简介：摘要目的探讨分析实时荧光定量PCR检测诊断结核病的应用价值。方法回顾性分析本院收治的80例结核病患者作为本次研究对象。对患者行实时荧光定量检查以及涂片抗酸染色法检查，对比分析两种不同检验诊断方法的结果。结果通过对患者行涂片抗酸染色法检测，发现最终的阳性检测共计为33例41.25％，对患者行实时荧光定量检验，发现最终的阳性检测共计为69例86.25％，实时荧光定量检验诊断方法检出率，相较涂片抗酸染色法检测明显较高，差异显著（P＜0.05）。结论通过对结核病患者行实时荧光定量检验方法诊断，可以取得较高的诊断率，且具有较高的灵敏性和特异度，可以及早为结核病患者的早期治疗提供临床依据，在一定程度上对患者的治疗预后起到直接影响，可以在临床中推广应用。

简介：【背景】小麦叶疫病菌于20世纪60年代入侵我国后,迅速传播扩散并在局部区域造成严重危害,对我国小麦的健康发展构成了巨大威胁。【方法】设计出检测小麦叶疫病菌的特异性引物,建立快速检测该病菌的PCR方法。用真菌通用引物ITS4/ITS5对小麦叶疫病菌进行PCR扩增,将扩增产物进行克隆和测序,使用DNAMAN软件设计出检测该病菌的特异性引物LJY1和LJY2,优化PCR反应体系。【结果】建立了该病菌的PCR检测方法,PCR反应体系：25mmol·L^-1MgCl22.5μL,10mmol·L^-1dNTP1.0μL,10μmol·L^-1引物各0.5μL,DNA模板8ng,最佳退火温度57.6℃。【结论与意义】该方法可以准确地将小麦叶疫病菌与其他链格孢属的真菌区分开。本研究结果为小麦叶疫病的快速检测提供了依据,能够有效防止该病菌在小麦进出口贸易中传入我国。

简介：摘要目的探讨肠道致病菌PCR检测及应用价值。方法研究大肠杆菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特菌4种肠道致病菌，通过PCR法检测，分析PCR检测在肠道致病菌检测中的作用。结果多重PCR方法可扩增致病菌目的基因片段，具有较强特异性，可检测随意接种3个细菌。结论多重PCR可快速、准确检测大肠杆菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特菌4种肠道致病菌，值得推广应用。

简介：近年来，海豚链球病已给我国及世界罗非鱼养殖带来了巨大的经济损失。为建立特异、敏感、快速的罗非鱼海豚链球菌PCR诊断方法，根据NCBI数据库已公布的海豚链球菌基因序列，设计合成种特异性引物CM1／CM2，进行海豚链球菌特异基因片段的PCR扩增试验、反应条件的优化及不同检测材料的比较。同时测试了方法的特异性和敏感性，对不同养殖鱼场的10份临床样品进行了检测。试验结果表明，引物CM1／CM2可以扩增到与预计大小相符的870bp海豚链球菌特异性基因片段；PCR反应与鮰爱德华氏细菌、Ⅰ型荧光假单胞菌、点状产气单胞菌点状亚种、鳗弧菌、温和气单胞菌、肠型点状产气单胞菌、柱状黄杆菌、嗜水气单胞菌和河弧菌水产常见病原菌均无交叉反应；能够检测的最低细菌数为20～30个海豚链球菌；同时，该PCR可以直接从病鱼的脑、肝脏、肾脏及脾脏组织扩增出特异性目的片段；临床菌株检测结果与基于菌株16srRNA基因序列系统进化分析结果一致。由于病鱼内脏组织总DNA、菌落及菌液可直接用于该PCR扩增，最大限度缩短了整个检测时间及降低了检测成本。方法的建立为致病性海豚链球菌检测提供了一种简便、快速的途径，具有较好的应用前景。

简介：摘要荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、精确度高、检测范围宽、重复性好优势，本文就其方法对水体中的微囊藻进行检测。

