EGCG下调Hsp70抑制呼吸道合胞病毒的活性研究

(整期优先)网络出版时间:2021-02-19
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摘要目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)下调热休克蛋白70(Hsp70)对呼吸道合胞病毒(RSV)活性的抑制作用。方法根据细胞毒性实验确定EGCG的最大工作浓度,采用病毒滴度TCID50检测法、细胞毒性检测法、Western blot和实时荧光定量PCR法(qPCR)检测EGCG体外对RSV的增殖、蛋白表达和基因转录抑制效果。采用RNA干扰敲低Hsp70表达水平,检测病毒的生长曲线。结果EGCG对Vero细胞的毒性呈梯度依赖效应,最大无毒浓度为25 μm。EGCG在25 μm和12 μm及以上浓度时,呼吸道合胞病毒A型(RSV-A)病毒抑制率达60%以上,EGCG细胞中病毒F蛋白受到显著抑制,EGCG使病毒G蛋白的转录下降了约88%。敲低Hsp70表达水平后,病毒滴度下降了两个数量级。结论EGCG体外对RSV-A有较好拮抗作用,可能是通过抑制其特异性底物Hsp70实现的。