简介:摘要目的对强直性脊柱炎患者的人类白细胞相关抗原B27(HLA-B27)采用流式细胞术进行检测的方法进行分析,并探讨其阳性率和强直性脊柱炎的关系。方法选取本院在2012年2月~2013年10月间收治的100例强直性脊柱炎患者与50例进行健康体检人群,将前者设为观察组,将后者设为对照组,给予两组受检者采用流式细胞术对HLA-B27进行检测,观察两组受检者HLA-B27的阳性率。结果经过检测后,观察组与对照组的HLA-B27的阳性率明显具有差异性,两组对比具有差异性,P<0.05,统计学有意义。结论通过采用流式细胞术对人体中的HLA-B27进行检测,能够尽早的对强直性脊柱炎患者进行诊断与治疗,具有显著的临床价值。
简介:摘要背景Nocth信号系统在干细胞分化的调控中起着重要作用,但尚没有脐血来源干细胞分化为心肌细胞的机制中Notch作用的报道。目的观察Notch信号在脐血间充质干细胞向心肌细胞分化过程的调控作用。方法人脐血来源干细胞与心肌细胞共培养,实验1组加入Notch激活剂Jagged1,实验2组加入Notch激活剂Jagged1和其抑制剂DAPT,对照组加入PBS液。用免疫组化方法检测干细胞分化为心肌细胞及Notch信号的表达。结果与结论脐血间充质干细胞在体外可分化为心肌细胞,与对照组和实验2组相比,实验1组的干细胞分化为心肌细胞的比率更高,并且Notch1和Jagged1表达增强。说明Notch信号系统在脐血干细胞分化为心肌细胞中起正向调控作用。
简介:摘要目的构建OX40L真核表达质粒并转染血管平滑肌细胞(VSMCs),探讨其对VSMCs增殖的影响。方法通过目的基因克隆,构建p-OX40L质粒并转染VSMCs。实验分3组重组质粒(p-OX40L)转染组、空质粒转染组(pcDNA3.1(+))和空白对照组。将p-OX40L用脂质体2000转染入VSMCs,提取细胞的总RNA和蛋白检测OX40L的mRNA和蛋白表达,并用MTT法检测OX40L对VSMCs增殖的影响。结果经PCR、双酶切和DNA序列分析证实OX40L正确插入pcDNA3.1(+)中,将p-OX40L转染VSMCs后,OX40L的mRNA、蛋白表达均高于空质粒组和空白对照组(P<0.01),同时对VSMCs的细胞抑制率明显高于空质粒组和空白对照组。结论成功构建OX40L真核表达质粒,该质粒可抑制VSMCs的增殖。
简介:摘要目的探讨百草枯对健康者外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcellPBMC)骨桥蛋白(osteopontinOPN),核转录因子-KB(Nuclearfactor-kB,NF-KB)的影响。方法健康体检者6例,取外周静脉血分离获得PBMC,以5×105个细胞/孔种入96孔细胞培养板,分3组培养12小时。A1组正常PBMC;A2组正常PBMC+50ng/ml百草枯;A3组正常PBMC+100ng/ml百草枯。观察培养前后细胞形态变化,收集各组细胞培养上清检测骨桥蛋白水平,收获细胞后检测胞内NF-KB。结果各组细胞培养前后细胞形态、数量无明显变化;从A1组到A3组,细胞培养上清骨桥蛋白水平及胞内NF-KB含量呈逐组增高。结论百草枯影响细胞内NF-KB,导致骨桥蛋白的大量分泌,可能是其引起肺组织损伤的原因。
简介:摘要目的白血病细胞能够通过自分泌方式分泌细胞因子而作用于自身,使细胞大量的增殖而不分化;白血病细胞所分泌的细胞因子也能作用于人脐带血(UCB)单个核细胞(MNCs)中的CD34+/CD133+细胞亚群使之增殖而抑制其分化。关于急性早幼粒白血病细胞(HL-60细胞)培养上清液能否使UCB-MNCs分化尚未见报道,本实验主要目的是观察HL-60细胞培养上清液对人UCB-MNCs分化的影响。