简介：目的：克隆并表达caspase-8／10相关RING结构域蛋白1（CARP1）基因，检测其泛素连接酶活性。方法：提取结肠癌HCT116细胞总RNA，RT-PCR扩增CARP1基因，将其克隆到真核表达载体pcDNA3-Flag中，序列正确的阳性克隆进行扩增，提取质粒转染至293T细胞中进行瞬时表达，通过体内泛素化检测其泛素化酶活性，通过萤光素酶报告基因的方法检测其对NF-kB转录活性的影响，利用细胞生长曲线检测CARP1基因对结肠癌细胞生长的影响。结果：免疫印迹实验表明CARP1基因在293T细胞中获得有效表达；免疫共沉淀实验表明，当CARP1存在时，受体相互作用蛋白1（RIP1）被泛素化；萤光素酶实验结果表明CARP1抑制肿瘤坏死因子a（TNFa）引起的NF-kB报道基因的激活；通过生长曲线发现CARP1能促进结肠癌细胞系HCT116生长，并能部分抵抗顺铂抑制细胞生长的作用。结论：构建的人CARP1基因真核表达载体在293T细胞中获得表达，表达产物具有RIP1泛素连接酶的活性，可抑制TNFa引起的NF-kB报告基因的激活，并且促进结肠癌细胞的生长，为进一步的基因功能研究奠定了基础。

简介：目的：获得抑制效果好的泛素C端水解酶LI（UCH—L1）基因小干扰RNA（siRNA）干扰载体。方法：根据Gen—Bank中大鼠UCH—L1基因序列设计并合成4对siRNA寡核苷酸序列，将4对寡榱苷酸序列退、k成双链后分别插入siRNA表达载体pcDNA6．2-GW／EmGFP—miR中构建4个siRNA表达质粒，测序鉴定后将4个siRNA表达磺牝分别转染HEK293细胞，利用Western印迹和qPCR方法检测干扰效果；将干扰效果最好的质粒包装成腺病毒，感染大汛血管平滑肌细胞（VSMC），并采用TNF-a干预诱导UCH—Ll表达升高，Western印迹验证干扰效果。结果：测序分析证实4对siRNA寡核苷酸序列分别插入siRNA表达载体pcDNA6．2-GW／EmGFP—miR；qPCR检测与Western印迹均表明第3号siRNA表达载沐对UCH—Ll表达的抑制程度最高，将其包装成腺病毒并转染VSMC能显著抑制TNFd湾导的U（：H—I。l表达升高。结论：构建并筛选出干扰效果好的UCH—LlsiRNA干扰载体。

简介：通过对皮卡汀尼导轨和燕尾式导轨连接结构的分析，提出瞄准镜与枪械连接结构应具有的特点，即结合瞄具方便快捷、瞄具位置可调、具有自动补偿磨损机制和良好的抗冲击性能，并据此提出新的枪-瞄连接结构设计方案．同时，应用瞄准原理分析枪械上瞄准镜座的高低、方向及前后位置对射击精度和瞄准镜分划刻制的影响．

简介：对45个离褶伞属真菌菌株进行酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）分析,分析其酶谱多态性,并采用聚类分析方法对菌株间的亲缘关系进行鉴定。结果表明：在45个离褶伞属菌株酯酶同工酶酶谱中,共检测到了10条相对迁移率不同的酶带,多态性较高,并且在相似系数为0.75时,可将供试菌株分为4类,第一类包括17个菌株,第二类包括16个菌株,第三类包括11个菌株,第四类包括1个菌株。

