简介:采用超声波、加热、酸、碱等处理方法研究改善玉米蛋白可溶性的问题,探讨酶法制备具有抗氧化活性的玉米肽的方法。结果表明:调节玉米蛋白悬浮液pH值为11,在超声功率45W,超声温度60℃条件下超声30min,可显著提高玉米可溶性蛋白得率;比较6种蛋白酶酶解产物的抗氧化能力,确定Alcalase为制备玉米抗氧化肽的最佳水解用酶;通过单因素试验和响应面分析得出最适酶解工艺是:底物质量浓度10.0g/100mL、加酶量2806U/g、反应pH值9.0、反应温度56.0℃、反应时间185min。在该条件下制备的玉米酶解产物的DPPH自由基清除率为(85.40±0.27)%,与理论预测值的相对误差在±l%内。
简介:目的:从海参体壁组织中分离提取蛋白酶体,研究其酶学性质。方法:新鲜海参组织经匀浆、Tris-HCl缓冲液浸提后得到粗提物,再经(NH4)2SO4盐析、二乙氨乙基葡聚糖纤维素和丙烯葡聚糖凝胶S-300分离纯化后得到海参蛋白酶体。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,其分子质量200ku。结果:海参蛋白酶体特异性最强的检测底物Boc-GAA-MCA,最适pH8.0,最适反应温度45℃。40℃时蛋白酶体活性稳定,在1h的孵育过程中呈现一定的热激活效应。在50~60℃,酶活力随孵育时间的延长迅速下降。K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+均可明显抑制其活性。抗痛素、N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮、N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮及E-64均可显著抑制该蛋白酶体活性。结论:海参体壁蛋白酶体具有典型的蛋白酶体的复合型活性,其中胰蛋白酶样活性较强,之后是糜蛋白酶样活性,而肽基谷氨酰肽水解酶样活性最弱。
简介:目的:以塘溪蜜柚果汁为对象.研究柚苷酶处理对柑橘果汁抗氧化活性的影响。方法:用DPPH和·0H自由基的清除能力及Fe^3+还原能力评价抗氧化活性.并分析它们与抗坏血酸、总酚、柚皮苷和柚皮素含量的关系。结果:原果汁对照、酶处理对照和酶处理果汁清除DPPH自由基的IC。值分别为18.8,22.4,22.0g/100g;清除·OH自由基的IC50值分别为3.5,3.7,3.2g/100g;Fe^3+还原能力值分别为18.8,14.2,14.3mg抗坏血酸/100g;它们的抗坏血酸含量分别为40.2,37.8,34.3mgl00g,总酚含量分别为44.4,31.4,38.9mg/100g,柚皮苷含量分别为56.9,48.0,0.8mg/100g,柚皮素含量分别为0,0,24.3mg/100g。抗坏血酸、总酚和柚皮素对瑭溪蜜柚果汁的3种抗氧化活性有显著影响:柚皮苷对DPPH自由基清除能力和Fe^3+还原能力具有显著影响,而对·0H自由基清除能力的影响不显著。结论:柚苷酶处理能显著增加柑橘果汁·0H自由基清除能力.同时柚苷酶处理过程中的热、光和氧等会引起抗坏血酸和总酚含量降低,从而导致DPPH自由基清除能力和Fe^3+还原能力轻微下降。
简介:目的:研究浙江省5种杨梅果渣(荸荠、晚稻、东魁、丁岙和早大梅)的抗氧化活性、膳食纤维含量和膳食纤维功能特性。方法:膳食纤维采用酶质量法分析,抗氧化活性采用FRAP、DPPH和ABTS3种体外抗氧化评价方法进行评价。结果:杨梅渣具有较高的总酚(27.65—47.41mg/gDW)和较好的抗氧化能力。5个品种中,晚稻品种表现出最高的多酚含量、最好的总还原力以及清除DPPH和ABTS自由基的能力。膳食纤维的分析结果表明,不溶性膳食纤维是杨梅渣膳食纤维的主要成分,占总膳食纤维的82.72%~93.96%。功能分析结果表明,杨梅渣膳食纤维的持水能力和持油能力均强于其它果渣。结论:杨梅渣是一种含有大量功能性活性物质的膳食纤维资源,其开发前景广阔。
简介:氨基甲酸乙酯是发酵食品天然产生的1种2A级致癌物。建立以氨基甲酸乙酯脱氨酶为基础的生物清除方法,在食品安全方面具有重要意义。利用单因素比较方法,通过测定比酶活,对氨基甲酸乙酯脱氨酶的发酵条件和酶学性质进行研究。结果表明,氨基甲酸乙酯的最适发酵条件是:以15.0g/L麦芽糖为碳源,5.0g/LNH4Cl+5.0g/L酵母膏为氮源,7.5g/L氨基甲酸乙酯,培养温度28℃,起始pH5.5。培养菌株枯草芽孢杆菌ZJ0930h后,氨基甲酸乙酯脱氨酶的比酶活达到最大值18.86U/mL。经盐析、离子交换和膜浓缩后,氨基甲酸乙酯脱氨酶的纯化倍数达到174,冷冻干燥的酶粉比活力为32186U/g。氨基甲酸乙酯脱氨酶的最适催化温度45℃,最适反应pH4.0。该酶具有一定的热稳定性,在酸性环境的催化活力和稳定性较好,适当浓度的Zn2+和Mg2+对酶活有显著促进作用。菌株ZJ09所产氨基甲酸乙酯脱氨酶具有良好的催化能力,易于发酵制备,是一种值得深入研究和开发的食品用酶,具有广泛的产业化应用前景。