简介：摘要目的研究抵抗素基因-420C/G位点多态性PCR扩增体系优化的实验条件。方法对实验研究中的主要影响因素设置各系列浓度和梯度，进行PCR反应后观察电泳结果，选取最适条件。结果最适温度为55°C，最适Mg2+浓度为1.5mmol/L，最适dNTP浓度为2.5mmol/L。最适扩增循环为35个循环。结论探索抵抗素基因多态性检测的最适实验条件，优化抵抗素基因多态性PCR扩增体系，使其扩增获得最高产物率。

简介：摘要目的探讨肾综合征出血热患者血清中HV-RNA的RT-PCR检测的可行性，以及扩增的部分HV靶基因的测序分析。方法设计并合成了两套分别互补于HVM基因片段和S基因片段的引物，建立检测肾综合征出血热患者临床血清标本中HV基因的RT-PCR方法，并对扩增的部分HV靶基因进行测序分析和比较。结果206份HFRS患者血清经RT-PCR扩增后，得到特异性的M和S靶基因片段，对急性期HFRS患者血清经RT-PCR检测，结果显示，S基因片段引物对HV靶基因检出率为60.93%，M基因片段引物检出率为40.63%，S基因片段引物的扩增效果显著优于M基因片段，两者相比具有统计学意义（x2=3.67，P＜0.05）。结论S基因片段引物的扩增效果优于M基因片段引物。

简介：摘要近年来数字PCR技术发展迅速，与传统PCR技术相比数字PCR可以对核酸分子进行绝对定量检测，并且具有高准确、高灵敏的优点。广泛应用于分子生物学领域和临床检测上，在癌症早期诊断、产前诊断、感染性疾病的早期检测、器官移植后监测等方面都有着重要的作用。

简介：摘要目的研究荧光定量PCR检测性病的结果。方法抽取2016年1月至2017年1月在我中心就诊的疑似性病患者58例作为研究对象，所有疑似患者均进行荧光定量PCR检测，并与医生根据患者临床症状、体征、流行病史等因素诊断为临床诊断病例进行分析检测结果比较。结果58例疑似患者荧光定量PCR检测结果与临床诊断结果比较无统计学差异（P＞0.05）。结论荧光定量PCR检测性病具有较高的检出率，能够为临床治疗提供诊断依据，具有应用及推广的价值。

简介：摘要本文通过荧光定量RT-PCR与常规RT-PCR，分别对191例临床粪便样本进行GⅠ、GⅡ型诺如病毒的快速检测，优化反应条件，筛选出最优反应体系，对两种方法的特异性、灵敏性进行检测分析。发现两种方法均可较好的检测出GⅠ、GⅡ型诺如病毒。其中常规RT-PCR阳性样本数为142，检出率为74.34%，最低检出限为103copies/μl，标准曲线均呈现出良好的线性关系，扩增效率分别为101.336%、103.558%；荧光定量RT-PCR的阳性样本为163，检出率为85.34%，最低检出限为102copies/μl，批内、批间重复试验的标准差范围为0.10～0.59，变异系数范围为0.43%～2.84%，重复性良好。两种方法检出率有显著差异（P＜0.05），且对星状病毒、腺病毒以及肠道病毒等均无交叉反应，GⅠ、GⅡ型诺如病毒之间也无交叉反应。荧光定量RT-PCR在灵敏度方面占优，建议在临床检测中应用。

简介：摘要目的指导工作人员在PCR实验室日常工作中更好的了解掌握PCR的操作。

简介：摘要目的探讨分析实时荧光定量PCR检测诊断结核病的应用价值。方法回顾性分析本院收治的80例结核病患者作为本次研究对象。对患者行实时荧光定量检查以及涂片抗酸染色法检查，对比分析两种不同检验诊断方法的结果。结果通过对患者行涂片抗酸染色法检测，发现最终的阳性检测共计为33例41.25％，对患者行实时荧光定量检验，发现最终的阳性检测共计为69例86.25％，实时荧光定量检验诊断方法检出率，相较涂片抗酸染色法检测明显较高，差异显著（P＜0.05）。结论通过对结核病患者行实时荧光定量检验方法诊断，可以取得较高的诊断率，且具有较高的灵敏性和特异度，可以及早为结核病患者的早期治疗提供临床依据，在一定程度上对患者的治疗预后起到直接影响，可以在临床中推广应用。

