简介：摘要目的结合生物信息学分析结果研究死亡蛋白相关激酶2(DAPK2)在肺纤维化中的作用及分子机制。方法从GEO数据库下载特发性肺纤维化(IPF)数据集GSE150910进行自噬相关基因的差异表达分析，利用极端梯度提升法筛选出关键基因。用t分布随机邻域嵌入法在单细胞测序数据集GSE135893中验证关键基因在细胞中的表达，采用Kaplan-Meier法在GSE28221和GSE93606数据集中绘制DAPK2高、低表达组患者的生存曲线。将12只6~8周龄的C57BL/6小鼠随机分为对照组和实验组，每组6只，实验组小鼠气管内滴注博来霉素构建肺纤维化模型，取小鼠肺组织进行Masson染色、免疫组织化学染色和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测DAPK2的蛋白和mRNA表达水平。将人肺成纤维细胞分为空载体慢病毒组、转化生长因子β1(TGF-β1)组、空载体慢病毒+TGF-β1组、过表达DAPK2慢病毒+TGF-β1组，应用蛋白质印迹法检测各组自噬相关蛋白以及Ⅰ型胶原蛋白(Collage Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Collage Ⅲ)的表达，并应用MDC染色检测各组细胞的自噬小体所占比例。结果GSE150910数据集中筛选出32个差异表达的衰老相关基因，其中8个上调，24个下调。极端梯度提升法筛选出关键自噬相关基因DAPK2。单细胞测序分析提示DAPK2主要表达于肺成纤维细胞中，且在IPF患者肺组织内成纤维细胞的表达量低于正常肺组织(P<0.05)；高表达DAPK2的IPF患者总体生存时间较低表达DAPK2的IPF患者更长(P<0.05)。Masson染色提示小鼠肺纤维化模型造模成功，RT-qPCR及免疫组织化学染色结果提示DAPK2在博来霉素诱导的小鼠肺纤维化组织中为低表达(P值均<0.05)。与TGF-β1组和空载体慢病毒+TGF-β1组比较，过表达DAPK2慢病毒+TGF-β1组细胞中的LC3Ⅱ和Beclin 1蛋白表达水平升高，而哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、Collage Ⅰ、Collage Ⅲ降低(P值均<0.05)；自噬相关蛋白及Collage Ⅰ、Collage Ⅲ在TGF-β1组和空载体慢病毒+TGF-β1组间差异均无统计学意义(P值均>0.05)。MDC染色结果提示过表达DAPK慢病毒+TGF-β1组细胞内绿色点状荧光亮度明显增强，荧光斑点的数目也增多。结论DAPK2在博来霉素诱导的小鼠肺纤维化组织内呈低表达，过表达DAPK2可以促进细胞自噬减轻TGF-β1诱导的肺成纤维细胞分泌胶原蛋白，从而抑制肺纤维化的进展。

简介：摘要目的探究RPL34-AS1对卵巢癌细胞增殖、迁移的影响及其作用机制。方法取对数生长期SKOV3细胞用无血清培养基同步化12 h，将pcDNA、pcDNA-RPL34-AS1、si-NC、si-RPL34-AS1、anti-miR-NC、anti-miR-575转染至SKOV3细胞中，分别记为pcDNA组、pcDNA-RPL34-AS1组、si-NC组、si-RPL34-AS1组、anti-miR-NC组、anti-miR-575组；将pcDNA-RPL34-AS1与miR-NC、miR-575分别共转染至SKOV3细胞中，记为pcDNA-RPL34-AS1+miR-NC组、pcDNA-RPL34-AS1+miR-575组。实时荧光定量PCR （RT-qPCR）检测临床组织标本及转染后各组细胞中RPL34-AS1和miR-575的表达水平；双荧光素酶报告实验检测RPL34-AS1和miR-575的靶向关系；四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞存活率；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹（Western blot）法检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A （p21）、B细胞淋巴瘤/白血病-2 （Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果与癌旁组织相比，卵巢癌组织中RPL34-AS1表达水平降低（1.00±0.08比0.47±0.05），miR-575表达水平升高（1.01±0.07比3.12±0.28）（P < 0.05）。转染si-RPL34-AS1后，细胞活性升高（48 h：0.68±0.06比0.55±0.05；72 h：0.99±0.08比0.71±0.06），G1期细胞所占比例降低（13.42±1.38比32.15±2.11），S期细胞所占比例升高（53.75±5.22比34.69±3.41），细胞凋亡率降低（4.31±0.42比9.25±0.91），CyclinD1、Bcl-2表达水平升高（0.92±0.08比0.71±0.07；0.86±0.07比0.61±0.06），p21、Bax表达水平降低（0.13±0.02比0.29±0.03；0.19±0.02比0.31±0.03） （P均< 0.05）。RPL34-AS1靶向调控miR-575，过表达RPL34-AS1或抑制miR-575后可抑制细胞活性，阻滞细胞周期和促进细胞凋亡。miR-575过表达逆转了RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制和凋亡促进的作用。结论过表达RPL34-AS1可抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖，促进细胞凋亡，其机制可能与下调miR-575有关。

