重组蛋白进行正确折叠和翻译后修饰等优势,主要应用于预防性及治疗性疫苗和基因治疗药物的研发及生产。本文对该载体系统的关键技术及应用进展作一综述。

  • 标签: 昆虫细胞 杆状病毒 培养工艺 重组蛋白 基因治疗