简介：摘要目的采用环介导恒温扩增技术建立快速检测儿童呼吸道合胞病毒的方法。方法收集福建省立医院2011—2012年儿科疑似急性呼吸道感染患儿的呼吸道分泌物标本137份，同时采用环介导恒温扩增技术(LAMP)和荧光定量PCR技术检测儿童呼吸道分泌物中呼吸道合胞病毒特异性RNA，分析两者的灵敏性和特异性。结果LAMP法在恒温条件下进行，特异性好，其灵敏度和可靠性与荧光定量PCR方法相当。结论LAMP方法具有灵敏度高、特异性强等优点，仅需简易设备就能快速、高效、简便地对病原微生物进行鉴定，是一种快速检测呼吸道合胞病毒的新方法。

简介：摘要目的探讨荧光定量PCR检测乙肝DNA分析前质量控制措施。方法选取本院收治的25例乙肝两对半检测确诊为乙肝大三阳患者的血液,每个患者的血液平均分为A、B、C、D组，A组即刻测定，B组室温放置2天测定，C组4℃放置7天测定，D组溶血即刻测定，比较不同的储存时间、温度以及标本是否溶血对乙肝病毒DNA进行荧光定量测量结果的影响。结果未溶血标本与溶血标本相比以及不同储存时间和温度相比，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论标本溶血、储存时间以及温度对荧光定量PCR检测乙肝大三阳血清标本DNA的结果无影响。

简介：摘要目的通过观察我院收治的对宫颈病变患者的临床诊断资料，探讨分析采用实时荧光PCR检测高危型HPV的价值。方法对我院收治的158例宫颈病变患者患者，进行实时荧光PCR检测，分析检测结果，并与第2代杂交捕获法(HC-Ⅱ)的检测结果对比。结果HPV在宫颈癌患者阳性表达率达90%以上,与HC-Ⅱ相比，差异无统计学意义；PCR检测宫颈病变与HC-Ⅱ的检测结果的阳性率分别为74.7%与70.9%，差异无统计学意义（P>0.05）；但两种方法检测HSIL的HPV阳性率明显高于宫颈炎症、湿疣（P<0.01），除LSIL外，其他病变中的PCR检出率均略高于HC-Ⅱ。结论采用实时荧光PCR检测高危型HPV，可用于确诊患者是否患有宫颈癌，提示高危型HPV感染与宫颈病变、宫颈癌发生有一定的相关性，值得进一步推广与应用分析。

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简介：摘要目的评估应用牙槽嵴扩增技术辅助上颌前牙区种植修复的临床效果。方法2005年10月至2010年12月间，应用牙槽嵴扩增技术辅助上颌前牙区种植修复治疗132位患者，共植入种植体202颗。门诊随访6—60个月，评估方法为全景X片，口腔临床检查及患者舒适度调查。对患者植体的留存率、骨吸收等情况进行分析。结果应用牙槽嵴扩增技术辅助上颌前牙区种植修复的植体留存率为97.2%，不同的扩增技术种植体留存率无明显差异，种植体周围骨吸收量无明显差异，90%的患者表示满意。结论应用牙槽嵴扩增技术辅助上颌前牙区种植修复能取得较好疗效。

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简介：摘要目的研究荧光PCR检测MP-DNA在儿童肺炎诊断中临床应用价值。方法选择132例儿童呼吸道感染患者，以0～4岁为试验组，其他年龄段患者为对照组，分别行荧光PCR检测咽拭子或深部浓痰中MP-DNA，被动凝集法检测患者血清中MP-Ab。结果试验组荧光PCR阳性率为20.3%、被动凝集法阳性率为8.5%；对照组荧光PCR阳性率为20.1%、被动凝集法阳性率为30.1%；经卡方检验，荧光PCR检测两组别χ2=0.19，P>0.05无统计学差异，被动凝集法检测两组别χ2=10.7，P<0.05有统计学差异。结论荧光PCR具有特异性强，灵敏度高的特点，尤其在婴幼儿的肺炎支原体检测中，考虑患者免疫系统发育未全因素，荧光PCR更具优势。

