简介:摘要:目的:MDCK细胞为犬肾成纤维细胞,呈不规则圆型梭状。本实验是为了选择优质的细胞培养基础培养基,满足MDCK细胞贴壁增殖的需要,制备优良的MDCK细胞,为下一步制备流感病毒疫苗打下好的基础。方法:本次实验研究主要是选择不同的细胞培养基础培养基,MEM、DMEM(高糖)、DMEM(低糖),采用来源于美国ATCC提供的MDCK细胞进行贴壁连续传代培养,连续同等条件下传3代,通过镜下观察及细胞计数比较MDCK细胞,应用不同培养基连续传代培养的效果。结果:通过显微镜下观察及细胞计数,综合评价细胞生长效果,选择出适合于MDCK细胞贴壁培养的最佳基础培养基。结论:通过对以上结果的分析,MEM基础培养基及DMEM(H)基础培养基均可用于MDCK细胞培养,但是MEM基础培养基可保持稳定的细胞对数生长期,DMEM(H)促进细胞前期生长较快。
简介:【摘要】 目的:大肠埃希菌显色培养基(ECM)的研制与性能评价。 方法:在单因素实验的基础上选择胆盐、乳糖、显色底物三因素,采用响应曲面法,优化筛选最佳工艺参数;对ECM进行显色时间、生长率及特异性评价。 结果:通过单因素实验结合响应曲面法(RMS)筛选出ECM的最优工艺为:琼脂15g/L,蛋白胨15g/L,氯化钠5g/L,乳糖11.4g/L,胆盐1.1g/L,显色底物0.5g/L;评价结果显示:1.大肠埃希菌在ECM上的显色时间为18-24小时;2.与NA相比,ECM生长率达(90.6±12.8)%,且与EMB的生长率无统计学差异(P>0.05);3. ECM对大肠埃希菌具有良好的特异性,且与同类产品相比无明显差异。 结论:本研究开发的ECM性能良好,能够用于大肠埃希菌的快速检测,值得推广。
简介:摘要:目的 探讨分析将TTC培养基法用于食品微生物检验的作用。方法 选取2022年10月到2023年3月期间于我中心进行检验的200份食品样本进行研究,全部样品均接受实验室综合检验法进行检验,将其作为“金标准”。同时,通过平板菌落计数法以及TTC培养基法进行检验,统计检出率。结果 TTC培养基法的微生物检出率与实验室综合检验法对比差异较小,对比无统计学意义(P>0.05);平板菌落计数法的检出率较TTC培养基法的微生物检出率与实验室综合检验法更低,对比有统计学意义(P<0.05)。结论 将TTC培养基法用于食品微生物检验的效果极为理想,能够有效提高微生物的检出率。
简介:摘要目的观察并比较脐带间充质干细胞(MSC)及其条件培养基(MSC-CM)对脓毒症小鼠肠道菌群的调节作用。方法将28只6~8周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)、脓毒症+MSC干预组(CLP+MSC组)、脓毒症+MSC-CM干预组(CLP+MSC-CM组),每组7只。通过盲肠结扎穿孔术(CLP)构建脓毒症小鼠模型;Sham组不进行盲肠结扎和穿孔,余操作同CLP组。CLP+MSC组和CLP+MSC-CM组术后6 h分别经腹腔注射0.2 mL 1×106 MSC和0.2 mL浓缩MSC-CM;Sham组和CLP组腹腔注射0.2 mL无菌磷酸盐缓冲液(PBS)。通过组织苏木素-伊红(HE)染色及结肠长度评估组织病理学改变,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清炎症因子水平,通过流式细胞术检测腹腔巨噬细胞极化表型,通过16S rRNA测序分析肠道菌群。结果与Sham组比较,CLP组小鼠肺组织出现显著炎症病变,结肠长度明显缩短(cm:6.00±0.26比7.11±0.09),血清促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)水平显著升高(ng/L:432.70±17.68比353.70±17.01),腹腔巨噬细胞F4/80+比例显著升高〔(68.25±3.41)%比(50.84±4.98)%〕,抗炎型巨噬细胞F4/80+CD206+比例显著降低〔(45.25±6.75)%比(66.66±3.36)%〕,肠道菌群α多样性sobs指数显著降低(118.50±23.25比255.70±6.87),物种组成结构改变,与转录、次生代谢物生物合成及运输与代谢、糖类运输与代谢、信号转导功能相关的菌群的相对丰度显著降低(均P<0.05)。与CLP组比较,MSC和MSC-CM干预可不同程度地减轻小鼠肺组织和结肠组织病理损伤,延长结肠长度(cm:6.53±0.27、6.87±0.18比6.00±0.26),降低血清IL-1β的水平(ng/L:382.10±16.93、343.20±23.61比432.70±17.68),降低腹腔巨噬细胞F4/80+比例〔(47.65±3.93)%、(48.68±2.51)%比(68.25±3.41)%〕,增加腹腔抗炎型巨噬细胞F4/80+CD206+比例〔(52.73±5.02)%、(66.38±4.73)%比(45.25±6.75)%〕,上调肠道菌群α多样性sobs指数(182.50±16.35、214.00±31.18比118.50±23.25),且以MSC-CM组变化最显著(均P<0.05)。同时,MSC和MSC-CM干预可重塑肠道菌群的物种组成,并表现出相关菌群相对丰度升高的趋势。结论MSC和MSC-CM均可改善脓毒症小鼠组织炎症损伤,调节肠道菌群,且MSC-CM的干预效果优于MSC。
简介:摘要:目的:探讨一种适用于脐血来源的体外NK细胞激活和扩增的培养基组合物及培养方法。方法:应用Ficoll法,从健康志愿者捐赠的脐血中分离出PBMC,运用本培养基组合物,包含基础培养基、IL-2、IL-18和非细胞因子类促炎因子(人重组血清淀粉样蛋白A(SSA)和脂多糖(LPS))及培养方法,体外培养2周后,流式细胞仪检测其表面标志物,并隔天计数绘制细胞增殖曲线,观察效应细胞(NK细胞)按效靶比 1:1、5:1、10:1与20:1对肿瘤细胞(K562-Luc)的杀伤作用。结果:通过14d的培养,细胞扩增可达(594±42)倍,最终NK细胞比例(CD3-/CD56+)为(99.38±0.09)%,对靶细胞K562-Luc作用24h的杀伤效率为>90%(效靶比10:1)。结论:利用本方法提供的培养基组合物,成分简单明确,培养得到的NK细胞纯度更高,且具有更快的增殖效率,对肿瘤细胞的杀伤作用强。
简介:摘要:在我国经济发展进入到新常态的同时,高等教育的发展呈现出一些重要的特征:从发展环境看,人才市场的供需关系正在随着国家产业转型升级的进程发生根本性的变化,正在从主要以高校的供给为驱动转变成以企业的需求为驱动。从发展定位看,在落实创新发展理念、实施创新驱动战略的同时,社会对拥有高素质的科技人才的需求也不断增加。高等教育的角色定位也逐渐发生变化,从以前的支持服务转为服务和引领同步。本文主要对电子信息科学与技术一流专业人才培养基层教学组织建设的思考进行论述,详情如下。