简介：摘要目的探讨IκB激酶(IKK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对Myc过表达诱导的小鼠原发性肝癌发生发展的影响。方法利用转基因小鼠将LAP-tTA小鼠与Alb-cre小鼠杂交，再与NEMOf1(NEMO为NF-κB必需调节蛋白)小鼠杂交，以产生LAP-tTA＋/Alb-cre＋/NEMOfl/wt小鼠，最后与tetO-Myc＋小鼠杂交。本实验包括4组：(1)WT小鼠；(2)NEMOΔLPC小鼠(肝细胞中NEMO敲除，无Myc过表达)；(3)MycLAP-tTA小鼠(Myc过表达，无NEMO敲除)；(4)MycLAP-tTA/NEMOΔLPC小鼠(肝脏Myc过表达和NEMO敲除)。记录小鼠的生存曲线，观察肝脏大体形态。苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理结构，免疫组织化学染色、蛋白质印迹法(Western blot)检测肝脏肿瘤指标及肝祖细胞指标、定量聚合酶链反应(qPCR)方法检测相关蛋白的mRNA水平。使用t检验比较独立样本组与相应组。结果小鼠带瘤生存曲线显示MycLAP-tTA/NEMOΔLPC小鼠中位生存期明显短于MycLAP-tTA小鼠(中位生存期M/P50 56 d比83 d，P<0.01)；MycLAP-tTA/NEMOΔLPC小鼠对比MycLAP-tTA小鼠，谷草转氨酶[(739.40±35.61) U/L比(441.50±78.79) U/L，t＝2.464，P<0.05]、碱性磷酸酶[(3 142.0±287.6) U/L比(1 702.0±278.8) U/L，t＝3.129，P<0.01]、γ-谷氨酰基转移酶[(101.70±12.82) U/L比(37.31±9.34) U/L，t＝3.927，P<0.01]和总胆红素[(1.281±0.232) mg/dl比(0.618±0.051) mg/dl，t＝3.889，P<0.01]均显著升高，且差异有统计学意义；Western blot检测显示细胞角蛋白19(CK19)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)水平在MycLAP-tTA/NEMOΔLPC较MycLAP-tTA组小鼠肝脏亦明显升高；肝祖细胞标志物如角蛋白(CK19，4.336±1.970比0.680±0.234，t＝1.843，P<0.01)、CK7(3.884±0.338比2.370±0.525，t＝2.422，P<0.01)、甲胎蛋白(AFP，3 614.0±2 070.0比1 399.0±319.9，t＝1.057，P<0.01)、上皮细胞黏附分子(EpCAM)的mRNA水平在MycLAP-tTA/NEMOΔLPC较MycLAP-tTA组小鼠肝脏显著增高(7.900±0.997比3.084±0.711，t＝3.943，P<0.01)。结论肝细胞中特异性敲除NEMO从而抑制经典的IKK/NF-κB信号通路，可促进肝肿瘤的发生发展，并诱导混合型肝细胞癌-胆管细胞癌的发生。白细胞介素(IL)-6/信号转导与转录激活因子-3(STAT3)通路与细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路可能参与混合型肝癌的发生发展。

