临床生物样本库血液样本的可控性采集和质量管理方法探讨

临床生物样本库血液样本的可控性采集和质量管理方法探讨

王文慧

南京市第二医院临床科研中心（中心实验室、样本库）

[摘要]目的：临床生物样本库血液样本的可控性采集和质量管理方法探讨。方法：构建一个网络化的样品采集管理过程，将样品采集电子申请、项目管理以及样品处理中与血液样品有关的各种前处理要素融入工作过程中，确保标准过程的实施状况在一个可控的范围内，最终形成一个标准化的血液采集、前处理、保存和管理办法。结果：血样和对应的组织样，结合临床资料进行比对。系统对每个样品的采集，到库，入库等情况进行了详细的记录。根据不同的质量需求，可以使用组合查询对样品进行筛选。结论：建立可控制的血液采集与处理模式及管理模式以及综合型的血液标本数据库，实现血液标本的规范化、高质量的采集与预处理，为肿瘤、自身免疫性疾病、心脑血管疾病及代谢疾病的研究，提供优质的血样及信息资源，在临床有着重要意义。

关键词：临床生物样本库；血液样本；可控性采集；质量管理方法

引言：临床生物样本库（简称样本库）收集的主要内容是匹配的血样、组织样以及对应的信息[1]。血样是血样的主要组成，其亚组分包括血浆，血清，红细胞；其中，白细胞、血小板、冷冻保存的外周血单核细胞（PBMC）、血凝块、血样衍生物（DNA、 RNA）等均为基因组、代谢和蛋白质组学的重要研究对象，在癌症、心脑血管和代谢疾病等重大疾病的基础和转化研究中具有重要意义[2]。在临床试验中起着举足轻重的作用。

1资料与方法

1.1临床资料

1.1材料

1.1.1消耗物及试剂（促凝剂，乙二胺四乙酸二钠盐，肝素锂，用于一种可用于一种或多种不同用途的一种。浙江拱东医学技术有限公司（Cell preparation tube）、美国 BD Vacutainer公司（Cell Preparationtube, CPT）、1.5 mL的离心机（上海万格 Science Device）、德国 QIAGEN全基因组 DNA萃取试剂箱（QIAGN）。

1.1.2装置

QR贴纸印刷机及 QR条带（美国 Brady)，美国泰默（Thermo)，微型离心机（美国泰默），瑞士泰默（Tecan),100-1000微升吸液器（德国 Eppendorf)，美国霍尼韦尔（Honeywell)，超洁净工作台，海尔冷冻冷冻机，水平冷冻贮藏柜（青岛海尔特制电气），纳米探针2000 （NanoDrop）紫外线光谱仪（美国泰默（Solar)。收集的时机因研究对象的不同而不同。医院的主要工作是对患者进行术前晨空腹采集，并对患者进行随访，同时对患者的术前、术后24小时、术后2天进行晨空腹采集，并进行相应的检查。

1.2方法

在决定采血管类型、采集时间的采集方案之前，要以研究方案和要采用的试验方法为依据，对各个病种的血液采血管类型、采集时间及地点、血液样本类型进行详细的分析；采集数量、保存方式等方面进行详细分析。采血管的种类是根据研究目的、科研用途、下游实验测试手段等来决定的。在没有按照取样操作规范进行生物标记物检测的情况下，项目信息管理有很大的偏差。医院自行研发的信息管理系统，在对标本的处理过程中，采用了电子档案的方式，并针对各疾病的特点，在软件中进行了标本收集过程的设计；将预分析编码的思想融入到血样收集的 SOP中，使之融入到血样信息管理的各个环节中。利用质量控制的结果，对信息系统与质量控制的样本相关的前处理变量进行分析，对采集流程进行调整、改进，从而持续地提升和控制样本质量，从而达到质量管理的目的。血样实体储存，储存和分配血样储存温度依赖于被分析物质的特性，通常-80摄氏度就足够储存大范围的血样。目前，医院使用-80℃的冷藏室保存血样。储存容量近两百万个。另外，我们还准备了4个紧急冷藏室，以避免由于冷藏室的故障而影响样品的品质。80摄氏度的冷柜都是在资讯系统中预先设定好的冷冻箱式结构，方便了进出库房的效率。

2结果

对血样进行质量控制的方法有：流程控制，信息完善，大分子检测。从医院样本库中随机抽取200份血液样品，在-80℃冷冻1-2年之后，对血细胞样品进行 DNA和 RNA的提取，可以得到高浓度的 DNA和 RNA，大约90%的样品所得到的 DNAOD260/OD280=1.6~1.8, RNAOD260/OD280=1.8~2.0。用 Aglient 2100对血液样品进行了检测，得到了80%的 RNA完整性系数（RIN)>7的结果，而90%的白细胞 RIN>7的结果。

3讨论

构建信息系统的基本目标是：①实现各种信息系统和样本间的精确对接，方便数据整合，从而精准高效地指导科研工作[3]。②实现对样品整个生命周期的精确复现，确保样品后处理结果的可追溯性，为科研提供真实可靠的样品信息。③方便科研人员及时、快捷地掌握贮存样本的保存情况，并对长期贮存样本的保存情况进行查询；对样品的批量输出等问题的处理

[4]。④方便了生物标本库的资料管理，资料查询，资料统计，资料及资料的存取；资料的存取。为此，需要将信息管理系统与医院的信息系统、实验室的信息系统、图像存档系统、通讯系统等有机地结合起来。血样质量控制是一个不断循环往复、不断改善的动态过程。通过对转送、前处理等与样品品质有关的因素的探测，并不断改善来达到目标。由于 RNAs是一种对血细胞和白细胞 RNA的质控方法，在对其进行分离纯化后，目前尚无针对血样的质控指标[5]。

参考文献

[1] 王雪岩,田金徽,张莉,等. 不同干预措施对胎儿臀位/横位孕妇母婴结局影响的网状Meta分析[J]. 中国全科医学,2023,26(21):2647-2658.

[2] 王芳,欧阳彩云,晏艳艳. 妊娠期孕妇学校课程参与频次对单胎足月妊娠孕妇自我护理能力及新生儿结局的影响[J]. 全科护理,2023,21(16):2220-2222.

[3] 张明静,张雪芹. 高龄孕妇妊娠晚期正念水平与心理压力影响因素及其干预策略分析[J]. 中国医药科学,2023,13(11):120-123,140.

[4] 闵蒙蒙,李彩虹. 产后专项优质护理提高二胎产后妇女患者自我护理能力的价值分析[J]. 贵州医药,2023,47(4):642-643.

[5] 张建岚,吴娅,周阳. 行为转变健康指导联合家庭运动护理在妊娠期糖尿病孕妇中的应用效果研究[J]. 当代护士,2023,30(10):117-120.