简介：目的探讨乳腺癌组织中膜联蛋白（annexin）A2表达异常及其泛素化调节机制，annexinA2与乳腺癌TNM临床分期的关系，泛素化调节annexinA2表达异常在乳腺癌发生发展中的作用。方法选择2008年9月至2009年9月在本院普外三科确诊为乳腺癌的10例患者手术切除的新鲜组织，包括组织病理学证实的乳腺癌组织10份及癌旁形态学相对正常组织10份（直径〉2cm）为研究对象。组织切除后，立即液氮保存待用。采用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳（2DE）技术，对乳腺癌组织及其癌旁正常组织的蛋白质进行分离，Westernbloting法检测该蛋白质的泛素化（免疫蛋白质组学）情况，取稳定出现的差异阳性蛋白质点进行基质辅助激光解吸/电离时间飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）、质谱/质谱串联（MS-MS）及生物信息学分析。通过免疫组化染色技术，对annexinA2在乳腺癌组织及其癌旁正常组织中的表达水平，与乳腺癌TNM临床分期的关系进行观察，并对结果进行统计学分析（本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准，征得受试对象本人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书）。结果对4个在乳腺癌组织标本及其癌旁正常组织中明显表达差异的蛋白质点，经质谱鉴定和数据库比对的结果为小泛素相关修饰因子3前体（SMT3A）、蛋白酶体亚单位a型1（PSMA1）、annexinA2及核糖体蛋白S12（RPS12）。免疫组化检测在TNM临床分期为0，Ⅰ，Ⅱ及Ⅲ期的乳腺癌组织标本中，annexinA2表达的阳性率及强阳性率分别为75.0％（6/8）与37.5％（3/8），100.0％（14/14）与42.9％（6/14），100.0％（10/10）与66.7％（4/6）及100.0％（6/6）与50.0％（5/10）。在TNM临床分期不同的乳腺癌组织中，annexinA2表达的阳性率及强阳性率比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）。annexin

简介：目的：从海参体壁组织中分离提取蛋白酶体,研究其酶学性质。方法：新鲜海参组织经匀浆、Tris-HCl缓冲液浸提后得到粗提物,再经（NH4）2SO4盐析、二乙氨乙基葡聚糖纤维素和丙烯葡聚糖凝胶S-300分离纯化后得到海参蛋白酶体。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,其分子质量200ku。结果：海参蛋白酶体特异性最强的检测底物Boc-GAA-MCA,最适pH8.0,最适反应温度45℃。40℃时蛋白酶体活性稳定,在1h的孵育过程中呈现一定的热激活效应。在50~60℃,酶活力随孵育时间的延长迅速下降。K＋、Ca2＋、Mg2＋、Zn2＋均可明显抑制其活性。抗痛素、N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮、N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮及E-64均可显著抑制该蛋白酶体活性。结论：海参体壁蛋白酶体具有典型的蛋白酶体的复合型活性,其中胰蛋白酶样活性较强,之后是糜蛋白酶样活性,而肽基谷氨酰肽水解酶样活性最弱。

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简介：氨基甲酸乙酯是发酵食品天然产生的1种2A级致癌物。建立以氨基甲酸乙酯脱氨酶为基础的生物清除方法,在食品安全方面具有重要意义。利用单因素比较方法,通过测定比酶活,对氨基甲酸乙酯脱氨酶的发酵条件和酶学性质进行研究。结果表明,氨基甲酸乙酯的最适发酵条件是：以15.0g/L麦芽糖为碳源,5.0g/LNH4Cl＋5.0g/L酵母膏为氮源,7.5g/L氨基甲酸乙酯,培养温度28℃,起始pH5.5。培养菌株枯草芽孢杆菌ZJ0930h后,氨基甲酸乙酯脱氨酶的比酶活达到最大值18.86U/mL。经盐析、离子交换和膜浓缩后,氨基甲酸乙酯脱氨酶的纯化倍数达到174,冷冻干燥的酶粉比活力为32186U/g。氨基甲酸乙酯脱氨酶的最适催化温度45℃,最适反应pH4.0。该酶具有一定的热稳定性,在酸性环境的催化活力和稳定性较好,适当浓度的Zn2＋和Mg2＋对酶活有显著促进作用。菌株ZJ09所产氨基甲酸乙酯脱氨酶具有良好的催化能力,易于发酵制备,是一种值得深入研究和开发的食品用酶,具有广泛的产业化应用前景。

简介：调研公司PointTopic日前公布数据称，全球DSL连接数在去年第四季度首次出现下滑，降至约3．67亿，但综合来看，目前DSL连接数仍占全球宽带连接总数的57％。

简介：生长断层往往作为沉积盆地的边界断层控制和影响着盆地的演化。国外学者通过对野外断层位移量和断层长度的观测与分析，指出了断层的生长表现为断层位移量和断层长度的增加：断层生长和连接有2种方式；单条断层的生长表现为断层最大位移量与断层长度之间呈比例关系的常规生长模型．以及先进行断层长度的生长再进行断层位移量生长的补充生长模型。断层生长后期在断层端的相互作用下发生断层的连接是形成大型断层的重要方式。结合国内外研究现状，对断层生长研究的主要模型进行综述．并在此基础上讨论了断层生长连接的特点。

简介：比较分析了接线端子、连接引线、不可拆卸的软缆或软线二三种常见的电源连接方式，论述了三者之间的差异、特点和火联性，提出采用接线端子电源连接方式的灯具结构比较完整，建议灯具结构设计应尽可能采纳接线端子电源连接方式。

