简介：目的构建人野生型Cx30与红色荧光蛋白DsRed的融合蛋白表达载体,为揭示Cx30突变患者发病机制提供实验依据。方法用PCR法扩增GJB6基因,将PCR产物与T载体连接,用双切酶酶切pEASY-GJB6与载体DsRed-N1,连接回收后的片断,构建野生型Cx30编码序列与PDsRed2表达载体,测序鉴定序列正确性。将GJB6-DsRed用脂质体转染HEK293细胞,荧光显微镜观察表达的融合蛋白。结果GJB6-DsRed在HEK293细胞中高效表达,表达主要位于细胞膜中。结论成功构建了人野生型Cx30与红色荧光蛋白DsRed的融合蛋白表达载体,为进一步研究非综合征性聋的致聋机制奠定了基础。

简介：目的构建6种分别携带GJB2基因错义突变A40G、V37I、L90P、L90V、V84L和W44C的真核表达载体,转染HEK293细胞,建立6种错义突变的稳定表达细胞系。方法以野生型Cx26-EGFP融合蛋白质粒为模板,用Stratagene公司定点突变试剂盒构建错义突变表达载体,直接测序鉴定序列正确性,选取含有突变的载体转染HEK293细胞,G418选择性培养2周,流式细胞仪筛选表达阳性细胞,扩增培养形成稳定表达人Cx26突变的HEK293细胞系。培养细胞用4%多聚甲醛固定,鬼笔环肽和4',6-二脒基-2-苯基吲哚衬染细胞核,荧光显微镜下检测结果。结果6种突变表达载体经过测序,均含有相应突变,无多余突变出现,转染后均可在细胞间形成缝隙连接,呈现绿色荧光。结论成功构建6种携带GJB2基因错义突变的真核表达载体,为进一步研究错义突变致聋原因奠定了实验基础。

简介：目的构建含有人髓细胞白血病基因-1（myeloidcellleukemia-1,MCL1）和绿色荧光蛋白基因（pEGFP）的真核共表达载体,为聋病的基因治疗奠定实验基础。方法应用基因重组技术和限制性内切酶酶切,及基因测序方法,构建并鉴定pEGFP-MCL1真核表达质粒。经脂质体介导转染293细胞系,荧光显微镜下观察pEGFP-MCL1真核表达质粒在293细胞系中的表达,利用逆转录-聚合酶链反应（Reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR）检测MCL1mRNA的表达,WesternBlot（蛋白质印迹）方法检测MCL1蛋白的表达。结果阳性重组子经酶切鉴定含有MCL1基因片段,基因测序结果与GenBank中MCL1序列相同。重组pEGFP-MCL1真核表达质粒转入293细胞系后24小时,荧光显微镜下可见绿色荧光表达,RT-PCR能够扩增出MCL1的条带,WesternBlot检测出40kDa大小的蛋白。结论成功地构建了含有人全长MCL1基因和pEGFP基因的真核共表达载体,且能在哺乳动物293细胞系中表达。

简介：

简介：目的构建含有小鼠Smad4基因和增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）的慢病毒病毒表达载体,为今后应用该重组慢病毒介导的内耳基因导入和相关的聋病基因治疗奠定实验基础.方法利用基因重组、限制性内切酶酶切及基因测序的方法,构建并鉴定pLenti6.3-Smad4-IRES2-EGFP真核表达质粒;利用脂质体介导转染的方法,将pLenti6.3-Smad4-IRES2-EGFP转染导入293T细胞,荧光显微镜下观察EGFP基因表达情况,利用实时荧光PCR的方法检测小鼠Smad4基因mRNA水平的表达情况.结果经PCR鉴定和基因测序证实了小鼠Smad4基因序列与基因bank中的序列相一致.pLenti6.3-Smad4-IRES2-EGFP质粒转入293T细胞后,荧光显微镜下可见有绿色荧光蛋白表达.293T细胞经慢病毒感染后,其小鼠Smad4基因mRNA表达量增加了66427倍.病毒滴度经测定为2.5×108TU/ml.结论成功地构建了含有小鼠Smad4基因的慢病毒表达载体,并能在293T细胞中表达.

