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  • 简介:摘要目的制备特异性抗镰刀鸡卵黄抗体(IgY)并检测其对温度和pH的耐受性及抗真菌作用。方法取22周龄莱杭母鸡18只,采用随机数表法将其随机分为阴性对照组和实验组,每组9只。制备灭活镰刀菌丝悬液,将菌丝浓度2×107菌落形成单位(CFU)/ml的悬液与弗氏完全佐剂等体积混合充分乳化后,对实验组莱杭母鸡进行免疫,每只鸡注射1 ml,2周后换为弗氏不完全佐剂加强免疫。在免疫后的第5~16周每周收集卵黄,用硫酸铵盐析法制备IgY,将得到的蛋白溶液放入冻干机中制作成冻干粉,4 ℃保存。以质量分数0.9%氯化钠溶液代替悬液按照同样方式进行阴性对照组莱杭母鸡的注射,以制备非特异性抗体作为实验中的阴性对照。采用考马斯亮蓝法测定特异性IgY蛋白浓度,采用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定其效价。将1×105 CFU/ml和1×103 CFU/ml镰刀悬液与不同浓度IgY及磷酸盐缓冲液(PBS)混合培养4 d后测定吸光度(A)值,用PBS及非特异性IgY与镰刀悬液共孵育作为空白对照组及阴性IgY组,绘制抗镰刀IgY的抑曲线。用pH 7.4的PBS将特异性IgY溶液稀释至0.02 mg/ml,分别在30、40、50、60、70、80和90 ℃水浴中孵育30 min后冷却至室温;此外,用pH值为l、2、3、4、5、6、7、8、9、l0、11和12的PBS将特异性IgY溶液稀释至0.02 mg/ml,4 ℃下放置1 h,均采用间接ELISA法测定抗体活性,评估IgY对不同温度和pH的耐受性。取SPF级8周龄雌性C57BL/6小鼠12只,采用随机数表法将其分为PBS对照组和特异性IgY治疗组,每组6只。用镰刀感染小鼠右眼角膜,建立小鼠真菌性角膜炎动物模型,建模后1 d,特异性IgY治疗组用200 mg/ml特异性抗镰刀IgY点眼,PBS对照组用PBS点眼,于感染后1、3和5 d在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜,根据炎症评分表对真菌性角膜炎的严重程度进行评分。结果免疫后第5~16周的IgY蛋白质量浓度分别为1.57、2.89、24.98、25.09、23.89、25.78、21.57、21.37、18.98、15.78、14.67和12.67 mg/ml。特异性抗镰刀IgY的效价从第5周开始升高,第7周时达到最高效价,为1∶10 000,可维持至免疫后12周,12周后抗体效价逐渐下降。抑曲线显示,与空白对照组和阴性IgY组相比,特异性IgY治疗组镰刀生长缓慢。抗体效价高于1∶10 000的特异性IgY在60 ℃以下具有较好的热稳定性;在pH 4~6具有最高活性,在pH 3~9的免疫活性能够保持在70%以上,随着pH值的进一步降低或升高,其活性迅速降低。镰刀感染后1、3和5 d,PBS对照组角膜炎症评分分别为3.50±0.55、7.33±0.82和4.00±0.63,特异性IgY治疗组角膜炎症评分分别为3.33±0.82、4.17±0.75和2.50±0.55。2个组不同时间点炎症评分总体比较,差异均有统计学意义(F分组=247.35,P<0.05;F时间=23.19,P<0.05),其中镰刀感染后3 d和5 d,与PBS对照组相比,特异性IgY治疗组小鼠真菌性角膜炎炎症评分降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论用硫酸铵盐析法可成功制备高效价特异性抗镰刀IgY,其稳定性高,对温度和酸碱度均有一定的耐受性,可以在小鼠的真菌性角膜炎模型中减轻角膜溃疡的严重程度,降低炎症评分。

  • 标签: 真菌性角膜炎/治疗 镰刀菌 抗体 效价 鸡卵黄抗体
  • 简介:镰刀是自然界重要的真菌类群,有害有益,鉴定分类困难。文章着重介绍镰刀的分类系统和分类方法,及其目前的研究现状,为进一步开发镰刀资源夯实了理论基础。

