简介:目的:观察荆芥挥发油及其主要成分胡薄荷酮与薄荷酮体外对甲型流感病毒(H1N1)增殖的影响,并探讨其TLR/IFN信号通路机制。方法:MTT法检测受试药对狗肾传代细胞(MDCK)的半数中毒浓度(TC50)及最大无毒浓度(TC50);血凝法测定甲型流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34(H1NI)对MDCK细胞的感染性;MTT法和细胞病变法(CPE)测定三种药物体外抑制流感病毒增殖的有效浓度(IC50)和治疗指数(TI)。Real-TimePCR法观察药物对HINl感染MDCK细胞后8h细胞TLR7、IFN-BmRNA表达水平的影响。结果:荆芥挥发油、胡薄荷酮和薄荷酮对MDCK细胞的TC50分别为0.20mg/ml、0.36mg/ml与0.43mg/ml,TC0分别为0.10mg/ml、0.10mg/ml与0.25mg/ml。荆芥挥发油和胡薄荷酮3.1×10^-3-0.mg/ml浓度时能抑制流感病毒增殖,其Ic5口分别为1.7×10^-3mg/ml与1.9×10^-3mg/ml,T1分别为120.83、184.54,呈一定量效关系;薄荷酮对流感病毒染毒的MDCK细胞几乎无保护作用。荆芥挥发油3.1×10^-30.10mg/ml浓度,胡薄荷酮1.3×10^-3-0.10mg/ml及薄荷酮7.8×10^-3-0.10mg/ml浓度时对流感病毒具有明显直接杀灭作用,其IC。分别为3.1X10^-3、7.2×10^-3与1.9×10^-3mg/ml,TT分别为63.99、50.00和82.88。荆芥挥发油和胡薄荷酮O.1mtg/ml浓度时均显著提高TLR7、IFN-BmRNA表达水平,0.25mg/ml薄荷酮显著提高TLR7mRNA表达水平。结论:荆芥挥发油与胡薄荷酮体外明显抑制甲型流感病毒(H1N1)在MDCK细胞中的增殖,薄荷酮作用不明显;三者均对流感病毒有显著直接杀灭作用。其抗病毒作用机制可能与其激活TLR7,诱导IFN.B高表达,激活病毒模式识别系统有关。
简介:摘要目的针对3种实验室常规消毒方法对流感病毒灭活效果进行评价。方法采用紫外照射物理方法及乙醇和84消毒液2种化学方法,分别对流感病毒进行消杀,不同时间或浓度的消毒方法处理病毒样本后感染MDCK细胞,观察细胞病变效应(cytopathic effect, CPE)鉴定对流感病毒灭活效果。结果紫外照射流感病毒时间≥1 min、或75%乙醇处理流感病毒0.25~32 min、或84消毒液有效氯浓度≥400 mg/L且室温消杀流感病毒时间≥1 min,上述3种条件下均检测不到病毒感染性。结论摸索了实验室常规消毒方法灭活流感病毒的条件,为建立流感病毒实验室防护规范和应急处置技术方案提供了参考数据。
简介:[目的]建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用。[方法]根据Genbank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性。在此基础上设计巢式PCR提高此方法的灵敏度。利用此方法对20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本进行检测。[结果]利用设计的引物扩增出的序列测序结果证实与报道的SV5SH基因相对位置的序列一致。AccIII限制性内切酶可对PCR产物进行特异性酶切。巢式PCR比一次PCR的敏感度有所提高。用此方法检测的20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本结果为阴性。[结论]本文首次初步建立了检测SV5病毒的PCR方法,排除实验室用20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本SV5的污染。