简介：目的：探讨荧光定量PCR仪检测疟原虫的应用价值。方法：选取我省出入境单位收集到的已经镜检法证实为恶性疟疾的全血样本32例、镜检为阴性的全血样本13例作为研究对象，所有样本中均提取DNA并加入RT-PCR检测试剂进行荧光定量PCR仪检测，观察分析检测结果。结果：荧光定量PCR仪检测结果显示：恶性疟疾全血样本23例、间日疟疾全血样本11例，阴性全血样本11例，诊断符合率95.6%。复检结果显示：2例标本通过PCR扩增、序列对照，发现其测序结果与公布的疟原虫序列一致，确定均含有疟原虫。结论：荧光定量PCR仪检测疟原虫的应用价值高，能够敏感、可靠的检出疟原虫DNA。

简介：[摘要] 炭疽是一种烈性传染病，17世纪欧洲曾发生过一次炭疽大流行，导致约6万人丧生。2001年炭疽首次被真正作为生化武器用于恐怖袭击。建立一种快速敏感特异的检测体系对于炭疽诊断是十分必要的。本研究中我们建立了快速鉴别炭疽芽孢杆菌的PCR体系，用相关菌种进行了特异性评价，并用模拟粪便标本对该体系开展了临床应用价值的评价。

简介：摘要目的建立一种灵敏且特异的实时荧光定量RT-PCR方法，用于快速检测盖塔病毒(getah virus, GETV)。方法从GenBank数据库下载GETV基因序列，使用Clustal X完成序列比对，针对高保守区段设计特异性引物和探针；以GETV核酸为标准品建立标准曲线，分别对检测反应的灵敏度、特异性和稳定性进行评价。结果本方法能特异地检测GETV，与多种虫媒病毒无交叉反应；灵敏度为1.0×10 pfu/ml，批内和批间变异系数均小于1%。从湖南、河北、福建、重庆采集的196批蚊虫中检出1批GETV阳性。结论建立了灵敏度高，特异性强的TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR方法用于GETV筛查。

简介：摘要：由于多重PCR技术是一种现代化新型技术手段合理运用的全新产物，能够被广泛地应用到各个领域当中，更是极大层面上地为之后病原微生物检测的应用效能以及优势体现，提供了更为完善的基础引导以及帮助，减少了在日常生活中一些不合理问题出现的可能性。基于此，本文更是从多重PCR技术、多重PCR技术在病原微生物检测中的价值、多重PCR技术在病原微生物检测中的应用方法研究，三个角度展开了更为深入的研究以及分析，主要也是为了能够带动之后相关技术手段的有效与全面发展。

简介：

简介：本研究建立了检测与诊断猪圆环病毒的PCR方法，并对该方法进行了标准化研究。该方法快速、敏感、特异性强，可扩增10ng的阳性质粒的DNA．可以从30μL病料组织悬液或全血中扩增检测PCV，并且该方法可以区分PCV1和PCV-2，对其它病原微生物如PPV、PRRSV、SIV以及许多细菌不能检出。应用此方法对6省市的12个猪场的225份病料进行了检测，对阳性病料进行了病毒分离，对分离的病毒进行了电镜观察与序列测定，结果证实分离的病毒为PCV-2。

简介：摘要：随着我国经济的快速发展和社会的不断变化，我国的科学技术也取得了巨大的进步，为各领域的科学研究提供了强大的技术支持。荧光定量 PCR技术是在原有的 PCR技术基础上发展起来的一种新兴核酸定量技术，是时代发展的产物，他可以进一步将荧光能量传递技术应用于常规的 PCR仪器中，在整个反应体系中增加荧光染料或者是荧光基团，主要是利用荧光信号的积累来实现对整个 PCR过程的实时监测，并最终根据反应标准曲线对未知模板浓度进行预测。如今，荧光定量 PCR技术已经被应用于国内外的环境监测方面，有利于加强对环境中微生物的检测和研究工作，随着该项技术的不断完善和发展，未来在环境微生物检测方面将会有着广阔的发展及应用前景。

简介：摘要转基因技术给全球的食品行业带来了巨大的经济效益，随着世界上各国不断对转基因技术和转基因农产品的开发利用，人们开始广泛关注食用转基因产品对人类健康的影响以及种植转基因农产品对生态环境的影响。各国政府和国际机构都十分重视对转基因作物及转基因食品进行综合评价，对转基因作物及转基因食品的综合评价需要一套科学合理的安全评价体系，也应该建立一套完善、严格的法律法规。本文分析了实时荧光定量PCR技术在转基因食品检测领域中的应用。