简介：目的：本实验前期研究发现I型胶原α1链基因-1997G→T纯合突变可降低成骨细胞生物学性能。现利用基因重组技术提高TT型成骨细胞COLIA1基因mRNA的表达水平，观察能否逆转COLIA1基因-1997G→T突变对TT型成骨细胞生物学性能的影响。方法构建过表达COLIA1基因的腺病毒载体，并感染TT型成骨细胞。比较感染后TT型成骨细胞I型胶原α1链mRNA的表达水平、I型胶原的含量、细胞基质钙含量以及钙结节数量的差异。结果过表达COLIA1基因的腺病毒载体感染后，TT型成骨细胞I型胶原α1链mRNA的表达水平、I型胶原的含量、细胞基质钙含量以及钙结节数量较未感染组及空病毒组有显著提高，差异有统计学意义。结论利用腺病毒载体提高TT型成骨细胞的I型胶原α1链mRNA的表达水平，可增加I型胶原的含量、细胞基质钙含量以及钙结节数量。TT型成骨细胞I型胶原合成的减少导致细胞外基质减少，导致钙质沉着部位不足可能是-1997G/T患者BMD降低的原因。

简介：对于酒之功过，自古莫衷一是，各有评说。

简介：排尿功能障碍是当代泌尿外科的热点，尿失禁是其中的重要问题。临床上最常见的是压力性尿失禁和急迫性尿失禁，或者是两者混台存在的尿失禁。压力性尿失禁多遥于女性；男性前列腺增生症术后并发的尿失禁既可能是压力性尿失禁，也可能是急迫性尿失禁。

简介：日前,人社部印发通知,明确了多项政策的时间点。其中包括明年开始基本实现跨省异地安置退休人员住院费用直接结算,到明年底,基本实现符合转诊规定的异地就医住院费用直接结算。随着医保'全国漫游'呼声日益高涨,有关部门加快了实施进度,拿出了时间表和路线图。但是,要想使其顺利落地,还有三道坎要过。

简介：摘要

简介：相对于炎热的夏季，秋冬季对老人可能更好过，但对糖尿病患者来说却不是什么好事。因为秋冬交替时节，气候不稳定，早晚温差大，普通人都易患感冒，抵抗力本就不高的糖尿病患者，更易发生各种感染。而感染会导致血糖升高，血糖升高又会加重感染。糖尿病患者一定要对此提高警惕，做好感染防控。

简介：男性的睾丸和女性的卵巢,统称为性腺,是决定男女性征的关键器官.性腺切除后性功能存在与否,是不少患者及配偶十分关心的问题.在我国,每年因卵巢或子宫肿瘤而切除性腺的患者为数不少.这些肿瘤患者的5年生仔率相当高,其中,有相当多的人在根治疾病后没有享有正常的性生活.究其原因,主要是认识上的误区所致.

简介：

简介：刚刚过完新春假期，在猴年的一开始，专家先教您一招。猴年如意操”，让您健康过猴年。

简介：近年来性病的发病较前增多,临床上各种性病治疗方法发展迅速.在取得巨大成绩时,也存在着一些失误,其一是广泛存在的过度治疗,乱用或滥用药普遍存在,用药过多,疗程过长,出现了性病过治现象;其二是对性病的治疗忽视了心理治疗及社会教育、预防宣传,导致当前对性病患者的治疗存在很大的盲目性,有些患者出现了性病恐怖;其三是目前性病诊疗市场存在着机构复杂、管理混乱、无证开业、滥收费等问题,严重危害了患者的身心健康,也扰乱了医药市场.