方法实验分为①有HL-60细胞培养上清液+StemSpan®SFEM组;②StemSpan®SFEM组;③HL-60细胞培养上清液+高糖(HG)-DMEM组;④HG-DMEM组;⑤HL-60细胞培养上清液+低糖(LG)-DMEM组;⑥LG-DMEM组。收分离的人UCB-MNCs按2.5×106/瓶分别接种于6组培养液中,37℃,5%CO2,饱和湿度培养,于培养前和培养12天用流式细胞仪(FCM)分析表型CD34,CD90和CD166的变化。结果各实验组CD34,CD34/CD90和CD166阳性细胞百分比均较培养前升高。结论HL-60细胞培养上清液对人UCB-MNCs具有一定的抑制分化作用,其有效生物活性物质有待进一步研究。
简介:摘要目的利用柔红霉素复制新生大鼠心肌细胞中毒模型,观察芒果甙对中毒心肌细胞SERCA2α及PLB表达的影响,探讨芒果甙保护心肌细胞的机制。方法取原代培养心肌细胞以4μmol/L柔红霉素(Daunorubicin,DNR)建立心肌细胞中毒模型,以不同浓度芒果甙(25、50、100μmol/L)干预,用RT-PCR方法检测心肌细胞肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2α)及磷酸受钙蛋白(PLB)的mRNA表达水平的变化,用免疫组化方法检测Ca2+-ATP酶(SERCA2α)及磷酸受钙蛋白(PLB)的蛋白水平的变化。结果与空白对照组相比,柔红霉素模型组SERCA2αmRNA及蛋白的表达减低(P<0.01),而其PLBmRNA及蛋白的表达增高(P<0.05);与柔红霉素模型组相比,各浓度芒果甙给药组能增加SERCA2αmRNA及蛋白的表达,降低PLBmRNA及蛋白的表达(P<0.05)。结论芒果甙能影响SERCA2α、PLB的表达,这可能是芒果甙能减轻柔红霉素诱导的心肌毒性的机制之一。
简介:摘要目的观察复心汤对心衰大鼠心肌细胞因子TNF-α及BNP的影响,探讨其在心衰发展中的作用。方法以健康WistarSPF级雄性大鼠60只建立动物模型,随机分为4组对照组、模型组、复心汤组与卡托普利组,分别给予相应处理。比较四组大鼠血清水平中的TNF-α及BNP水平差异。结果各组间TNF-α水平存在显著性差异(P<0.001);模型组大鼠TNF-α较对照组显著升高(P<0.05);使用药物进行干预后,复心汤组与卡托普利组TNF-α均明显,且复心汤组与卡托普利组相比差异具有显著性(P<0.05)。各组间BNP水平存在显著性差异(P<0.001);模型组大鼠BNP水平明显高于对照组(P<0.05);使用药物进行干预后,复心汤组与卡托普利组BNP水平均明显下降,且与卡托普利组相比,复心汤组下降更为显著(P<0.05)。结论复心汤可显著下调心衰大鼠心肌细胞因子TNF-α及BNP,保护心肌细胞,改善心功能,延缓心衰进程。
简介:摘要目的观察血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂缬沙坦对大鼠心肌缺血再灌注模型心肌细胞凋亡及相关蛋白Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法SD大鼠随机分为三组(1)假手术组(6只);(2)缺血再灌注组(6只)结扎左冠状动脉30min,再灌注24h;(3)缬沙坦组(6只)手术前灌胃缬沙坦(10mg/kg/d)4周后分别行缺血30min再灌注24h。采用缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学方法检测心肌组织Bax、Bcl-2蛋白表达。结果缺血再灌注组心肌细胞凋亡数目增多(139.0±26.2),其Bcl-2和Bax蛋白阳性染色的细胞相应增多。缬沙坦组凋亡心肌细胞数量明显减少(102.4±12.7)、心肌组织中Bax蛋白表达低于缺血再灌注组(P<0.05)。结论心肌缺血再灌注过程中大鼠心肌细胞发生凋亡,缬沙坦减少心肌细胞凋亡的数量,其抑制作用可能部分与下调Bax蛋白表达有关。