简介:摘要目的分析流感病毒性肺炎与细菌性肺炎的临床特点。方法回顾性分析中国医科大学附属盛京医院呼吸科2018年11月至2019年4月住院治疗的流感病毒性肺炎和细菌性肺炎患者共112例的临床资料,其中流感病毒性肺炎组40例、细菌性肺炎组72例,对两组患者的年龄、基础疾病、呼吸频率、全血淋巴细胞计数、氧和指数、胸部CT影像改变等临床特征进行分析比较,应用logistic回归统计分析流感病毒性肺炎的危险因素。结果流感病毒性肺炎组与细菌性肺炎组年龄[(48.45±16.28)岁比(59.18±19.11)岁]、氧合指数[(267.5±90.7)mmHg比(368.6±47.6)mmHg]差异均有统计学意义(t=-2.997、-6.563,均P<0.01)。胸部CT影像改变为磨玻璃影、多叶段受累是流感性病毒肺炎的危险因素(OR=12.491、20.001,均P<0.05)。结论与细菌性肺炎比较,病毒性肺炎患者多为中青年人,氧和指数低,胸部CT影像以磨玻璃影为主,病变呈多叶段分布。
简介:摘要目的对儿童下呼吸道流感病毒感染所致的危重症病例临床特征进行分析,旨在提高对流感危重症的认识,为临床早期识别及诊治提供参考依据。方法回顾分析2018年10月至2019年10月深圳市儿童医院收治入院的下呼吸道流感病毒感染危重症病例(危重症组)30例,并将其临床资料与下呼吸道流感病毒感染的普通重症病例(普通重症组,n=40)进行比较。结果危重症患儿以小于5岁多见(19例,63.33%),以男孩为主(25例,83.33%)。与普通重症组相比,危重症夏季发生比例明显升高(χ2=7.050,P=0.008),肺部湿啰音发生率明显升高(χ2=5.222,P=0.022),出现重症肺炎比例明显增加(χ2=32.651,P<0.001),危重并发症中呼吸衰竭多见(18例,60.00%),出现塑型性支气管炎比例显著升高(χ2=7.797,P=0.005)。危重症组患儿血常规以中性粒细胞增高为主,中性粒细胞绝对值高于普通重症组(Z=-3.805,P<0.001),CRP升高比例显著增加(χ2=5.833,P=0.016);灌洗液培养以肺炎链球菌为主(9例,30.00%),EB病毒检出比例高于普通重症组(χ2=6.909,P=0.009)。结论下呼吸道流感危重症多见于5岁以下儿童,夏季高发,当肺部出现湿啰音,血常规以中性粒细胞增高为主,CRP升高明显,特别是合并肺炎链球菌、EB病毒感染时需警惕危重症的发生,密切关注呼吸系统的重症肺炎、呼吸衰竭、塑型性支气管炎并发症,早期抗病毒治疗,控制合并感染,积极给予对症治疗、生命支持能改善预后。
简介:目的对流感病毒H7N9型裂解疫苗进行动物局部安全性评价.方法家兔肌肉刺激试验:家兔后肢股四头肌im0.5mL流感病毒H7N9型裂解疫苗,每天给药1次,连续给药2d,末次给药后48h和第25天对注射部位进行肉眼和病理组织学检查.豚鼠全身主动过敏试验:豚鼠后肢隔日im0.5mL流感病毒H7N9型裂解疫苗,连续注射3次,于末次致敏后第14天iv给予1.0mL的流感病毒H7N9型裂解疫苗进行激发,观察豚鼠30min内是否出现过敏反应.急性毒性试验:小鼠后肢im0.2mL流感病毒H7N9型裂解疫苗,给药1次后观察小鼠的不良反应情况.结果流感病毒H7N9型裂解疫苗可导致注射部位肌肉出现局灶性炎细胞浸润,肌间质细胞增生,条索状化脓灶,停药25d后,上述病变消失.流感病毒H7N9型裂解疫苗豚鼠过敏反应发生率为67%,25min内恢复正常,过敏反应评价为弱阳性到阳性;小鼠急性毒性试验未见异常.结论流感病毒H7N9型裂解疫苗安全性良好,不影响其临床使用.
简介:2009甲型(H1N1pdm09)流感大流行后,几个单价大流行性流感疫苗通过快速程序被许可使用。发作性睡病作为疫苗的副作用被发现,主要是在接受用欧洲的灭活纯化协议生产的AS03佐剂A(H1N1)流感疫苗的人群。感染野生甲型(H1N1)大流行流感病毒后没有接种疫苗的人群,发作性睡病的发病也在增加,这提示此种病毒抗原的作用在发作性睡病疾病发展中具有一定作用。本文进行了发作性睡病背景简介,概述了流感疫苗制剂的不同类型,探讨了自身免疫性疾病和自然感染之间的关系。