  • 标签: 镰刀菌 分类系统 基础研究
  • 简介:在食品中,霉菌毒素脱氧雪腐镰刀烯醇(DON)常与其共轭物3-B—D-葡萄糖苷(D3G)共存在植物酵素催化作用下,DON通过糖基化作用转化为D3G,但其具体的过程尚不清楚为研究发芽谷物中的酶促糖基化作用,本研究在实验条件下将DON处理过的谷粒进行浸泡和发芽试验,并分析该过程中受污染的大麦中DON含量的变化。整个实验过程中,DON与其衍生物的含量均通过HPLC—MS/MS来测定.在六种被测谷物中,小麦、黑麦、大麦、斯佩耳特小麦和小米可在发芽过程中将DON转化为D3G,而燕麦无这一作用。其中小麦,大麦和斯佩耳特小麦的初始DON含量的50%均转化为D3G、由于D3G消化时可能会被裂解,导致D3G浓度升高,进而影响食品和啤酒加工过程DON含量的测定,发芽过程对“隐性”DON的产生有很大影响,可促使DON生成大量D3G,且在常规毒素分析中无法被检测出。

  • 标签: 霉菌毒素 隐性霉菌毒 素脱氧雪腐镰刀菌醇(DON) DON-3-葡萄糖苷Ac—DON发芽 制麦
  • 简介:

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  • 简介:目的观察镰刀毒素单端孢霉烯族化合物脱氧雪腐镰刀烯醇(DON)对培养心肌细胞Ca2+通道单通道电活动的影响.方法取新生1~2日龄Wistar大鼠,分离心肌细胞,培养基为80%DMEM与20%小牛血清,于37℃,在含5%CO2与95%空气的培养箱内进行培养,于培养24~48h期间进行实验记录.采用贴附式膜片钳技术,记录心肌细胞B、L、T三型Ca2+通道单通道电活动为加入毒素前对照,然后向培养基中加入1mg·ml-1DON,以观察DON对心肌细胞Ca2+通道单通道电活动的影响.结果DON浓度为1mg·ml-1时,心肌细胞B,L,T三型Ca2+通道均受到明显的阻滞.其阻滞作用表现在使B、L、T三型Ca2+通道的开放时间分别缩短47.3%,42.1%和17.1%,关闭时间分别延长283.3%,92.8%和40.7%,使通道的开放概率分别下降77.8%,71.1%和42.8%.而对流过B,L,T三型Ca2+通道的Ba2+流幅值均无明显影响.结论DON能抑制大鼠培养心肌细胞的Ca2+通道.

  • 标签: 镰刀菌毒素 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 心肌细胞 CA^2+通道 阻滞作用
  • 简介:报告1例由茄病镰刀感染引起的角膜溃疡。患者男性,40岁,木工,左眼红、痛、流泪、视力下降10d。经过角膜清创,系统性及局部抗真菌治疗后好转。致病菌株经真菌学鉴定为茄病镰刀,它是真菌性角膜炎的常见致病菌之一。真菌性角膜炎病程进展迅速,能否及早诊治关系预后。真菌学检查是确诊的依据,临床应予重视。

  • 标签: 茄病镰刀菌 角膜溃疡 真菌性角膜炎
  • 简介:镰刀是农作物和经济作物的重要病原,其产生的真菌毒素可危及人畜健康.近十几年来欧美的科学家在研究技术上有新的突破,使镰刀属种的概念在认识上有迅速的发展,尤其是那些引起谷类作物严重病害,并产生毒素的种类.在我国,从谷类粮食、饲料中检出镰刀毒素的现象屡有报道,我们对镰刀属种以及产生这些毒素的菌种(菌株)的认识还有待进一步加强.