简介：摘要：本论文旨在探索使用PCR技术检测环境样品中的非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus，ASFV)污染情况的方法和应用。通过开展一系列实验和分析，我们研究了PCR技术在ASFV检测中的敏感性和特异性，以及其在监测和控制非洲猪瘟的潜在作用。

简介：摘要：随着生物技术的飞速发展，转基因食品的生产和消费逐渐成为一个备受争议的话题。因此，转基因食品的检测和监管变得尤为重要。实时荧光定量PCR技术是一种高效、敏感的分子生物学方法，已广泛应用于转基因食品检测中。本文将介绍实时荧光定量PCR技术的原理、方法和应用，探讨其在转基因食品检测领域的重要性，并讨论相关问题和挑战。实时荧光定量PCR技术为转基因食品检测提供了一种可靠的工具，对食品安全和消费者权益的保护起到了重要作用。

简介：摘要：随着科学技术的进步和发展，我国病原微生物检测领域也取得了显著的成果，尤其是多重PCR技术的应用，大大提高了病原微生物检测的效率，节省了人力、物力。本文主要阐释了多重PCR技术的概念原理以及在病原微生物检测中的实际运用等问题，希望给相关的病原体微生物检测领域人员提供一定的借鉴价值。

简介：【摘要】近年来，随着植物基因工程技术在农业生产行业中得到越来越广泛的应用,更多的带有改良育种特性基因的新型转基因育种品种也随之在世界范围内进行了广泛种植栽培,所以随之而来的就是转基因食品迅猛地发展,与转基因农业产品规模的商业化比较更引发了人们对农产品质量安全问题的忧虑。为了能确保转基因商品管理检测制度建设的进一步顺利推行,那么建立一个迅速、正确、高通量度的定量管理检验制度手段已十分必要。该文着重阐述了实时荧光定量PCR技术及在转基因食品定量检测过程中的运用,同时展望了建立质粒标准分子的技术来进行对较高转基因植物产品的定性检验。

简介：目的建立梅毒螺旋体的荧光定量PCR检测方法。方法依据梅毒螺旋体（Treponemapallidum，TV）DNA多聚酶I（polA）基因序列，设计MGB—Taqman探针和PCR引物，对TPPA法检测到的不同国家和人种梅毒螺旋体抗体阳性患者和阴性人员血液样本进行检测，验证该PCR方法的灵敏度和特异性，以及2种检测方法的一致性。结果PCR产物测序证实新建的荧光PCR方法可以扩增到梅毒螺旋体polA基因区200bp长DNA片段。该方法特异性强、灵敏度高，可检出每微升血液中10拷贝梅毒DNA。在31例TPPA法检测结果为阳性的样本中，有21例为PCR阳性。证明其中10例TPPA法阳性为非现行感染，可能不具有传染性。统计分析表明该荧光PCR方法与TPPA方法对不同国家和种族人群检测结果未出现显著差异。结论新建的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好，可排除TPPA法阳性梅毒患者中非现行感染的旅行者，是适用于不同地区和种族的旅行者进行梅毒检测的新方法。

简介：对102份血清标本分别用PCR和ELISA方法检测HBV—DNA,HBsAg,抗—HBs,HBeAg,抗—HBe,抗—HBc（IgG）,抗—HBc（IgM）和Pre—S2。PCR检测结果表明:在HBsAg（+）血清中,HBV—DNA的检出率为70%。在HBeAg（+）血清中,HBV—DNA的检出率为100%。在抗—HBs（+）/抗—HBc（+）血清中,HBV—DNA的检出率为20%。因此大多数HBsAg携带者具有乙型肝炎病毒（HBV）传染性,抗—HBs（+）抗—HBc（+）血清不能排除HBV的传染性。

简介：摘要目的探讨荧光定量PCR检测乙肝DNA分析前质量控制措施。方法选取本院收治的25例乙肝两对半检测确诊为乙肝大三阳患者的血液,每个患者的血液平均分为A、B、C、D组，A组即刻测定，B组室温放置2天测定，C组4℃放置7天测定，D组溶血即刻测定，比较不同的储存时间、温度以及标本是否溶血对乙肝病毒DNA进行荧光定量测量结果的影响。结果未溶血标本与溶血标本相比以及不同储存时间和温度相比，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论标本溶血、储存时间以及温度对荧光定量PCR检测乙肝大三阳血清标本DNA的结果无影响。