简介：1氨基甙类药物及其耳毒性以庆大霉素为主的氨基甙类药物为广谱抗生素，于临床应用已有六十余年。这类抗生素可用于多种细菌感染性疾病，包括术前术后用药和肺结核的治疗”，在国内多用于治疗由革兰氏阴性杆菌引起的脑膜炎以及中或重度肠道感染，而在欧美国家则用于防止早产新生儿败血症。

简介：摘要目的通过对药物过敏急救盒重新改制,规范急救药品管理，提高护士的工作效率。方法改变原来的药物过敏急救盒用透明盒存放并比较改制后与改制前使用的效果。结果改制后药物过敏急救药管理规范，护士核查药品方便，避免了反复取出清点而造成安瓿上的字迹磨损，不易辨认等不良事件的发生。结论透明专用药物过敏急救盒的改制能提高护理安全核查、减少药品的浪费及提高护士工作效率。

简介：组胺（histamine）是机体内组氨酸在L-组胺酸脱羧酶作用下产生的一种化学信使物质，通过4种受体亚型在复杂的免疫调节系统和变应性炎症中发挥重要作用。通过H1受体，组胺可增强抗原提呈细胞的能力，使肥大细胞和嗜碱粒细胞释放更多包括组胺在内的炎性介质，促进嗜酸粒细胞与中性粒细胞的趋化。

简介：从1937年第1个抗组胺药开发至今，H1抗组胺药（H1antihistamines，以下简称抗组胺药）逐渐成为变应性鼻炎（AR）治疗一线用药，在AR药物治疗中占有重要地位。第2代抗组胺药具有起效迅速、维持时间长、1次，d用量、抗胆碱作用与抗组胺作用相分离的特点。AR及其对哮喘的影响（AllergicRhinitisanditsImpactonAsthma，ARIA）指南2010修订版强烈推荐使用口服第2代或新型抗组胺药治疗AR，可有效缓解流涕、喷嚏、鼻痒和眼部症状，对鼻塞有一定程度的改善。

简介：摘要静脉药物配置中心在我国尚处于初级阶段，许多制度有待建立健全，补充和完善。十年的工作实践，我们从困难和挫折中，不断总结出许多容易引发差错事故的环节和诱发因素，从而改进优化工作流程，健全规章制度及防控措施，积累了一些经验和体会。(1)首先加强药配人员思想教育;(2)加强业务理论知识的学习和培训;(3)诚信做人，慎独做事;(4)严格落实各项规章制度;(5)认真做好差错隐患登记。确保病人静脉用药安全准确、高效。为医院医药护全面发展作出贡献。

简介：摘要目的探讨结膜瓣遮盖术联合药物氟康唑治疗真菌性角膜溃疡的临床疗效。方法将48例(48只眼)真菌性角膜溃疡患者随机分为联合组和手术组，每组各24例。手术组术中刮除溃疡表面坏死组织，予20g/L碘酊烧灼溃疡灶10s，50mL生理盐水冲洗溃疡灶。根据渍疡位置、大小分离桥状或舌状结膜瓣，缝合固定于溃疡面上。联合组在手术组的基础上并于术中，术后第3、10d前房注入氟康唑0．1mL(0．05mL2g／L氟康唑+0．05mL生理盐水)。结果联合组患者治愈率为67％，手术组为63％。联合组患者好转率为83％，手术组为83％。2组患者在治愈率、好转率上均不存在显著性差异(P>0．05)。两组常见并发症主要为炎症、虹膜前粘连、继发青光眼以及巩膜瓣下前房窥不清。联合组患者炎症、虹膜前粘连的发生率（2/24）显著性低于手术组(11/24)(P<0．05)，而继发青光眼以及巩膜瓣下前房窥不清的发生率2组比较无显著性差异(P>0．05)。治疗后3个月，两组患者矫正视力比较，无统计学差异(P>0．05)。结论在真菌性角膜溃疡结膜瓣遮盖术治疗的同时，适时的使用氟康唑前房注入是一种行之有效的方法，适用于广大基层医院开展。

简介：目的观察Ginaton（金纳多）和Duxil（都可喜）治疗感音神经性耳聋的效果。方法采用随机分组法，观察治疗组（给予金纳多和都可喜）和对照组（使用复合维生素B和维生素C）各50例，疗程30天；治疗前后检测纯音听阈并观察副作用。比较两组间总有效率和副作用的差异。结果治疗组总有效率为32％（16／50），与对照组的12％（6／50）相比有显著性差异（P〈0．05），两组均无严重副作用。结论金纳多和都可喜对治疗感音神经性耳聋具有一定的疗效。