简介：摘要目的比较理论K值和酶校准品K值所测酶活性结果差异，使血清酶活性测定结果更加准确。方法在贝克曼DXC800全自动生化分析仪上，分别用理论K值和酶校准品的K值测定同一质控物的6种酶活性，进行偏差比较和可接受性判断。结果除AST外，其它5种酶的校准K值测定结果的相对偏差都明显小于理论K值测定结果的相对偏差，理论K值测定结果，AST小于1/2CLIA’88(%)允许误差，可接受，γ-GGT、ALP、AST、ALT、CK和LDH大于1/2CLIA’88(%)允许误差，不可接受，校准K值测定结果，γ-GGT和LDH结果相对偏差大于1/2CLIA’88(%)允许误差，不可接受，ALP、ALT、AST和CK相对偏差均小于1/2CLIA’88(%)允许误差，可接受。结论建议临床实验室使用适合生化检测系统的酶校准品K值测定血清酶活性。

简介：现在，我们工作忙了，应酬常了；朋友多了，聚会密了；生活好了，饭桌丰富了。这样一来，难免萼消化不良。，这时候，多酶片就派上用场了。

简介：

简介：学界对于纪效连接成分“难怪”的研究多集中于汉语本体方面，主要表现在：注重对“难怪’’词汇化、语法化的探讨，注重从因果复句和篇章角度观察“难怪”的用法和功能。综观这些研究成果，对于纪效连接成分“难怪”的研究还可以从“难怪”前后项的语义关系、“难怪”与其他纪效连接成分的异同、“难怪’’在留学生语篇使用中的偏误等几个角度入手。

简介：摘要本装置是一种保护机用丝锥的连接装置，它是由滑杆、滑筒、轴销、莫氏锥柄、标尺、定位调整螺母、扭矩卸除槽等主要结构组成。滑杆装在滑筒内，滑杆一端装有轴销，轴销可在滑筒两侧的滑道内轴向自由滑动，并传递扭矩。定位螺母可根据加工尺寸调整定位，标尺的使用实现了攻丝深度的可控，滑筒另一端的扭矩卸除槽保证攻丝到位时轴销滑出滑道空转实现消除扭矩，有效保护机用丝锥。

简介：本实验以牛骨为原料，以水解度为牛骨蛋白酶解液酶解程度的指标，确定了木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶双酶分步水解牛骨的工艺条件：将粉碎粒度为10mm-20mm的牛骨碎片，在2kg／cm^2的高压蒸汽压下烝煮3h，降温至50℃，后调节pH6．5，后加入木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶双酶分步水解，通过正交试验确定了小瓜蛋白酶酶解工艺：酶解温度为50℃，pH为6．5，酶解时间为3h，E／S为4000U／g；碱性蛋白酶酶解工艺：酶解温度为65℃，pH为8．5，酶解时间为3h，E／S为7000U／g。并对酶解液前后的氨基酸种类和含量进行了比较，酶解后较酶解前多了苯丙氨酸和色氨酸，各氨基酸含量较酶解前明显增加，为牛骨蛋白水解液制备肉味香精提供了依据。

简介：摘要目的探讨血清胰淀粉酶（P-AMY）、脂肪酶（LPS）对急性胰腺炎（AP）的诊断价值，并与血清淀粉酶（AMY）进行比较。方法对41例AP患者和49例非急性胰腺炎（NAP）患者血AMY、P-AMY和LPS进行检测，AMY用酶比色法(EPS-G7法)，Lps用酶比色法，P-Amy用酶比色法(EPS-G7法)。结果用AMY、P-AMY和LPS诊断AP，其AP组的阳性率显著高于NAP组（P<0.01）。AMY诊断AP的敏感性为82.9%，特异性为83.7%；P-AMY诊断AP的敏感性为92.7%，特异性为93.9%；LPS诊断AP的敏感性97.6%，特异性为97.9%，P-AMY、LPS诊断AP的敏感性和特异性显著高于AMY（P<0.05）。结论P-AMY和LPS对AP的诊断有较高的敏感性和特异性，优于AMY，因此，可以用P-AMY和LPS测定代替AMY测定来诊断AP，提高AP诊断的准确率。

简介：摘要目的讨论淀粉酶测定。方法对患者进行生化检测并做出诊断。结论淀粉酶测定是临床上诊断胰腺疾病常用的方法。