复方麝香注射液安全性实验研究

复方麝香注射液安全性实验研究

范采绚 梁彦杰 * 董亚中 邢媛

神威药业集团有限公司 河北 石家庄 051430

摘要 : 目的 对复方麝香注射液进行肌肉刺激性、血管刺激性、全身过敏性及溶血性实验，以评价其用药的安全性。方法 在肌肉刺激性实验中，主要观察2只家兔注射复方麝香注射液后48 h的变化。在血管刺激性实验中，主要观察3只家兔分别连续 5 d注射复方麝香注射液及0.9%氯化钠注射液的变化。在全身过敏实验中，6只豚鼠隔日3次腹腔注射复方麝香注射液，于首次致敏后第14d和第 21d分别静脉注射复方麝香注射液，观察 30 m i n内动物的变化。在溶血性实验中，观察本品在4 h内有无溶血和聚集现象。结果 复方麝香注射液对家兔股四头肌无刺激作用，对家兔耳缘静脉无刺激作用，对豚鼠未见过敏反应，家兔无溶血现象。结论 复方麝香注射液的动物实验结果表明其安全可靠 。

关键词 : 复方麝香注射液；安全性

复方麝香注射液是中药人工麝香、郁金、广藿香、石菖蒲、冰片、薄荷脑等经提取精制而成的复方水溶液^［1］。方中麝香为治疗闭证、神昏不醒之要药，体现了清心开窍的立方之旨，为君药，配伍冰片、郁金、 石菖蒲以达豁痰开窍，醒脑安神之功，为臣药，广藿香、薄荷脑可助麝香清窍醒神，为佐使药。麝香主要含麝香酮等成分，石菖蒲、郁金、广藿香主要含挥发油，冰片、薄荷脑系挥发性成分^［2］，主要用于痰热内闭所致的中风昏迷，但也有不良反应的报道^［3-5］ 。为了其临床用药的安全性，笔者对复方麝香注射液进行了有关安全性试验研究 ,现将结果报告如下：

1 材料

1.1 药品与试剂

复方麝香注射液，批号19030531，神威药业（四川）有限公司 ； 5%卵蛋白液（将新鲜鸡蛋取蛋清用0.9% 氯化钠注射液按1：20配制，临用新配）；0.9%氯化钠注射液，批号1811033701，石家庄四药有限公司。

1.2 实验动物 豚鼠，体重 300～350g ；家兔 ,体重2.0～2.5 kg，均由北京科宇动物养殖中心提供，实验动物生产许可证号SCXK（京）2018-0010

2. 方法

2.1肌肉刺激性实验^［6］

取健康家兔 2只 ,以无菌操作法分别在其左右两腿股四头肌内各注入供试品 1.0 ml/只 ,注射后 48 h处死动物 ,解剖取出股四头肌 ,纵向切开 ,观察注射部位局部刺激反应 ,按表 1换算成相应的反应级 。

表 1　 注射肌肉刺激反应评级标准

2.2血管刺激性试验^［6］

取健康家兔3只，右侧耳缘静脉注射以无菌操作方法注射复方麝香注射液原液，2ml/kg，采用自身对照，左侧耳缘静脉注射给予等体积0.9%氯化钠注射液，1次/d，连续给药5d。末次给药后48 h，肉眼观察注射部位有无红肿、充血等刺激现象，然后将动物放血处死 , 分别距注射部位进针点2cm处向心端剪下耳缘约 2cm作为标本 ,标本用福尔马林固定 ,常规组织切片，观察血管周围变化、血管壁是否损伤、内皮细胞有无脱落、有无血栓形成以及其他病理变化 。

2.3全身主动过敏试验^{［7 8］}

取健康豚鼠18只，随机分为3组：A阴性对照（0.9%氯化钠注射液）组、B阳性对照（5%卵蛋白液）组、C复方麝香注射液（原液）组，各组豚鼠隔日分别腹腔注射0.9%氯化钠注射液、5 %卵蛋白液和复方麝香注射液各 0.5 ml进行致敏 , 共3次。然后各组再分为两组 ,每组3只 ,于首次注射后的第14d和 21d ,由上肢外侧静脉注射0.9%氯化钠注射液、5 %卵蛋白液和复方麝香注射液（原液）各1.0 ml进行激发 ,观察豚鼠在激发后30 min内有无过敏症状 , 如躁动、抓鼻、竖毛、呼吸困难、痉挛、休克甚至死亡等症状 , 如有反应可按表2分级，判定其是否合格。若反应级数达2级以上（包括2级）时，可认为过敏实验不合格。按表2分级 ,判定其反应级数

表 2　 豚鼠过敏反应级数

2.4体外溶血实验^{［6 8］}

取健康家兔1只，自心脏取血20ml，置入含玻璃珠的三角瓶中，振摇10 分钟，去除纤维蛋白，使成脱纤血液。加入0.9%氯化钠注射液约10倍量，摇匀，每分钟1000〜1500转离心15分钟，除去上清液，沉淀的红细胞再用0.9%氯化钠注射液按上述方法洗涤 2～3 次，至上清液不显红色为止。将所得红细胞用0.9%氯化注射液制成2%的混悬液，供试验用。