简介：目的比较腺病毒、脂质体、纳米材料三种不同类型的载体携带目的基因对293T细胞的转染效率及细胞毒性的大小,筛选理想的基因载体。方法用重组腺病毒、Lipofectamine^TM2000、Entranster^TM—D纳米材料为转染载体,携带含有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因的Math1-EGFP基因及真核表达质粒pRK5-Math1—EGFP，按照转染试剂盒说明优化其转染条件，分别转染293T细胞。24小时后在共聚焦显微镜下观察转染结果并计数阳性细胞率，采用RT—PCR法检测转染细胞中Math1基因mRNA的表达，用MTT法检测不同转染条件下，不同转染载体对293T细胞的细胞毒性。结果经优化转染条件，重组腺病毒载体转导的细胞中荧光蛋白表达几乎为95％以上,Lipofectamine^TM2000、Entranste^TM-D纳米材料载体转染的细胞中荧光蛋白表达也分别达到70％和80％以上，而Entranste^rTM-D纳米材料载体在最高转染效率的剂量下仍然保持80％以上的细胞生存率。RT-PCR进一步证实，三种载体转染细胞均有Math1基因mRNA的表达。结论Entranster^TM—D纳米载体作为一种新型纳米聚合物转染试剂，能成功携带内耳基因治疗关键基因Math1基因转染293T细胞，并表现了低毒、高效性能。

简介：摘要目的比较研究术前术后使用抗菌药物对预防剖宫产术后感染的影响。方法将本院268例剖宫产产妇纳入研究对象，采用数字表法分为观察组和对照组各134例。对照组于术后常规预防性使用抗菌药物，观察组于术前1h及术后24h各使用1次抗菌药物，观察两组切口及宫腔感染发生率。结果观察组产妇术后3d体温（36.81±0.57）(oC)、CRP（70.5±8.3）(mg/L)、WBC计数（5030.10±50.00）(×109/L)、术后感染发生率（4.48%）、抗生素平均费用(11.4元)均明显低于对照组（p<0.05）。结论术前1h预防性使用抗菌药物可有效降低剖宫产术后感染发生率。

简介：摘要随着艾滋病这一危害人类健康的严重疾病在世界范围的蔓延，我国艾滋病流行趋势十分严峻。在全民预防AIDS传播的队伍中，护理人员始终站在这道防线的最前沿。在管理措施、技术服务，心理护理等方面都起了重要的作用。

简介：

简介：目的探讨HSP60在大鼠耳蜗中的表达及硫酸卡那霉素损伤后的表达变化。方法正常成年雌性SD大鼠20只随机分为两组：对照组（生理盐水）和实验组（硫酸卡纳霉素）,按500mg/kg剂量每天给药一次,连续腹腔注射21天。ABR检测听力变化;实时定量PCR和WesternBlot分别检测HSP60的mRNA和蛋白表达量的变化;免疫荧光染色观察HSP60在耳蜗中的表达变化及分布。结果ABR检测显示实验组较对照组明显升高（P〈0.05）。实时定量PCR、WesternBlot和基底膜铺片免疫荧光染色的结果显示实验组HSP60表达量降低（P〈0.05）。冰冻切片免疫荧光染色,观察到HSP60表达于Corti器上的支持细胞内。结论HSP60表达于支持细胞,正常生理情况下即表达,慢性药物中毒性耳聋模型中表达量降低,推测HSP60可能参与了药物性耳聋的发生过程。

简介：2007年《欧洲慢性鼻窦炎鼻息肉诊疗指南》(EPOS-2007)推荐低剂量、长期使用大环内酯类药物作为慢性鼻及鼻窦炎(chronicrhinosinusitis,CRS)的治疗方案受到广泛的关注[1]。越来越多的证据显示大环内酯类药物不仅通过抑菌发挥作

简介：摘要目的通过对骨折伴发肺部脂肪栓塞综合征(FES)早期诊治的疗效分析，总结对骨折伴发FES的诊治方案。方法对我科2008年-2011年收治的22例和2012年-2014年6月收治的32例骨折伴发FES患者诊治效果进行对比分析。结果2008年至2011年的22例骨折伴发FES患者中，经过实验室和影像学检查确诊后再进行治疗，治疗时间在两周左右，三例死亡，治愈率为86.4%；2011年至2014年6月的32例骨折伴发FES患者中，均做到早期诊治，28例患者的治疗在普通病房完成，治疗时间3～7d；4例患者到重症监护室给抢救治疗，治愈率为100%。结论骨折伴发FES患者需早期及时必要的治疗，能提高其治愈率，同时减少费用。

简介：自从德国生理学家Mtiller于1838年首次提出“胆脂瘤”概念以来，人们对胆脂瘤的发病机制进行了大量的研究，主要集中在上皮细胞过度增殖、骨质破坏吸收和胆脂瘤上皮细胞凋亡三个方面，但其发病机制至今尚未明确。