  • 标签: 分类系统 形态学种的概念 系统发育学种的概念
  • 简介:四十岁生日的那天晚上,我又把那个叫老田驴的男人梦到了。那一天我的心情本来不错,上午刚到单位便领到了一笔奖金,中午妻子煞费苦心地为我张罗了生日宴,傍晚时分还接连收到两个女人心照不宣的祝福短信。照这样的情形,夜晚的梦是应该更加美好的。应该是在星光大道上拣到了夜明珠,应该是买彩票中了5000万的大奖,应该是和章子怡一起跳舞,和杨紫琼乘着窄窄的皮筏艇去巴厘岛旅游。但我却把老田驴梦到了。

  • 标签: 镰刀 夜明珠 章子怡 巴厘岛 杨紫琼 生日
  • 简介:目的报道1例茄病镰刀引起的足部透明丝孢霉病。方法询问病史及体检,取足部的皮损行皮肤病理检查、真菌培养及致病菌的形态学观察、鉴定。结果致病菌为茄病镰刀,给予局部病灶切除及伊曲康唑治疗,随访3个月,病灶明显缩小。结论本病例证实为茄病镰刀引起的足部透明丝孢霉病,经口服伊曲康唑及局部病灶切除治疗,疗效明显。

  • 标签: 茄病镰刀菌 透明丝孢霉病 伊曲康唑 切除术
  • 简介:从山西省13个主要土壤类型的1012个土壤样品中分离出镰刀333株,依据布斯的镰刀属分类系统鉴定其中1株为中国新记录种——柔毛镰刀(FusariumflocciferumCorda),并对其进行描述和讨论。菌种保存于山西农业大学农学院植物病理实验室。

  • 标签: 柔毛镰刀菌 新记录种 中国
  • 简介:目的报告1例茄病镰刀霉引起的皮肤透明丝孢霉病。方法从患者皮损取材作真菌镜检、培养及组织病理学检查。结果直接镜检及组织病理切片均发现真菌菌丝,3次培养均为同一菌株生长。镜下可见大分生孢子基部细胞短、钝圆,小分生孢子呈假头状着生,可见厚壁孢子。根据以上形态学特征鉴定为茄病镰刀。结论对于透明丝孢霉病应早期诊断,并进行体外抗真菌药物的敏感试验,明确并有效控制基础疾病。

  • 标签: 茄病镰刀菌 透明丝孢霉病 皮肤
  • 简介:目的采用临床分离的茄病镰刀感染树鼩角膜,建立茄病镰刀性角膜炎树鼩模型。方法茄病镰刀接种到沙保氏培养基,26℃培养箱培养7d,收集真菌混悬液,血细胞计数板调整孢子数量为1×10^10CFU/mL。清洁级树鼩40只随机分为实验组(n=30)、对照组(n=10)。实验组用胰岛素针头(29G)将真菌孢子混悬液50μL注入角膜基中央,对照组注入生理盐水50μL。通过前段照相、共聚焦显微镜检查、病理组织学变化、感染角膜组织培养对模型进行评价。结果真菌浸润范围、角膜上皮细胞和内皮细胞水肿程度、菌丝数量均与时间呈正相关;炎性细胞浸润数量造模后第7天达到高峰,以中性粒细胞为主;实验各时间点均可见菌丝平行于基质纤维生长;感染后角膜组织培养可见茄病镰刀生长;造模成功率为86%。结论采用基质注射茄病镰刀孢子的方法首次成功建立茄病镰刀性角膜炎树鼩模型。

  • 标签: 树鼩 茄病镰刀菌 动物模型 真菌感染 角膜炎
  • 简介:脱氧雪腐镰刀烯醇(呕吐毒素)多见于我国长江中下游地区生产的小麦籽粒中,累积超标后无法食用,造成经济损失。本研究旨在通过简单工艺处理使呕吐毒素超标面粉(或小麦),降低呕吐毒素含量,以期合理的再利用。实验中将呕吐毒素含量超标面粉经揉面、水洗处理后分离成湿面筋和水淀粉,分别脱水、低温烘干后,用高效液相色谱仪测其呕吐毒素含量,匀在1000μg/kg以下。本方法为被呕吐毒素污染超标的面粉或小麦的重新利用提供参考依据。