简介：其实，在满意的性生活跟治疗高血压之间有一个平衡，只要按照以下步骤做，就能过上美满的性生活：

简介：娜尔丝：我不小心折断了一个脚趾，在我受伤二十多天时，丈夫要求过性生活。我听说，受伤以后百日之内不可行房事。这种说法有科学依据吗？

简介：

简介：

简介：摘要目的探讨沉默长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation，H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其对miR-181b-5p的靶向调控作用。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞，将其随机分为对照组、H/R组、H/R+si-NC组、H/R+si-SNHG7组、H/R+si-SNHG7+anti-miR-NC组和H/R+si-SNHG7+anti-miR-181b-5p组。检测乳酸脱氢酶、丙二醛的含量与超氧化物歧化酶的活性；用流式细胞术检测细胞凋亡率；用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG7、miR-181b-5p的表达量；用双荧光素酶报告实验验证SNHG7、miR-181b-5p的靶向关系；蛋白免疫印迹法检测Bax和Bcl-2蛋白的表达量。结果与对照组相比，H/R组心肌细胞中SNHG7的表达显著升高(P<0.05)，miR-181b-5p的表达水平显著降低(P<0.05)，乳酸脱氢酶、丙二醛的含量显著升高(P<0.05)，超氧化物歧化酶的活性显著降低(P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)，Bax蛋白水平显著升高(P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05)；与H/R组、H/R+si-NC组相比，H/R+si-SNHG7组乳酸脱氢酶、丙二醛的含量显著降低(P<0.05)，超氧化物歧化酶的活性显著升高(P<0.05)，细胞凋亡率显著降低(P<0.05)，Bax蛋白水平显著降低(P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05)；双荧光素酶报告实验证实SNHG7可靶向结合miR-181b-5p；干扰miR-181b-5p的表达可减弱沉默SNHG7对H/R诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡的作用。结论沉默SNHG7可能通过上调miR-181b-5p的表达抑制H/R诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡，从而对心肌细胞发挥保护作用。

简介：摘要目的探讨肝内胆管结石相关肝内胆管癌(HICC)组织中肝癌衍生生长因子(HDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)和黏蛋白5B(MUC5B)的表达及其临床意义。方法回顾性分析1999年10月至2019年10月期间温州医科大学附属第三医院收治的行肝切除术的79例肝内胆管结石或HICC患者的临床资料。79例患者中HICC者41例(HICC组)，肝内胆管结石者38例(肝内胆管结石组)。另选取同期行肝切除术的37例肝良性肿瘤患者为对照组。共入选行肝切除术的患者116例，其中男性47例，女性69例，年龄(66.1±3.2)岁。对比三组患者HDGF、VEGF和MUC5B的阳性表达情况。在41例HICC患者中，考察HDGF、VEGF与MUC5B阳性表达与其临床特征的相关性。结果与对照组相比，肝内胆管结石组和HICC组患者HDGF、VEGF和MUC5B阳性表达率增加，差异均具有统计学意义(P<0.05)。与肝内胆管结石组相比，HICC组患者HDGF、VEGF和MUC5B阳性表达率增加，差异有统计学意义(P<0.05)。HICC患者VEGF阳性表达与肿瘤分化程度、肿瘤局部浸润程度、肿瘤长径、肿瘤分期、肿瘤糖类抗原(CA)19-9水平及淋巴结转移相关(P<0.05)；MUC5B阳性表达与肿瘤分化程度、肿瘤局部浸润程度、肿瘤长径、肿瘤分期、CA19-9水平及淋巴结转移相关(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示，HDGF与VEGF在HICC组织内呈正相关表达(r＝0.935，P<0.01)。生存分析结果表明，VEGF阳性表达HICC患者术后1、3、5年的累积生存率(36.7%、17.1%、7.3%)较阴性表达患者同期累积生存率(51.2%、26.8%、19.5%)低，差异有统计学意义(P<0.01)；MUC5B阳性表达HICC患者术后1、3、5年的累积生存率(34.1%、17.1%、4.9%)较阴性表达患者同期累积生存率(53.7%、31.7%、17.1%)低，差异有统计学意义(P<0.01)。结论HDGF可作为早期评估HICC发病的参考指标，而VEGF与MUC5B的过表达可作为评判HICC进展及预后的重要指标。

简介：探讨COX-2抑制剂NS-398对转化生长因子-β（TGF-β）影响肾小球系膜细胞表达环氧化酶-2（COX-2）及Smad2mRNA表达的作用,系膜细胞COX-2mRNA和Smad2mRNA表达均增加,TGF-β刺激肾小球系膜细胞COX-2表达的信号通路之一是Smad信号通路