简介：摘要目的探讨实时荧光定量PCR对蕲蛇样品真伪鉴别的准确性。方法采用实时荧光定量PCR法从蕲蛇正品、混伪品中提取DNA,进行引物扩增，并通过Cq值和扩增曲线对样品真伪进行判断。结果3批蕲蛇正品的Cq值均低于30，曲线有明显的指数增长期；2批混伪品无Cq值，曲线为一直线。结论本方法鉴别蕲蛇操作简单，准确率高，重现性好，可行有效。

简介：摘要目的评价美国ABIPrism®7000荧光定量PCR仪的性能及应用价值。方法按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的评价标准，对120份标本(HBV-DNA)进行定量检测，评价该仪器的准确性、精密度、线性范围、参考范围等指标。结果准确度相对偏倚为0.3%-7.2%；批内不精密度变异系数（CV）为6.36%，批间不精密度变异系数（CV）为7.15%；线性范围1.0E+3IU／ml-1.0E+7IU／ml；参考范围＜1.0E+3IU／ml。结论ABIPrism®7000荧光定量PCR仪各项性能指标良好，验证通过。ABIPrism®7000荧光定量PCR仪在病毒基因检测具有高效快捷定量的特点，具有很高的临床价值。

简介：摘要目的自制临床基因扩增实验室HBVDNA检测的室内质控品并对其应用进行评价。方法将试剂盒自带的弱阳性对照品、自制未灭活质控血清、自制灭活质控血清作为室内质控品的选择对象，每天与样本一起检测，连续30天，通过不精密度、L-J质控图，t检验，单因素方差分析来评价三者哪一个更适合基层医院PCR实验室作为室内质控品。结果弱阳性对照品检测结果日间不精密度为7.72%,未灭活自制质控血清检测结果日间不精密度为2.92%,灭活自制质控血清检测结果日间不精密度为3.70%；灭活与未灭活自制质控血清配对t检验,t=-0.860，P=0.397，P＞0.05，两组检测结果无显著性差异；对灭活前后两组数据进行单因素方差分析，F=0.901，P=0.346，P＞0.05，两组检测结果均值无显著性差异；SPSS17.0统计学软件绘制弱阳性对照品、未灭活自制血清质控品L-J质控图11月份30天的变化情况。结论自制质控血清无需灭活及其他特殊处理，完全能够满足PCR实验室室内质量控制的需要。

简介：摘要目的对杭州安杰思医学科技有限公司的AFD9600实时荧光定量PCR仪的主要性能指标进行验证，为其检测结果的可靠性提供依据。方法依据《医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明》（CNAS-CL36）和美国临床实验室标准化协会（CLSI）制定的验证标准，验证该仪器精密度、正确度、线性以及灵敏度指标。结果AFD9600定量检测HBV-DNA低值和高值的批内精密度CV分别为1.6%和1.3%，其总精密度CV分别为2.1%和1.6%。正确度3个标准物质检测结果的偏倚为-1.05%～3.49%，均在可接受范围内。线性线性相关系数为0.9992，直线回归方程为Y=0.9937X-0.0697。灵敏度对HBV-DNA浓度5×102IU/mL的检出率均为100%，CV分别为5.97%。结论AFD9600的主要性能指标符合实验要求，可满足临床实验室需求。

简介：摘要目的建立TaqManTM实时荧光pcr检测副溶血性弧菌的快速检测方法，为食物中毒快速准确的定性检测及食品中副溶血性弧菌染菌率的调查提供手段。方法通过分析，最终选择tlh基因作为目的基因，在Genebank进行中查找多条TLH基因序列，并利用DNAssist软件进行同源性分析，选取相对保守区段，用BeaconDesigner软件自行设计引物和TaqManTM探针，并利用核酸提取试剂盒煮沸法制备基因组DNA，通过对TaqManTM实时荧光PCR缓冲液浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、引物浓度和探针浓度等反应条件的优化，初步建立副溶血性弧菌的TaqManTM实时荧光PCR快速检测方法。结果选取的tlh基因同源性达到98.9%以上（13/1234），同源性好。通过对各实验条件的优化，得到副溶血性弧菌TaqManTM实时荧光PCR的最佳反应条件，初步建立TaqManTM实时荧光PCR检测副溶血性弧菌的快速检验方法。结论TaqManTM实时荧光PCR检测灵敏度高、特异性好，而且检测周期短，能提高副溶血性弧菌的检出率和检测准确性。