  • 标签: 小麦 面粉 呕吐毒素 谷朊粉 淀粉
  • 简介:摘要1例急性髓系白血病(AML)患儿在化疗期间出现发热和皮疹,宏基因组二代测序技术及血培养结果提示茄病镰刀感染,确诊侵袭性镰刀病(IF),累及血液、皮肤软组织和鼻中隔。经重组人粒细胞刺激因子促进骨髓造血恢复、两性霉素B抗感染及伏立康唑再次预防等处理后IF持续缓解,随访至感染后7个月余(造血干细胞移植后3个月余),IF未复发。

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  • 简介:目的建立茄病镰刀感染皮肤的ICR小鼠模型。方法将茄病镰刀三个不同浓度的悬液分别接种于正常和免疫抑制ICR小鼠受损及正常未受损的皮肤,于接种后第7、14、21、28天处死动物,取皮疹和各脏器进行真菌镜检、培养和组织病理学检查。结果正常和免疫抑制组皮肤受损的小鼠均出现皮疹,而免疫抑制组皮疹程度重,持续时间长,且真菌镜检、培养及组织病理学大都可见菌丝。皮肤未受损的小鼠不发生皮疹。实验小鼠均未出现系统播散。结论接种10^9CFU/mL或10^10CFU/mL茄病镰刀的孢子悬液于免疫抑制ICR小鼠擦伤的皮肤,可有效造成ICR小鼠的茄病镰刀皮肤感染。

  • 标签: 镰刀菌属 皮肤 模型 动物
  • 简介:采集上海郊县1988年玉米样品50份、1989年玉米49份和小麦样品50份,用气相色谱分析法检测镰刀毒素脱氧雪腐镰刀烯醇(DON)和雪腐镰刀烯醇(NIV)用酶联免疫测定法测定样品中黄曲霉毒素B1(AFB1)。样本中DON、NIV和AFB1污染量中位数:1988年玉米样本分别为25.90ppb、12.70ppb和0.15ppb;1989年玉米分别为36.40ppb、13.70ppb和0.15ppb;1989年小麦分别为6.25、5.00和0.12ppb。1988年玉米样品中有26份同时检出AFB1、DON和NIV,共同污染率为52.0%;89年玉米样品的AFB1、DON和NIV共同污染率为59.2%(29/49);89年小麦为14.0%(7/50),可见黄曲霉毒素和镰刀毒素可共同污染粮食。另外,本调查分析中发现小麦和玉米中的DON和NIV污染量之间存在相关关系,而AFB1与这两种毒素间不存在相关关系。

  • 标签: 镰刀菌毒素 黄曲霉毒素 雪腐镰刀菌烯醇 酶联免疫测定法 污染量 慢性毒性
  • 简介:摘要:快速、准确地检测和监测脱氧雪腐镰刀烯醇已成为粮食行业迫切解决的问题,本文主要从介绍粮食中脱氧雪腐镰刀烯醇发生的原因及检测方法进行研究。在粮食行业中,选择良好的检测方式对策目的是为检测脱氧雪腐镰刀烯醇提供一种简单、快速、准确的方法,满足其多阶段的需要。对食物的获取、贮存、处理提供指导和帮助。

  • 标签: 粮食 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 检测方法
  • 简介:今年正值中国共产党建党80周年,歌颂党的题材已成为词曲作家们的创作热点,面由秦庚云作词、方石作曲的《镰刀斧头》,便是其中的一首好歌。这首歌的歌词开始仅用短短的四句,用"黑夜"和"黎明"点出了时代背景;用"割"和"砸"暗示了镰刀斧头和革命斗争;"铁"和"钢"不仅喻示工农联盟,更可泛指广大人民结成的钢铁长城;而"金光闪烁"仿佛使人看见了由镰刀斧头组成的闪闪发光的党徽,形象的表现了伟大而光荣的党领导全国人民在阳光大道上奋勇前进的壮丽情景。下面四句作者采用了以"抒情"代"叙事"的手法,以"你的故事走过千山万壑,谁能忘记岁月如歌"两句,引发人们对家喻户晓的、党领导各族人民浴血奋战历史的回顾和丰富想像,同时抒发出对"金色的星座"——党的深厚感情和坚定信仰。接下来通过百炼成

  • 标签: 中国共产党 时代背景 镰刀 斧头 广大人民 工农联盟