试探提高结核病痰涂片阳性率方法

试探提高结核病痰涂片阳性率方法

谢秀珍

兰坪县疾病预防控制中心兰坪671400

关键词：痰涂片检验；阳性率；方法

抗酸杆菌（AFB）涂片镜检作为发现传染源、选择化疗方案、考核评价疗效的重要手段，在现代结核病控制工作中，占有不可或缺的位置。加强痰涂片镜检的质量控制，提高结核病实验室的痰检质量，提高肺结核病人的涂阳发现率，已成为当前国家结核病控制规划中的重要内容。

1采集标本的容器

采用世界卫生组织（WHO）推荐的、规范的国际通用螺旋盖痰瓶，或可密封塑料盒、蜡纸盒、收集痰标本（参考规格：直径4㎝，高度2㎝）。痰容器上应标明病人姓名、编号和容器序号1，2，3（1=当日即时痰，2=夜间痰，3=次日晨痰）。

2标本分类

根据痰标本采集的时间，可将标本分为三类：

即时痰：就诊时深呼吸后咳出的痰液。

晨痰：患者晨起立即用清水漱口后，咳出的第二口、第三口痰液。

夜间痰：送痰前一日，患者夜间咳出的痰液。

进行抗酸杆菌检查的医疗机构应使用符合要求的标本容器，医务人员在容器上应注明患者姓名、编号（初诊病人登记号或结核病人登记号）、检查项目、痰标本序号，然后交给患者。

同时临床医护人员应通过解释，使患者充分了解标本质量对相应检查项目的重要性，示范并指导其掌握从肺部深处咳痰的方法：清水漱口、拍背、双手插腰、深吸气、用力咳嗽。如患者识字可提供宣传材料。

3痰标本的性状

3.1干酪痰：标本外观以黄色（或奶酪色）、脓样、团块状的分泌物为主，粘度较低，制片时较易涂抹；涂片染色后镜检，可发现大量脓性炎症细胞、肺上皮脱落细胞。由于此类标本是肺部深处咳出，对肺结核的诊断最有价值，故AFＢ的检出率较高。

3.2血痰此类标本是在粘液痰或干酪痰标本中混有血液，颜色为褐色或深褐色、鲜红色或伴有血丝；涂片染色后镜检能够观察到粘液痰或干酪痰的细胞特征外，含新鲜血液的标本中可见到被染色的血细胞。由于含血标本易干扰ＡＦＢ镜检的结果，故在制片时应尽量避免挑取含血部分。

3.3粘液痰标本外观以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主，制片时需仔细涂抹：涂片染色后镜检时，镜下可见支气管内膜纤毛柱状上皮细胞，伴有少量肺上皮脱落细胞、脓性炎症细胞、、口腔脱落细胞及口腔寄生菌。此类标本的ＡＦＢ检出率较唾液高。

3.4唾液目视观察标本整体外观，以透明或半透明水样、粘度较低的口腔分泌物为主，标本中有时伴有气泡；涂片染色镜检时，镜下可见少量口腔脱落细胞和口腔内寄生菌，有时可见食物残渣。由于此类标本进行ＡＦＢ检查时的检出率很低，用于对患者确定诊断时是不合格的标本。

患者留取的痰标本，应由检验人员或经培训的专人目视检查标本质量（特别是用于初次诊断的痰标本）：标本量一般在3-5ml，，标本性状属于干酪痰、褐色血痰或含少量新鲜血液的血痰、粘液痰者为合格的标本；痰标本不合格者，如唾液标本，应在进一步指导后重新送检。进行细菌学检查时应在登记本和检验报告单上注明标本性状，以供分析结果时参考。

4让病人掌握正确的留痰方法

4.1首先要使病人了解查痰的重要性及应该留取干酪、血痰或粘液痰才符合要求。

4.2为了能得到理想的痰标本，病人应该在清晨起床后，先作几次深吸气，然后用力猛咳，这样才能收集到来源于下呼吸道或来自病灶及空洞内的痰液。

4.3对于很少有痰的儿童、轻症年轻病人或经过治疗病情基本好转的人，可试用以下方法：（1）在火炉上置一小盆开水，病人将口张开对着热蒸汽反复深吸气，使蒸汽深深吸入，润湿支气管，使痰液得到稀释，此时痰比较容易咳出；（2）用雾化吸入法留痰，即将l0%～15%盐水溶液装入雾化器内，患者张口做雾化吸入，10-15min后，一般可以将痰咳出；（3）-时无痰的患者可以随身携带痰盒，一旦有痰，随时咳人盒内，再送痰检室检查。

5留取合格的痰标本

无论是采集什么时间的痰液都应该是来源于下呼吸道或来自病灶及空洞内的外观以黄色为主的干酪样痰液、干酪样痰标本中混有血液而形成的血样痰或者以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主的粘液痰为合格标本。目视观察标本整体外观以透明或半透明水样、粘度较低的唾液为不合格标本。根据标本采集的时间，可将标本分为就诊时深呼吸咳出的即时痰；晨起用清水漱口后咳出的第2、3口晨痰；送痰前一日晚间咳出的夜间痰。

6痰液的选择及制片染色

6.1选痰同一份痰液中含结核菌之多少不完全一致，分布也不均匀，常聚集成簇，所以检验人员应该挑选含菌多的灰绿色或黄色脂膏样小颗粒部分进行涂片。因其可能含有空洞脱落的坏死干酪样物质。如此选择阳性机会较多。

6.2制片涂片不应过厚也不应太薄，否则由于不均匀而影响染色和镜检。一张被检涂片的痰量应保持在0.05—0.Iml，并均匀涂成lOmm×20mm大小，每1张片子只可涂1份标本。

6.3染色制作一张好的痰涂片加上成功的染色对检验者镜下观察及判断极为重要，将构成选痰一制片一染色三位一体的重要环节。

一张经过上述三个环节制成的涂片镜下必须具备以下三点要求：涂片染色背景要清晰舒适；没有染色沉渣；阳性结果时抗酸杆菌要鲜明呈红色。

7镜检及结果判断

典型结核杆菌在镜下呈鲜红色的棒状、稍弯曲、两端钝圆，常可见浓染颗粒，也可见到单独或成群的颗粒状存在。如阳性时，涂片中结核杆菌数量不一，痰中发现多量结核菌，表明细菌增殖旺盛，诊断明确。整个涂片仅见几个或很多视野只发现一个菌体时，应当结合胸部x片结果才能进行诊断；若条件允许应进一步做痰结核杆菌培养，镜下不仅注意抗酸杆菌量之多少，更应观察注意所见细菌之形态特征，若发现多量抗酸杆菌呈阳性颗粒样密集存在，则可能意味着结核杆菌经过化疗后细菌形态已发生改变。如痰涂片镜检阴性时应至少观察300个视野，以最大限度的避免漏诊，整个痰膜的镜检时间应在5min以上。1名镜检人员连续阅读10～12张涂片后，应休息20min左右；为保证镜检质量，一名镜检人员的每日涂片阅读量不应超过25张。

综上所述，只要在痰液的采集、制片和镜检方面加以严格注意，就能够提高痰液抗酸杆菌的检出率。抗酸杆菌（AFB）涂片镜检作为发现传染源、选择化疗方案、考核评价疗效的重要手段，在现代结核病控制工作中，占有不可或缺的位置。加强痰涂片镜检的质量控制，提高结核病实验室的痰检质量，提高肺结核病人的涂阳发现率，已成为当前国家结核病控制规划中的重要内容。

参考文献：

[1]中国防痨协会基础专业委员会编《结核病诊断实验室检验规程》中国教育文化出版社2006年1月