取试管7支 ,编号排列于试管架上，按表 3加入各种溶液 ,第6管不加复方麝香注射液作为空白对照管 ;第7管不加药液 ,用纯化水代替0.9%氯化钠注射液,作为溶血的阳性对照组 ,将各管轻轻摇匀 ,在37±0.5℃ 水浴中保温4h,开始每隔15 min观察1次 ，1h后 ,每隔1h观察1次 ,记录4h 。

全溶血：溶液澄明红色，管底无细胞残留；部分溶血：溶液澄明红色或棕色，管底有少量红细胞残留；无溶血：红细胞全部下沉，上层液体无色澄明；凝集：虽无溶血，但出现红细胞凝集，振摇后不分散 。

3.结果

3.1 肌肉刺激性实验

注射后不同时间观察结果股四头肌表面未见明显充血 ,红肿 ,家兔活动正常 ,未见明显异常反应。两只家兔48h后健康如常 ,解剖观察给药部位股四头肌刺激反应级数各为 0级 。以上试验结果提示 ,复方麝香注射液局部肌肉无明显剌激作用。

3.2 血管刺激性实验

家兔耳缘静脉边缘滴注5d和5 d后, 左耳缘静脉与右缘静脉经肉眼观察均未见异常反应, 组织镜检可见耳缘静脉内皮完整、光滑、管壁未见炎症反应, 管腔内未见血柱形成。结果表明: 复方麝香注射液局部血管未见明显刺激作用。

3.3全身主动过敏试验

A 阴性对照（0.9%氯化钠注射液）组与C复方麝香注射液(原液)组豚鼠分别于第 1 次致敏给药后第14 d及21 d, 由上肢外侧静脉注射复方麝香注射液或0.9%氯化钠注射液0.5 m l,注射后豚鼠均未出现明显反应 ,判定为 0级 ,提示复方麝香注射液未见全身主动过敏反应 ； 而B阳性对照（5%卵蛋白液）组豚鼠分别于第 1次致敏给药后第14d及21d, 由上肢外侧静脉注射5%卵蛋白液0.5 ml, ,注射后豚鼠在 5 min 内均出现兴奋不安、呼吸困难、抓鼻、颤抖、竖毛、痉挛、抽搐、大小便失禁、休克死亡等过敏反应，判定为4级 。

3.4 体外溶血实验

第7管(阳性对照管)溶液呈现澄明红色，其余6管均末见澄明红色，红细胞全部下沉，上层液体无色澄明。表明复方麝香注射液未见明显体外溶血作用。结果见表 4 。 提示复方麝香注射液无溶血和凝集反应 。

表 4　 各种时间段溶血实验结果

“ - ” 表示无溶血或凝集反应 , “ + ” 表示有溶血或凝集反应

4.讨论

本次实验复方麝香注射液对红细胞未见溶血和凝集作用；家兔静脉注射、肌肉注射给药后未见血管、肌肉刺激性；豚鼠静脉注射后第14，21d，未见全身主动过敏反应；结果提示在本实验条件下，复方麝香注射液安全性较好 ,符合中药注射液的安全性要求。

国家和公众对用药安全越来越重视 , 近年来国家食品和药品监督管理局对许多中药注射剂生物安全性进行了全面的评估 ,对一些易产生不良反应的项目 ,在标准中增加检查项，以确保公众的用药安全。虽然本实验未发生过敏反应现象，我们仍然建议复方麝香注射液标准中应该增加过敏试验检查项 ,以增加公众的用药安全 , 减少临床上过敏反应的发生 。

参考文献:

[1] 邓震，向云洁. 复方麝香注射液临床应用现状［J］．现代中西医结合杂志，2010，6：2077

[2] 刘永利，袁浩，李冬梅等．复方麝香注射液特征图谱及5种主要成分的含量测定［J］． 中国药师，2015，12:2036-2038

[3] 刘国华，杨苏芳，袁洪. 29例复方麝香注射液不良反应文献分析［J］．中国医院药学杂志，2013，13：1112-1113

[4] 丁长玲，刘呈华，孙静等. 我院15例复方麝香注射液致不良反应报告分析［J］．中国药房，2007，33：2614-2615

[5] 姜萍，王敏，刘莹. 复方麝香注射液引起不良反应1例报告［J］．吉林医学，2007，6：860

[6] 国家食品药品监督管理局. 中药、天然药物局部刺激性和溶血性研究技术指导原则［S］．北京，2005，12：11

[7] 国家食品药品监督管理局. 中药、天然药物免疫毒性(过敏性、光变态反应)研究技术指导原则［S］．北京，2005，12：13

[8] 国家药典委员会．中国药典（四部）［S］．北京中国医药科技出版社，2015，附录 159

作者简介: 范采绚（1987-） ，女, 神威药业集团有限公司，助理工程师, 研究方向为中药注射剂质量检验。

*通讯作者：梁彦杰( 1975- ) , 男, 神威药业集团有限公司，工程师, 研究方向为中药注射剂质量检验。